В начале своей деятельности — сторонник анабаптистов (или перекрещенцев) — участников радикального религиозного движения эпохи Реформации, Матезиус в 1529 году прибыл в Виттенберг, где вскоре сделался одним из самых ревностных приверженцев Мартина Лютера и его учения[5][6].
Матезиус наиболее известен своей большой биографией Лютера; она была написана им в форме проповедей (числом 17) и напечатана в городе Нюрнберге в 1566 году («Historien von des ehrwürdigen in Gott seligen theueren Mannes Gottes Doktoris M. Luthers Anfang, Lehr, Leben und Sterben»). Практически все последующие биографы Лютера пользовались этим трудом, в котором Матезиус воздерживался от всякой полемики с противниками Лютера. Немецкий профессор истории В. Мауренбрехер назвал труд И. Матезиуса «благочестивым панегириком Лютера». Это произведение неоднократно переиздавалось даже спустя века после смерти автора[5].