Просвечивающий электронный микроскоп (ПЭМ) используется в качестве важного диагностического инструмента к тканям экрана человека при большом увеличении (ультраструктурном уровне), часто в сочетании с другими методами, в частности , световой микроскопии и методов иммунофлюоресценции. ПЭМ впервые широко использовался для этой цели в 1980-х годах, особенно для идентификации маркеров дифференцировки клеток с целью выявления опухолей и при почечных заболеваниях . В настоящее время для диагностики опухолей вместо ТЕА обычно используются методы иммуномечения, но этот метод сохраняет решающую роль в диагностике почечной недостаточности и ряда других состояний.
В частности, ТЕА следует использовать для диагностических целей, когда он: (1) предоставляет полезную (дополнительную) информацию в контексте тщательно продуманного дифференциального диагноза ; (2) обеспечивает «улучшенный» диагноз, который приводит к лучшим стратегиям лечения и; (3) является экономически эффективным по сравнению с альтернативными методами. Для диагностических целей твердые ткани подготавливают для ПЭМ так же, как и другие биологические ткани, они фиксируются в глутаральдегиде и четырехокиси осмия, затем обезвоживаются и заделываются эпоксидной смолой . Блок эпоксидной смолы обрезается, и целевая ткань выбирается с помощью светового микроскопа путем просмотра полутонких срезов, окрашенных толуидиновым синим. Затем блок снова обрезается, и конкретная область наблюдения ультратонкая, предпочтительно с использованием алмазного ножа. Ультратонкие срезы собирают на 3-миллиметровые медные (сетчатые) сетки и окрашивают уранилацетатом и цитратом свинца, чтобы сделать содержимое ткани электронно-плотным (и, таким образом, видимым в электронный микроскоп ). [1]
Рекомендации
- ^ Вудс AE, Стирлинг JW. 2008. Электронная микроскопия. В, теория и практика гистологических методов . Eds, Bancroft JD и Gamble M. 6-е издание. Черчилль Ливингстон: страницы 601-640
- ^ Стирлинг, Джон; Карри, Алан; Айден, Брайан (2013). Диагностическая электронная микроскопия. Практическое руководство по интерпретации и технике (1-е изд.). Чичестер, Великобритания: ISBN John Wiley & Sons Ltd. 978-1-119-97399-7.