Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Биолюминесцентный ответ на местный Ca2 + после внутрибрюшинной инъекции рекомбинантного tdTA анестезированной мыши. Показано наложение изображения отражения мыши (серая шкала) и биолюминесценции, индуцированной Ca2 + (красный псевдоцвет).

Красный флуоресцентный белок ( RFP ) - это флуорофор, который при возбуждении флуоресцирует красно-оранжевым светом. Несколько вариантов были разработаны с использованием направленного мутагенеза . [1] Оригинал был выделен из Discosoma и назван DsRed . Сейчас доступны другие, которые флуоресцируют оранжевым, красным и далеким красным. [2]

RFP составляет примерно 25,9 кДа. Максимум возбуждения составляет 558 нм, а максимум излучения составляет 583 нм. [3]

Первый обнаруженный флуоресцентный белок , зеленый флуоресцентный белок (GFP), был адаптирован для идентификации и разработки флуоресцентных маркеров других цветов. Такие варианты, как желтый флуоресцентный белок (YFP) и голубой флуоресцентный белок (CFP) были обнаружены у Anthozoa . [4]

Проблемы с флуоресцентными белками включают промежуток времени между синтезом белка и выражением флуоресценции. Время созревания DsRed составляет около 24 часов [1], что может сделать его непригодным для многих экспериментов, проводимых в более короткие сроки. Кроме того, DsRed существует в тетрамерной форме, которая может влиять на функцию белков, к которым он присоединен. Генная инженерия улучшила полезность RFP за счет увеличения скорости флуоресцентного развития и создания мономерных вариантов. [3] [4] Улучшенные варианты RFP включают mFruits (mCherry, mOrange, mRaspberry), mKO, TagRFP, mKate, mRuby, FusionRed, mScarlet и DsRed-Express. [4] [5]

Было показано, что DsRed больше подходит для оптических методов визуализации, чем EGFP . [6]

Ссылки [ править ]

  1. ^ а б Бевис, Брук Дж .; Глик, Бенджамин С. (2002). «Быстро созревающие варианты красного флуоресцентного белка Discosoma (DsRed)». Природа Биотехнологии . 20 (1): 83–87. DOI : 10.1038 / nbt0102-83 . ISSN  1546-1696 . PMID  11753367 .
  2. ^ Мияваки, Ацуши; Щербакова, Дарья М; Верхуша, Владислав В (октябрь 2012). «Красные флуоресцентные белки: образование хромофоров и клеточные применения» . Текущее мнение в структурной биологии . 22 (5): 679–688. DOI : 10.1016 / j.sbi.2012.09.002 . ISSN 0959-440X . PMC 3737244 . PMID 23000031 .   
  3. ^ a b Ремингтон, С. Джеймс (1 января 2002 г.). «Преодоление лежачих полицейских до флуоресценции». Природа Биотехнологии . 20 (1): 28–29. DOI : 10.1038 / nbt0102-28 . PMID 11753356 . 
  4. ^ a b c Пяткевич, Кирилл Д .; Верхуша, Владислав В. (2011). «Руководство по красным флуоресцентным белкам и биосенсорам для проточной цитометрии» . Методы клеточной биологии . 102 : 431–461. DOI : 10.1016 / B978-0-12-374912-3.00017-1 . ISBN 9780123749123. ISSN  0091-679X . PMC  3987785 . PMID  21704849 .
  5. ^ Биндельс, Дафна S; Хаарбош, Линдси (2017). «mScarlet: яркий мономерный красный флуоресцентный белок для визуализации клеток». Методы природы . 14 (1): 53–56. DOI : 10.1038 / nmeth.4074 . ISSN 1548-7105 . PMID 27869816 .  
  6. ^ Бем я, Герке S, Kleb В, Hungerbühler М, Р Мюллер, Клозе КДж, Alfke Н (2019). «Мониторинг опухолевой нагрузки in vivo с помощью оптической визуализации в модели мыши SCID с ксенотрансплантатом: оценка двух флуоресцентных белков суперсемейства GFP». Acta Radiol . 60 (3): 315–326. DOI : 10.1177 / 0284185118780896 . PMID 29890843 . 

Внешние ссылки [ править ]

  • DsRed на базе FPBase