Вестерн-блоттинг (вестерн-блот, белковый иммуноблот, англ. western blot) — аналитический метод, используемый для определения в образце специфичных белков. На первом этапе используют электрофорез белков в полиакриламидном геле для разделения денатурированных полипептидов по длине (как правило, в присутствии SDS) или по трехмерной структуре белка (в нативном состоянии). Далее белки переносят на нитроцеллюлозную или PVDF-мембрану, затем детектируют с использованием антител, специфичных к заданному белку[1][2].
Существует множество коммерческих компаний, специализирующихся на производстве антител (как моноклональных, так и поликлональных) к десяткам тысяч различных белков[3].
Вестерн-блоттинг используется в молекулярной биологии, биохимии, генетике и в других естественно-научных дисциплинах.
Другие сходные методы используют антитела для определения белков в тканях и клетках посредством иммуноокрашивания и иммуноферментного анализа (ИФА, англ. ELISA).
Вестерн-блоттинг был разработан в лаборатории Джорджа Старка (англ. George Stark) в Стэнфорде. Название «вестерн-блот» технике было дано У. Нейлом Бурнеттом (англ. W. Neal Burnette)[4] и является игрой слов от названия «Саузерн-блоттинг», — методики определения ДНК, разработанной ранее Эдвином Саузерном. Аналогичный метод определения РНК называется нозерн-блоттингом, детекция посттрансляционных модификаций белков — истерн-блоттингом (англ. Eastern blotting).
Образец может быть взят из цельной ткани или из клеточной культуры. В большинстве случаев твёрдые ткани сначала измельчаются с использованием блендера (для образцов большого объёма), гомогенизатора (меньшие объёмы) или обработки ультразвуком. При этом бактерии, вирусы и другие компоненты окружающей среды также являются источником белков.