Разведение агара

Разведение в агаре - это один из двух методов (наряду с разбавлением в бульоне), используемых исследователями для определения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотиков. Это метод разведения, который наиболее часто используется для проверки эффективности новых антибиотиков, когда несколько антибиотиков проверяются на большом количестве различных бактерий. ^[1]^{: 149}^[2]

Процесс [ править ]

Проверяемый антибиотик разбавляют водой для получения ряда концентраций. Затем соответствующий объем объединяют с расплавленным агаром для получения чашек, в которых конечные концентрации антибиотика представляют собой серию 2-кратных разведений. После этого бактерии, приготовленные до стандартной концентрации, добавляются в виде пятна на каждую чашку с 10 ⁴ колониеобразующими единицами (КОЕ) на пятно. Этот метод позволяет тестировать реплики пятен одного типа бактерий ^[3]или пятна различных бактерий, чтобы можно было проверить МПК антибиотика против нескольких типов бактерий. Необходимые средства контроля включают контрольную чашку, на которую не вводят никаких антибиотиков, и чашки для распределения бактерий, демонстрирующие, что бактериальный посевной материал находится в правильном диапазоне концентраций. Затем планшеты для разведения инкубируют при температуре 37 градусов Цельсия . ^[4] Затем планшеты инкубируют в течение шестнадцати-восемнадцати часов, хотя время инкубации может быть меньше для популяций бактерий, которые быстро делятся. ^[1]^{: 374}После инкубации чашки исследуют, чтобы определить, произошел ли рост бактерий в засеянных пятнах. Самая низкая концентрация антибиотиков, которая предотвращает рост бактерий, считается минимальной ингибирующей концентрацией этого антибиотика против этой бактерии. ^[4]

Преимущества [ править ]

Разведение агара считается золотым стандартом тестирования чувствительности или наиболее точным способом измерения устойчивости бактерий к антибиотикам. Результаты разбавления агара легко воспроизводятся, и их можно отслеживать при гораздо меньших затратах, чем при использовании других методов разбавления. Кроме того, можно протестировать до тридцати образцов патогенов (плюс два контроля) одновременно, поэтому разведение в агаровой среде полезно для серийных тестов.^[1]^{: 149}

Недостатки [ править ]

Каждую чашку для разведения при тестировании с агаром необходимо вручную инокулировать исследуемым патогеном, поэтому тестирование разведения в агаре является трудоемким и дорогостоящим. ^[1]^{: 149} В отличие от тестов на микроразбавление бульона , разведение в агаре нельзя использовать для одновременного тестирования более одного антибиотика.^[5]

Ссылки [ править ]

^ ^a ^b ^c ^d Лориан, Виктор (2005). Антибиотики в лабораторной медицине . Липпинкотт Уильямс и Уилкинс.
^ Виганд, Ирит; Хильперт, Кай; Хэнкок, Роберт EW (17 января 2008 г.). «Методы разбавления агара и бульона для определения минимальной ингибирующей концентрации (МПК) антимикробных веществ». Протоколы природы . 3 : 163–75. DOI : 10.1038 / nprot.2007.521 . PMID 18274517 .
^ Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (сентябрь 2000 г.). «Определение минимальных ингибирующих концентраций (МПК) антибактериальных агентов путем разведения в агаре». Клиническая микробиология и инфекции . 6 (9): 509–515. DOI : 10,1046 / j.1469-0691.2000.00142.x .
^ ^а ^б Парижа (2009). Учебник микробиологии и иммунологии . Эльзевир Индия. п. 73.
^ Ли, Мэри (2013). Основные навыки интерпретации лабораторных данных (5-е изд.). АШП. п. 723 . Проверено 16 ноября 2014 года . CS1 maint: обескураженный параметр ( ссылка )

[c-1] Лориан, Виктор (2005). Антибиотики в лабораторной медицине . Липпинкотт Уильямс и Уилкинс.

[2] Виганд, Ирит; Хильперт, Кай; Хэнкок, Роберт EW (17 января 2008 г.). «Методы разбавления агара и бульона для определения минимальной ингибирующей концентрации (МПК) антимикробных веществ». Протоколы природы . 3 : 163–75. DOI : 10.1038 / nprot.2007.521 . PMID 18274517 .

[3] Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (сентябрь 2000 г.). «Определение минимальных ингибирующих концентраций (МПК) антибактериальных агентов путем разведения в агаре». Клиническая микробиология и инфекции . 6 (9): 509–515. DOI : 10,1046 / j.1469-0691.2000.00142.x .

[a-4] а ^б Парижа (2009). Учебник микробиологии и иммунологии . Эльзевир Индия. п. 73.

[5] Ли, Мэри (2013). Основные навыки интерпретации лабораторных данных (5-е изд.). АШП. п. 723 . Проверено 16 ноября 2014 года . CS1 maint: обескураженный параметр ( ссылка )

[1]