Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Токсин B
C Diff ToxB 2BVM.png
Структура токсина B глюкозилтрансферазы C.difficile, показывающая UDP и глюзозу из PDB записи 2BVM. [1]
Идентификаторы
ОрганизмClostridium difficile
СимволtoxB
Альт. символыtcdB
Entrez4914074
PDB2BVM
RefSeq (Prot)YP_001087135.1
UniProtP18177
Прочие данные
Номер ЕС2.4.1.-
Хромосомагеном: 0,79 - 0,8 Мб
Ищи
СтруктурыШвейцарская модель
ДоменыИнтерПро
TcdB токсин N-концевой спиральный домен
Идентификаторы
СимволTcdB_N
PfamPF12918
Доступные белковые структуры:
Pfam  структуры / ECOD  
PDBRCSB PDB ; PDBe ; PDBj
PDBsumкраткое изложение структуры
Домен каталитической гликозилтрансферазы TcdA / TcdB
Идентификаторы
СимволTcdA_TcdB
PfamPF12919
Доступные белковые структуры:
Pfam  структуры / ECOD  
PDBRCSB PDB ; PDBe ; PDBj
PDBsumкраткое изложение структуры
Семейство пептидаз C80
Идентификаторы
СимволПептидаза_C80
PfamPF11713
ИнтерПроIPR020974
Доступные белковые структуры:
Pfam  структуры / ECOD  
PDBRCSB PDB ; PDBe ; PDBj
PDBsumкраткое изложение структуры
TcdA / TcdB порообразующий домен
Идентификаторы
СимволTcdA_TcdB_pore
PfamPF12920
TCDB1.C.57
OPM суперсемейство199
Белок OPM6oq6
Доступные белковые структуры:
Pfam  структуры / ECOD  
PDBRCSB PDB ; PDBe ; PDBj
PDBsumкраткое изложение структуры

Токсин B Clostridium difficile - это цитотоксин, продуцируемый бактериями Clostridium difficile . Это один из двух основных видов токсинов, вырабатываемых C. difficile , другой - энтеротоксин ( токсин А ). Оба очень эффективны и смертельны. [2] [3]

Структура [ править ]

Токсин B (TcdB) представляет собой цитотоксин с молекулярной массой 270 кДа и изоэлектрической точкой p1, равной 4,1. [4] Токсин B имеет четыре различных структурных домена: каталитический , цистеин-протеазный , транслокационный и рецепторный . [5] N-концевой глюкозилтрансфераза каталитический домен включает в себя аминокислотные остатки 1-544 в то время как цистеин протеазы домена включает в себя остатки 545-801. Кроме того, область транслокации включает аминокислотные остатки от 802 до 1664, в то время как область связывания рецептора является частью С-конца.область и включает аминокислотные остатки от 1665 до 2366. [5]

Схематическое изображение последовательности белка TcdB. Каталитическая область, показанная синим цветом, содержит остатки 1–543, область цистеиновой протеазы, показанная черным, содержит остатки 544–801, область транслокации, показанная красным, содержит остатки 802–1664, а область связывания рецептора, показанная зеленым цветом, содержит остатки 1665–2366.

Гликозилирования активность токсина B происходит в N-концевой каталитической области (остатки 1-544). Эта область гликозилирует субстраты независимо от какой-либо цитотоксической активности. [6] Однако небольшая делеция области связывания рецептора вызывает ослабление активности токсина B. [6] Область транслокации содержит гидрофобную стеблевую структуру, которая может помочь остаткам 958–1130 в формировании пор, покрывающих мембрану . [5] Область связывания рецептора, которая включает C-концевую повторяющуюся область (CRR), увеличивает взаимодействие TcdB с мембраной, но не участвует в образовании пор. [7] Кроме того, цистеиновая протеазаи области транслокации имеют сложные структуры, которые играют важную функциональную роль в транслокации и связывании рецепторов. [8] Однако удаление области транслокации аминокислот снижает цитотоксическую активность в 4 раза. И цистеиновые протеазы, и большинство областей транслокации содержат гидрофобные белки, которые показывают доступ к TcdB и другим токсинам, пересекающим клеточные мембраны . [8]

Домен привязки рецептора [ править ]

С-концевой из TcdB (зеленая область на фиг. 2) содержит область , известную как объединенные повторяющиеся олигопептидов (растениеводство) , который содержит аминокислотные остатки 1831-2366. [9] Эти CROP состоят из 19–24 коротких повторов (SR) аминокислот, примерно 31 длинных повторов (LR) аминокислот, токсина A и токсина B. [9] [10] Область CROP TcdB состоит из 19 SR и 4 LR. Эта область SR и LR позволяет формировать мотивы связывания клеточной стенки, которые помогают связывать сахарные фрагменты на поверхности клеток. [9]

Очищение [ править ]

Для того , чтобы очистить от токсина B C. несговорчивый культур клеток, мозг сердца бульон используется , потому что способствует синтезу токсина B. [11] Способ фильтрации облегчает очистку токсин B из надосадочной жидкости из C.difficile , . Токсина концентрация супернатанта пропорционально числу клеток организма. Многие исследования предполагают, что большинство токсинов высвобождается либо в поздней логарифмической фазе, либо в ранней стационарной фазе , следовательно, токсин B непрерывно секретируется клетками. [2]Хотя существует множество методов, используемых в различных исследованиях для очистки токсина B, в большинстве исследований используются методы, включающие концентрацию ультрафильтрованного сульфата аммония или осаждение , вместо гель-фильтрации или ионообменной хроматографии . Кроме того, эффективность метода ионообменной хроматографии помогает различать TcdA и TcdB.

Функция [ править ]

Когда каталитический треониновый остаток глюкозилтрансферазы дезактивирует семейство малых GTPases , например семейство Rho ; Rac и Cdc42 внутри мишени клеток Беспокоить сигнальную трансдукцию механизмов, что приводит к неблагополучному по актину цитоскелета , клетки - клетка - переход , и апоптоза (. Фиг.5). [12] [13] [14] Rho индуцирует активность актиновых стрессовых волокон . Rac белкиконтролирует активность мембран и нейтрофилов НАДФН- оксидазы . Cdc42 регулирует образование филаментов F-актина у филоподий .

Цитотоксичность [ править ]

Рисунок 3: Токсин B изменяет динамику клеточной структуры. Изображения SEM: а) контрольные клетки и б) клетки, обработанные TcdB в течение 18 часов. Черная стрелка указывает место образования пузырей на клеточной поверхности.

Несколько исследований показали , что присутствие TcdB в млекопитающих клетках приводят к быстрым изменениям в пределах клеточной морфологии и клеточной сигнализации . В течение короткого периода времени на клетках появляется бляшка с небольшими дозами TcdB и TcdA. Кроме того, гибель клеток является одним из основного влияния этих токсинов после того, как клетки были опьянены . Исследование Donta et al. Показало, что TcdB оказывает серьезное влияние на другие клетки млекопитающих, такие как клетки яичников китайского хомячка , эпителиальные клетки шейки матки человека, клетки надпочечников мышей , гепатоциты крыс и астроциты крыс (рис. 3). [15][16]

Цитотоксическая активность основана на типах клеток, которые могут варьироваться от 4 раза до 200 раз. Обычно, когда клетки инфицированы TcdB, они не только теряют свою структурную целостность, но и уменьшаются в количестве филаментов F-актина . [17] Округление клеток с помощью TcdB занимает не более 2 часов (рис. 4), но что касается гибели клеток , это может занять около 24 часов. [15] Что касается диареи, ассоциированной с Clostridium difficile (CDAD), влияние цитопатии более критично, чем фактическая гибель клеток, потому что, как только клетки теряют целостность актиновой нити цитоскелета , они также теряют свою нормальную функцию.

Рисунок 4: Воздействие токсина B на астроциты крыс. Это вероятная иллюстрация астроцитов крыс, инкубированных со 100 нг / мл токсина B в течение 2 часов при 37 ° C.

Воздействие на небольшие GTPases [ править ]

Причиной цитотоксической активности TcdB в клетке - хозяине, в основном , с помощью опосредованного рецептором эндоцитоза [ править ] . Кислые эндосомы позволяют токсину B попадать в цитозоль . Это явление происходит за счет области рецептора связывания , которая позволяет токсину проникать в клетки-хозяева [ необходима цитата ] . Благодаря доступности клеток - хозяев цитозоле , TcdB деактивирует небольшие GTPases (рис. 5), например, Rho семьи членов Rac и Cdc42 в процессе гликозилированияиз треонина 35 в Cdc42 и Rac, и треонин 37 в Rho. [18] [19] Этот GTPases Rho встречается повсеместно в цитозоле из эукариотических клеток , которые ответственны за организацию актинового цитоскелета , потому что токсины в цитозоле вызывает конденсации актиновых филаментов , как следствие ячейки округления и мембрана блеббинг (рис . 3), что в конечном итоге приводит к апоптозу . [20] [21] TcdB вызывает критические изменения в динамике и морфологии клеток.. На рисунке 3 показано возможное действие токсина B на поверхность клетки; мембранный пузырек (черные стрелки). [22] Кроме того, TcdB инактивирует ГТФазы Rho. Как следствие, нарушаются межклеточные соединения, что увеличивает проницаемость эпителия для токсина B и накопление жидкости в просвете. Это один из основных возбудителей заражения диареей, вызванной Clostridium difficile (CDAD) (рис. 5). [23] [24]

Рисунок 5: Внутриклеточные модификации TcdB. Во-первых, токсин B связывается с поверхностью клетки и интернализуется посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза. Во-вторых, подкисление эндосомы вызывает образование поры, через которую перемещается GTD. В-третьих, захват UDP-глюкозы помогает связываться с GTPases и высвобождаться в цитозоль. Наконец, GTD глюкозилирует GTPases семейства Rho на клеточной мембране и контролирует регуляцию транскрипции и, в конечном итоге, апоптоз клетки.

Кроме того, скорость гидролиза UDP-глюкозы TcdB примерно в пять раз выше, чем TcdA. [25] Несколько исследований показали, что Rho демонстрирует посттрансляционную модификацию через пренилирование и карбоксиметилирование, которое происходит на цитоплазматической стороне плазматической мембраны , следовательно, обмен GTP на GDP . [26] Когда TcdB связывается с Rho и другими малыми GTPases , GTP гидролизуется до GDP., что приводит к GTP-связанному (активному) к GDP-связанному (неактивному) (рис. 5). Кроме того, эта обменная активность регулируется гуаниновыми факторами в цитозоле клетки. [27]

Нарушение сигнальных путей [ править ]

Клеточная регуляция Rho, Rac и Cdc42 действует за пределами актиновых филаментов цитоскелета (рис. 4) [17]. Эти небольшие ГТФазы включены в клеточный цикл, который регулирует сигналы через митоген-активируемые протеинкиназные киназы. (МАПКК). [28] Некоторые физиологические части клеток, которые не вовлечены в актиновые филаменты , могут не сразу вызывать округление клеток или гибель клеток , но при активности нижележащих путей могут приводить к разрушению актиновых филаментов и, наконец, к гибели клеток . [17]

В 1993 году исследование, проведенное Shoshan et al., Показало, что клетки с TcdB изменяют активность фосфолипазы A2 . Это было независимое событие от разрушения актинового цитоскелета . [29] Шошане и др., Также показал , что TcdB ингибирует рецептор активности сигнализации путем деактивации белков Rho с помощью фосфолипазы D . [29]

Формирование пор [ править ]

TcdB получает доступ к внутренней части клетки через клатрин-опосредованный эндоцитоз , [30] Когда токсин B является частью цитозола , то глюкозилтрансфераза проходит через эндосомную мембрану , что снижает рН индуцирует транслокацию и в конечном итоге приводит к морфологическим изменениям транслокации области остатков ( 958–1130). [31] В гидрофобных областях встроены в принимающей мембране с образованием пор , которые позволяют глюкозилтрансферазы доменов проходить через него . [31]Когда клетки инфицированы TcdB в кислой среде, он ослабляет токсины и вызывает изменение формы (рис. 6). [31] Как следствие кислого pH, TcdB демонстрирует четкие различия в исходной флуоресценции триптофана , чувствительности протеаз и гидрофобных поверхностях. [31] Другая группа показала, что подкисление приводит к конформационным изменениям токсина и, что более важно, помогает формировать поры. [7] Предполагаемая область транслокации (рис. 2) составляет примерно 801–1400 аминокислот, из которых остатки 958–1130 являются гидрофобными и ответственны за образование трансмембранных пор. [20]В большинстве исследований использовался штамм 630 TcdB для демонстрации порообразовательной активности токсинов C. difficile . [31]

Вызвано pH [ править ]

Чтобы выяснить, имеет ли место протеолитическое расщепление TcdB на поверхности клетки или в кислых эндосомах , в исследованиях использовался бафиломицин A1 , который, как известно, блокирует H + -АТФазы v-типа в эндосомах. Это снижает кислотность эндосом. [31] физиологическое поглощение путь из TcdB предотвращает цитопатические активности путем TcdB. [31] Когда клетки находились в кислойВ условиях (pH 4,0) в течение 5 минут после связывания TcdB с поверхностью клетки при 37 градусах Цельсия наблюдались изменения формы и округление. Однако, когда округлые клетки инкубировали в течение дополнительного часа при нейтральном pH (7,0) с аналогичными параметрами, округления клеток не наблюдалось. [15] [31] Оба исследования показали, что токсин B обладает свойством протеолитического расщепления , которое имеет решающее значение для доступа к цитозолю . [7] [15] [31] Кислый pH эндосом приводит к топологическим изменениям TcdB (рис. 6). [7]

Рисунок 6: Организационная область TcdB, показывающая разницу между нейтральным и кислым pH (4).

Генетика [ править ]

Ген , который кодирует белок TcdB, tcdB , находится в пределах хромосомной области 19,6 кб . Это известно как локус из патогенности или PaLoc (рисунок 2). [32] [33] открытая рамка считывания (ORF) , для tcdB является 7,098 нуклеотидов в длину. [17] Важно отметить, что помимо основных токсиновых генов в регионе PaLoc есть еще три дополнительных гена, которые кодируются в регионе PaLoc: tcdR (L), tcdC (R) и tcdE.в середине. Эти гены помогают регулировать экспрессию TcdA и TcdB. Они также помогают выделять или высвобождать токсины из клетки. [17] , кодирующий ген tcdE , расположенный между tcdB и tcdA, аналогично Холин белков, таким образом, предполагается , что tcdE работает в качестве посредника гена , который усиливает высвобождение или секрецию TcdA и TcdB , следовательно , увеличивая проницаемость принимающей клетки мембрана . [17]

Рисунок 2: Локус архетипической патогенности (PaLoc), кодирующий большие клостридиальные токсины (LCT), участвующие в инфекциях CDI, вызванных C. difficile.

Обнаружение токсинов [ править ]

Существуют разные размеры плазмид C. difficile . Обнаруженные молекулярные массы находятся в диапазоне от 2,7 × 10 6 до 100 × 10 6 , но размеры плазмид не коррелируют с токсичностью . Для определения уровня токсина B у C. difficile клиницисты широко используют анализы клеточных культур, полученные из образцов стула пациентов с PMC . [2] [3] Анализ клеточной культуры рассматривается как «золотой стандарт» для определения токсичности в C.difficile ,Так как небольшое количество токсина B способно вызывать округление клеток (рис. 4), то основным преимуществом клинических лабораторий является определение корреляции с CDAD, вызванным TcdB. [2] [3] Хотя цитотоксическая активность крупных клостридиальных токсинов (LCT) была обнаружена в образцах стула пациентов с PMC, активность токсина B имела более пагубные цитотоксические эффекты по сравнению с токсином A. [2] Следовательно, активность токсина A ослаблена. когда он не изолирован от токсина B. [2] [3] Выявление токсичности C. difficile чрезвычайно чувствительно, однако с использованием клеточной культурыанализ позволяет клиническим лабораториям решить эту проблему; достаточно использовать всего лишь 1 пг / мл токсина B, чтобы вызвать округление клеток. [2] [3] Это главное преимущество использования анализа культуры ткани для выявления токсичности у пациентов с ЧМК . [2] Несмотря на то, что клинические лаборатории пытались использовать иммуноферментный анализ на микротитровальном планшете (ELISA) и другие методы для определения цитотоксической активности токсина B в фекалиях пациентов с PMC , результаты не так точны, как те, где использовали анализы клеточных культур . [2] [3] [34]

Фактор производства [ править ]

Исследования показали, что при добавлении противомикробного средства , например клиндамицина , в культуральную среду для выращивания цитотоксическая активность в культурах C. difficile увеличивается в 4-8 раз. [35] [36] Более того, зная роль антибиотиков в причинах PMC, многие более ранние исследования были сосредоточены на эффектах производства токсинов антимикробными препаратами . В результате исследования позволили сделать вывод, что субингибирующая природа уровней ванкомицина и пенициллина увеличивала продукцию токсина в культурах C. difficile . [37]Количество продуцируемого токсина коррелировало с использованием питательной среды для организмов. Другое исследование показало, что высокие уровни выработки токсина TcdB наблюдались в сложных средах, таких как бульоны для мозговых и сердечных инфузий . [38] [39] Высокие уровни токсинов были произведены с выделением высоковирулентных . И наоборот, низкие уровни токсинов производились при выделении слабовирулентных . Таким образом, это показывает, что производство токсинов регулируется совместно. Хотя механизм, лежащий в основе участия окружающей среды в модуляции сигналов, экспрессирующих токсины, не понят, исследования in vitro показали, что экспрессия токсина усиливается за счеткатаболическая репрессия и стресс, например, антибиотики . [40] [41] [42] Другое исследование показало, что ограничение биотина в хорошо охарактеризованной среде увеличивает продукцию TcdB в 64 раза и TcdA в 35 раз. Это было сделано с использованием C.difficile и биотина в дозах всего 0,05 нМ. [41] Несколько других ранних исследований опровергли теорию о том, что производство токсина имеет какое-либо отношение к стрессу или катаболитной репрессии либо токсина TcdA, либо TcdB. [42] Кроме того, во многих исследованиях говорится, что основная причина различий между другими исследованиями связана с выработкой токсина не всеми изолятами C. difficile..

Клиническое значение [ править ]

Многие ранние исследования показали, что токсин A (также известный как TcdA) является основным токсиновым белком, вызывающим диарею, связанную с антибиотиками (AAD); однако ученые-исследователи в течение последнего десятилетия или около того показали, что токсин B (или TcdB) играет более важную роль в развитии болезни, чем кто-либо прогнозировал. С этим знанием, Токсин В было идентифицировано как основная вирулентность фактор , который вызывает открытие плотных соединений из эпителиальных клеток кишечника , что позволяет токсин , чтобы увеличить проницаемость сосудов и вызывать кровотечение . Следовательно, это приводит к фактору некроза опухоли α (TNF α) и провоспалительным интерлейкинам.установлены в качестве основных возбудителей псевдомембранозного колита (PMC) и диареи, связанной с антибиотиками (AAD). [2] [3] [43]

Участие токсина A и, что наиболее важно, токсина B является ключевым элементом, определяющим заболевание, вызываемое C. difficile . Клинические лаборатории идентифицировали эти токсины в стуле пациентов на основании анализа антител и цитотоксичности . [44] Было показано, что эти бактериальные токсины связаны с геморрагическим токсином Clostridium sordellii (TcsH), летальным токсином (TcsL) и альфа-токсином Clostridium novyi (Tcn α), что делает эту когорту большим семейством клостридиальных токсинов. . [17] Из-за сходства этих токсинов с другими, исследователи классифицировали их как семейство больших клостридиальных токсинов (LCT). [9]

Механизм безлотоксумаба с TcdB [ править ]

Безлотоксумаб - это человеческое моноклональное антитело, разработанное для предотвращения рецидивов инфекций Clostridium difficile. С помощью рентгеновской кристаллизации структуры N-конца TcdB идентифицировано, что токсин состоит из трех доменов: домена глюкозилтрансферазы (GTD), цистеиновой протеазы и комбинированного домена повторяющихся олигопептидов (CROP). Безлотоксумаб специфически связывается с двумя гомологичными сайтами в домене CROP TcdB. Структурный анализ с помощью рентгеновской кристаллографии показывает, что связывание антител частично перекрывает предполагаемые карманы связывания углеводов. В соответствии с этой идеей безлотоксумаб блокирует связывание TcdB с клетками млекопитающих. [45]

Роль в псевдомембранозном колите [ править ]

Многие исследования предполагают, что на ранних стадиях заболевания PMC , TcdA более эффективен, чем TcdB. Это было выведено из экспериментов in vivo, в которых выработка токсинов TcdA была более серьезной, чем TcdB при цеците антибиотиков. [38] [46] Позже несколько исследований показали, что TcdB играет важную роль в заболевании PMC и ADD. Исследование показало, что даже несмотря на то, что C. difficile не продуцирует TcdA, симптомы болезни все же проявляются. [47] Более того, более поздние исследования показали, что очищенная форма TcdB является более смертоносным энтеротоксином по сравнению с TcdA, а также, что эпителий кишечника серьезно поврежден и вызывает острый воспалительный ответ.[48] Благодаря лучшему пониманию токсина исследователи смогли заявить, что TcdB является основным фактором вирулентности, который вызывает CDI по сравнению с TcdA. Однако, когда TcdA присутствует в кишечнике, это помогает облегчить активность TcdB, чтобы оказывать более широкое воздействие, следовательно, затрагивая несколько систем органов. [49] Кроме того, вакцинация хомяков против TcdA показала, что хомяки не были полностью защищены отболезни C. difficile, и это привело к выводу, что TcdB очень смертоносен и эффективен. [50] Кроме того, введение небольшой дозы TcdA со смертельной дозой TcdB внутривенно или внутрибрюшиннооказалось достаточно, чтобы вызвать смерть животного. Следовательно, TcdA работает как посредник выхода TcdB из кишечника. [50]

См. Также [ править ]

  • Clostridium difficile TcdE Holin
  • Холин

Ссылки [ править ]

  1. ^ Reinert DJ, Jank T, Aktories K, Schulz GE (сентябрь 2005). «Структурная основа функции токсина B Clostridium difficile ». Журнал молекулярной биологии . 351 (5): 973–81. DOI : 10.1016 / j.jmb.2005.06.071 . PMID  16054646 .
  2. ^ a b c d e f g h i j Lyerly DM, Krivan HC, Wilkins TD (январь 1988 г.). « Clostridium difficile : болезнь и токсины» . Обзоры клинической микробиологии . 1 (1): 1–18. DOI : 10,1128 / cmr.1.1.1 . PMC 358025 . PMID 3144429 .  
  3. ^ Б с д е е г Bartlett JG (1990). « Clostridium difficile : клинические аспекты». Обзоры инфекционных болезней . 12 Приложение 2: S243–51. DOI : 10,1093 / clinids / 12.Supplement_2.S243 . PMID 2406876 . 
  4. ^ фон Эйхель-Штрейбер C (1997). «Энтеротоксин А и цитотоксин В ( Clostridium difficile )». В Montecucco C, Rappuoli R (ред.). Справочник по белковым токсинам и их использованию в клеточной биологии . Оксфорд [Оксфордшир]: Издательство Оксфордского университета. п. 72. ISBN 978-0-19-859954-8.
  5. ^ a b c Албеса-Жове Д., Бертран Т., Карпентер EP, Свейн Г. В., Лим Дж., Чжан Дж., Хайре Л. Ф., Васишт Н., Браун В., Ланге А., фон Эйхель-Штрейбер С., Свергун Д. И., Фэйрвезер Н. Ф., Браун К. А. (Март 2010 г.). «Четыре различных структурных домена в токсине B Clostridium difficile, визуализированные с помощью SAXS». Журнал молекулярной биологии . 396 (5): 1260–70. DOI : 10.1016 / j.jmb.2010.01.012 . PMID 20070948 . 
  6. ^ a b Hofmann F, Busch C, Prepens U, Just I, Aktories K (апрель 1997 г.). «Локализация глюкозилтрансферазной активности токсина B Clostridium difficile в N-концевой части голотоксина» . Журнал биологической химии . 272 (17): 11074–8. DOI : 10.1074 / jbc.272.17.11074 . PMID 9111001 . 
  7. ^ a b c d Barth H, Pfeifer G, Hofmann F, Maier E, Benz R, Aktories K (апрель 2001 г.). «Низкое pH-индуцированное образование ионных каналов токсином B Clostridium difficile в клетках-мишенях» . Журнал биологической химии . 276 (14): 10670–6. DOI : 10.1074 / jbc.M009445200 . PMID 11152463 . 
  8. ^ a b Jank T, Aktories K (май 2008 г.). «Структура и механизм действия клостридиальных глюкозилирующих токсинов: модель ABCD». Тенденции в микробиологии . 16 (5): 222–9. DOI : 10.1016 / j.tim.2008.01.011 . PMID 18394902 . 
  9. ^ a b c d фон Эйхель-Штрейбер С., Боке П., Зауэрборн М., Телестам М. (октябрь 1996 г.). «Большие клостридиальные цитотоксины - семейство гликозилтрансфераз, модифицирующих малые GTP-связывающие белки». Тенденции в микробиологии . 4 (10): 375–82. DOI : 10.1016 / 0966-842X (96) 10061-5 . PMID 8899962 . 
  10. ^ Jank T, Giesemann T, Aktories K (апрель 2007). «Ро-глюкозилирование токсинов A и B Clostridium difficile: новое понимание структуры и функции» . Гликобиология . 17 (4): 15R – 22R. DOI : 10.1093 / glycob / cwm004 . PMID 17237138 . 
  11. ^ Мидор Дж, Tweten РК (июль 1988). «Очистка и характеристика токсина B от Clostridium difficile » . Инфекция и иммунитет . 56 (7): 1708–14. PMC 259466 . PMID 3384474 .  
  12. ^ Aktories K, Just I (декабрь 1995). «Моноглюкозилирование низкомолекулярных GTP-связывающих белков Rho клостридиальными цитотоксинами». Тенденции в клеточной биологии . 5 (12): 441–3. DOI : 10.1016 / S0962-8924 (00) 89107-2 . PMID 14732022 . 
  13. ^ Диллон ST, Рубин EJ, Якубович M, Потулакис C, LaMont JT, Feig LA, Gilbert RJ (апрель 1995). «Участие Ras-родственных белков Rho в механизмах действия токсина A Clostridium difficile и токсина B» . Инфекция и иммунитет . 63 (4): 1421–6. PMC 173169 . PMID 7890404 .  
  14. ^ Wilkins TD, Lyerly DM (февраль 1996). « Токсины Clostridium difficile атакуют Rho». Тенденции в микробиологии . 4 (2): 49–51. DOI : 10.1016 / 0966-842X (96) 81508-3 . PMID 8820565 . 
  15. ^ a b c d Pfeifer G, Schirmer J, Leemhuis J, Busch C, Meyer DK, Aktories K, Barth H (ноябрь 2003 г.). «Поглощение клетками токсина B. Clostridium difficile. Транслокация N-концевого каталитического домена в цитозоль эукариотических клеток» . Журнал биологической химии . 278 (45): 44535–41. DOI : 10.1074 / jbc.M307540200 . PMID 12941936 . 
  16. ^ Donta ST, Sullivan N, Wilkins TD (июнь 1982 г.). «Дифференциальные эффекты токсинов Clostridium difficile на культивируемые в тканях клетки» . Журнал клинической микробиологии . 15 (6): 1157–8. PMC 272271 . PMID 7107845 .  
  17. ^ a b c d e f g Вот, DE, Ballard JD (апрель 2005 г.). « Токсины Clostridium difficile : механизм действия и роль в заболевании» . Обзоры клинической микробиологии . 18 (2): 247–63. DOI : 10.1128 / CMR.18.2.247-263.2005 . PMC 1082799 . PMID 15831824 .  
  18. ↑ Just I, Selzer J, Wilm M, von Eichel-Streiber C, Mann M, Aktories K (июнь 1995). «Глюкозилирование белков Rho токсином B Clostridium difficile ». Природа . 375 (6531): 500–3. DOI : 10.1038 / 375500a0 . PMID 7777059 . 
  19. ↑ Just I, Wilm M, Selzer J, Rex G, von Eichel-Streiber C, Mann M, Aktories K (июнь 1995). «Энтеротоксин из Clostridium difficile (ToxA) моноглюкозилирует белки Rho» . Журнал биологической химии . 270 (23): 13932–6. DOI : 10.1074 / jbc.270.23.13932 . PMID 7775453 . 
  20. ^ a b фон Эйхель-Штрейбер C, Варфоломео I, Кнаутц Д., Зауэрборн М., Хаддинг У (ноябрь 1991 г.). «Морфологические изменения в прикрепленных клетках, вызванные токсинами Clostridium difficile » (PDF) . Труды биохимического общества . 19 (4): 1154–60. DOI : 10,1042 / bst0191154 . PMID 1794484 .  
  21. ^ Thelestam МЫ, Шавеш-Olarte Е (2000). Цитотоксические эффекты токсинов Clostridium difficile . Актуальные темы микробиологии и иммунологии . 250 . С. 85–96. DOI : 10.1007 / 978-3-662-06272-2_4 . ISBN 978-3-642-08668-7. PMID  10981358 .
  22. ^ Фиорентини С, Фаббри А, Falzano л, Fattorossi А, Matarrese Р, Р Rivabene, Donelli G (июнь 1998 г.). « Токсин B Clostridium difficile вызывает апоптоз в культивируемых клетках кишечника» . Инфекция и иммунитет . 66 (6): 2660–5. PMC 108253 . PMID 9596731 .  
  23. ^ Feltis Б.А., Wiesner С.М., Ким А.С., Эрландсен SL, Lyerly DL, Wilkins TD, Wells CL (декабрь 2000). « Токсины A и B Clostridium difficile могут изменять проницаемость эпителия и способствовать параклеточной миграции бактерий через энтероциты HT-29». Шок . 14 (6): 629–34. DOI : 10.1097 / 00024382-200014060-00010 . PMID 11131913 . 
  24. ^ Johal SS, Соломон K, S Додсон, Боррьелло SP, Mahida YR (июнь 2004). «Дифференциальные эффекты различных концентраций токсина A Clostridium difficile на функцию эпителиального барьера и экспрессию цитокинов» . Журнал инфекционных болезней . 189 (11): 2110–9. DOI : 10.1086 / 386287 . PMID 15143480 . 
  25. ^ Ciesla WP, Bobak DA (июнь 1998). « Токсины A и B Clostridium difficile представляют собой катион-зависимые гидролазы UDP-глюкозы с различной каталитической активностью» . Журнал биологической химии . 273 (26): 16021–6. DOI : 10.1074 / jbc.273.26.16021 . PMID 9632652 . 
  26. Перейти ↑ Adamson P, Marshall CJ, Hall A, Tilbrook PA (октябрь 1992 г.). «Посттрансляционные модификации белков p21rho». Журнал биологической химии . 267 (28): 20033–8. PMID 1400319 . 
  27. Перейти ↑ Zhou K, Wang Y, Gorski JL, Nomura N, Collard J, Bokoch GM (июль 1998 г.). «Факторы обмена гуаниновых нуклеотидов регулируют специфичность нисходящей передачи сигналов от Rac и Cdc42» . Журнал биологической химии . 273 (27): 16782–6. DOI : 10.1074 / jbc.273.27.16782 . PMID 9642235 . 
  28. ↑ Zhang Y, Dong C (ноябрь 2007 г.). «Регуляторные механизмы передачи сигналов митоген-активируемой киназы». Клеточные и молекулярные науки о жизни . 64 (21): 2771–89. DOI : 10.1007 / s00018-007-7012-3 . PMID 17726577 . 
  29. ^ a b Shoshan MC, Флорин I, Thelestam M (май 1993 г.). «Активация клеточной фосфолипазы A2 токсином B Clostridium difficile ». Журнал клеточной биохимии . 52 (1): 116–24. DOI : 10.1002 / jcb.240520115 . PMID 8320270 . 
  30. ^ Papatheodorou P, Zamboglou C, Genisyuerek S, G Гуттенберг, Aktories K (май 2010). «Клостридиальные глюкозилирующие токсины проникают в клетки через клатрин-опосредованный эндоцитоз» . PLOS ONE . 5 (5): e10673. DOI : 10.1371 / journal.pone.0010673 . PMC 2871790 . PMID 20498856 .  
  31. ^ a b c d e f g h i Qa'Dan M, Spyres LM, Ballard JD (май 2000 г.). «pH-индуцированные конформационные изменения в токсине B Clostridium difficile » . Инфекция и иммунитет . 68 (5): 2470–4. DOI : 10.1128 / IAI.68.5.2470-2474.2000 . PMC 97448 . PMID 10768933 .  
  32. ^ Картер GP, Руд JI, Lyras D (январь 2012). «Роль токсина А и токсина В в вирулентности Clostridium difficile ». Тенденции в микробиологии . 20 (1): 21–9. DOI : 10.1016 / j.tim.2011.11.003 . PMID 22154163 . 
  33. ^ Браун В, Hundsberger Т, Leukel Р, Sauerborn М, фон Айхель-Streiber С (ноябрь 1996 года). «Определение единого сайта интеграции локуса патогенности у Clostridium difficile ». Джин . 181 (1–2): 29–38. DOI : 10.1016 / S0378-1119 (96) 00398-8 . PMID 8973304 . 
  34. ^ Musher DM, Manhas A, Jain P, Nuila F, Waqar A, Logan N, Marino B, Graviss EA (август 2007). «Обнаружение токсина Clostridium difficile : сравнение результатов иммуноферментного анализа с результатами, полученными с помощью анализа цитотоксичности» . Журнал клинической микробиологии . 45 (8): 2737–9. DOI : 10.1128 / JCM.00686-07 . PMC 1951241 . PMID 17567791 .  
  35. Перейти ↑ Nakamura S, Mikawa M, Tanabe N, Yamakawa K, Nishida S (1982). «Влияние клиндамицина на продукцию цитотоксина Clostridium difficile » . Микробиология и иммунология . 26 (11): 985–92. DOI : 10.1111 / j.1348-0421.1982.tb00248.x . PMID 7167065 . 
  36. ^ Джордж RH, Джонсон M, Янгс D, Burdon DW (1980). «Индукция токсина Clostridium difficile антибиотиками». Современная химиотерапия и инфекционные заболевания . 2 (1): 955–56.
  37. ^ Ондердонк AB, Lowe BR, Bartlett JG (октябрь 1979). «Влияние стресса окружающей среды на уровни токсина Clostridium difficile при непрерывном культивировании» . Прикладная и экологическая микробиология . 38 (4): 637–41. PMC 243552 . PMID 44176 .  
  38. ^ a b Лайерли Д.М., Салливан Н.М., Уилкинс Т.Д. (январь 1983 г.). «Иммуноферментный анализ на токсин A Clostridium difficile » . Журнал клинической микробиологии . 17 (1): 72–8. PMC 272577 . PMID 6338036 .  
  39. ^ Sullivan Н.М., Pellett S, Wilkins TD (март 1982 г.). «Очистка и характеристика токсинов A и B Clostridium difficile » . Инфекция и иммунитет . 35 (3): 1032–40. PMC 351151 . PMID 7068210 .  
  40. ^ Дюпюи B, Sonenshein AL (январь 1998). «Регулируемая транскрипция генов токсина Clostridium difficile » . Молекулярная микробиология . 27 (1): 107–20. DOI : 10.1046 / j.1365-2958.1998.00663.x . PMID 9466260 . 
  41. ^ a b Ямакава К., Карасава Т., Икома С., Накамура С. (февраль 1996 г.). «Повышение выработки токсина Clostridium difficile в условиях ограниченного биотина». Журнал медицинской микробиологии . 44 (2): 111–4. CiteSeerX 10.1.1.623.71 . DOI : 10.1099 / 00222615-44-2-111 . PMID 8642571 .  
  42. ^ a b Mani N, Dupuy B (май 2001 г.). «Регулирование синтеза токсина в Clostridium difficile с помощью альтернативного сигма-фактора РНК-полимеразы» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 98 (10): 5844–9. DOI : 10.1073 / pnas.101126598 . PMC 33301 . PMID 11320220 .  
  43. ^ Bartlett JG (май 1994). « Clostridium difficile : история его роли в качестве кишечного патогена и текущее состояние знаний об организме». Клинические инфекционные болезни . 18 Дополнение 4: S265–72. DOI : 10,1093 / clinids / 18.Supplement_4.S265 . PMID 8086574 . 
  44. ^ Картер GP, Руд JI, Lyras D (январь 2012). «Роль токсина А и токсина В в вирулентности Clostridium difficile ». Тенденции в микробиологии . 20 (1): 21–9. DOI : 10.1016 / j.tim.2011.11.003 . PMID 22154163 . 
  45. ^ Орт П., Сяо Л., Эрнандес Л.Д., Райхерт П., Шет П.Р., Бомонт М. и др. (Июнь 2014 г.). «Механизм действия и эпитопы безлотоксумаба, нейтрализующего токсин В Clostridium difficile, выявлены с помощью рентгеновской кристаллографии» . Журнал биологической химии . 289 (26): 18008–21. DOI : 10,1074 / jbc.m114.560748 . PMC 4140266 . PMID 24821719 .  
  46. Перейти ↑ Arnon SS, Mills DC, Day PA, Henrickson RV, Sullivan NM, Wilkins TD (январь 1984). «Быстрая смерть детенышей макак-резусов, которым вводили токсины A и B Clostridium difficile : физиологические и патологические основы». Журнал педиатрии . 104 (1): 34–40. DOI : 10.1016 / S0022-3476 (84) 80585-5 . PMID 6690674 . 
  47. ^ Drudy D, S Фаннинг, Kyne L (январь 2007). «Токсин А-отрицательный, токсин В-положительный Clostridium difficile » . Журнал инфекционных болезней . 11 (1): 5–10. DOI : 10.1016 / j.ijid.2006.04.003 . PMID 16857405 . 
  48. ^ Savidge TC, Пан WH, Newman P, О'Брайен M, Антон П.М., Pothoulakis C (август 2003). « Токсин B Clostridium difficile представляет собой воспалительный энтеротоксин в кишечнике человека». Гастроэнтерология . 125 (2): 413–20. DOI : 10.1016 / S0016-5085 (03) 00902-8 . PMID 12891543 . 
  49. Перейти ↑ Dobson G, Hickey C, Trinder J (июнь 2003 г.). « Колит Clostridium difficile, вызывающий токсический мегаколон, тяжелый сепсис и синдром полиорганной недостаточности». Реаниматология . 29 (6): 1030. DOI : 10.1007 / s00134-003-1754-7 . PMID 12734650 . 
  50. ^ a b Лайерли, DM; Робертс, доктор медицины; Фелпс, CJ; Уилкинс, Т. Д. (январь 1986 г.). «Очистка и свойства токсинов A и B Clostridium difficile » . Письма о микробиологии FEMS . 33 (1): 31–35. DOI : 10.1111 / j.1574-6968.1986.tb01206.x .