Туберкулин


Данный экстрат впервые был получен в 1890 году Робертом Кохом, первооткрывателем возбудителя туберкулёза, который видел в нём средство профилактики туберкулёза. Массовая вакцинация неиспытанным препаратом и последовавшие случаи смерти привели к туберкулиновому скандалу. Патологоанатом Рудольф Вирхов при вскрытии трупов показал, что туберкулин не только не убивал бактерии, но даже наоборот, активировал латентные бактерии. Производство туберкулина было остановлено.

Второе рождение туберкулин получил в 1907 году, когда австрийский педиатр Клеменс Пирке догадался использовать его в качестве диагностического инструмента. Через год французский медик Шарль Манту так же предложил применять туберкулин внутрикожно с диагностической целью.

Туберкулин Коха, часто именуемый как АТК (нем. Alt Tuberculin Koch, старый туберкулин Коха), получают из штаммов Mycobacterium tuberculosis, выращенных на глицериновом пептонном бульоне путем выпаривания и фильтрации. Старый туберкулин продавался на рынке до 1970 года, а в самой Германии использовался вплоть до 2004 года для внутреннего контроля производства туберкулина PPD.

Туберкулин, полученный по Коху, оказался непригодным для стандартизации из-за колебаний концентрации, состава и чистоты белка, а также из-за низкой специфичности. В 1934 году биохимик США Флоренс Барбара Зайберт разработала надежно воспроизводимый метод получения лучшего белкового экстракта, так называемого очищенного производного белка (англ. purified protein derivative — PPD). Туберкулин PPD готовят из смеси убитых нагреванием фильтратов микобактерий туберкулёза человеческого (M.tuberculosis) и бычьего видов (M.bovis). Затем состав осаждается трихлоруксусной кислотой, обрабатывается этиловым спиртом и эфиром, растворяется в фосфатно-буферном растворе. Данный экстрат стал стандартом Бюро стандартов биологических препаратов Службы общественного здравоохранения США и с 1944 года именовался как PPD-S. В 1952 году PPD-S был принят Всемирной организацией здравоохранения в качестве международного стандарта.

В 1939 году в Ленинградском институте вакцин и сывороток (научное учреждение, берущее корни у Петербургской Пастеровской станции) советский ученый Мария Линникова получила улучшенную модификацию зарубежного PPD-S — белковый дериват Линниковой (PPD-L). Этот препарат в 1963 году ВОЗ утвердила в качестве национального стандарта сухого очищенного туберкулина, эталон которого хранится в Копенгагенском государственном институте сывороток и в США[1].

Состав PPD-L: фосфатно-буферный раствор — 0,85 %, стабилизатор — 0,005 % Твин-80 (Е433), консервант — 0,01 % хинозол (гидроксихинолин сульфат). В 0,1 мл содержится 2 ТЕ (туберкулиновые единицы), равные 0,00012 мг сухого препарата.