Промокательной матрица , в области молекулярной биологии и генетики , является подложкой , на которой макромолекулы , такие как белки , переносятся в блот - способом. [1] Матрицы обычно представляют собой химически модифицированные бумажные фильтры или микропористые мембранные фильтры. В дот-блоте макромолекулы наносятся непосредственно на матрицу. Макромолекулы также можно разделить и перенести с помощью гель-электрофореза . [1]
Одной из наиболее распространенных матриц для блоттинга для анализа белков является нитроцеллюлоза , которая имеет высокое сродство к белкам из-за гидрофобных взаимодействий. Однако белки с низкой молекулярной массой имеют небольшое сродство к нитроцеллюлозе, что ограничивает их потенциальные применения. Этот дефект можно исправить с помощью глутаральдегида , который может ковалентно связывать белки с нитроцеллюлозой. Другой матрицей является целлюлозная бумага, модифицированная диазофенилтиотом, который также может способствовать ковалентному связыванию белков. Нейлоновые мембраны также используются для блоттинга белков, хотя они могут привести к связыванию анионных красителей, таких как синий кумасси и черный амидо . Поливинилиденфторидмембраны также широко используются из-за их гидрофобности. [2]
Рекомендации
- ^ a b Биджи Т. Куриен, изд. (2009). Блоттинг и обнаружение белков . Р. Хэл Скофилд. Нью-Йорк: Humana Press. ISBN 978-1934115732.
- ^ Меррил, Карл Р .; Вашарт, Карен М. (1998). Гель-электрофорез белков (PDF) . Издательство Оксфордского университета. п. 71.