Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

Полимераза Pwo - это термостабильная ДНК-полимераза, используемая для полимеразной цепной реакции . Аббревиатура расшифровывается как Pyrococcus woesei , термофильный археон, из которого была выделена эта полимераза. Эта полимераза разрывается при достижении ошибочного урацила в ДНК из удлинения цепи, и благодаря этой функции опережения считывания синтезируется меньше дефектных клонов ДНК. Его используют намного меньше, чем обычные полимеразы Taq или Pfu. [1] Эта ДНК-полимераза, как и другие ДНК-полимеразы из архебактерий, чувствительна к остаткам урацила в ДНК и сильно ингибируется dUTP или остатками урацила в ДНК. Другими полимеразами этого класса являются Pfu , Vent, Deep Vent и Pfx. [2]Ингибирование этого класса термостабильных ДНК-полимераз ограничивает их использование в некоторых приложениях ПЦР, то есть в применении dUTP для предотвращения переносимого загрязнения, а также в применении праймеров, содержащих dU, таких как методы клонирования без лигазы или сайт-направленный мутагенез с использованием UNG. [3]

Ссылки [ править ]

  1. ^ Гасеми A, Salmanian AH, Sadeghifard N, Salarian А.А., Голи МК (сентябрь 2011). «Клонирование, экспрессия и очистка полимеразы Pwo из Pyrococcus woesei» . Иранский журнал микробиологии . 3 (3): 118–22. PMC  3279813 . PMID  22347593 .
  2. ^ Lasken RS Шустера DM, Rashtchian A (июль 1996). «ДНК-полимеразы архебактерий прочно связывают урацил-содержащую ДНК» . Журнал биологической химии . 271 (30): 17692–6. DOI : 10.1074 / jbc.271.30.17692 . PMID 8663453 . 
  3. ^ Rashtchian A, Thornton CG, Heidecker G (ноябрь 1992). «Новый метод сайт-направленного мутагенеза с использованием ПЦР и урацил-ДНК-гликозилазы» . Методы и приложения ПЦР . 2 (2): 124–30. DOI : 10.1101 / gr.2.2.124 . PMID 1477668 .