 | Эта статья требует дополнительных ссылок для проверки . ( январь 2012 г. ) ( Узнайте, как и когда удалить этот шаблон сообщения ) |
Центрифугирование с плавучестью (также изопикническое центрифугирование или центрифугирование в равновесном градиенте плотности ) использует концепцию плавучести для разделения молекул в растворе по их разнице в плотности.
Реализация [ править ]
Исторически часто использовался раствор хлорида цезия (CsCl), но чаще используются градиенты плотности сахарозы или перколла . Образец помещается поверх раствора, а затем трубка вращается с очень высокой скоростью в течение длительного времени, иногда в течение нескольких дней. Молекулы CsCl плотно упаковываются ко дну, поэтому образуются даже слои разной плотности. Поскольку исходный раствор имел примерно одинаковую плотность, они переходят на уровень, на котором их плотность и плотность CsCl совпадают, до чего они образуют резкую, отличительную полосу.
Разделение изотопов [ править ]
Этот метод очень четко разделяет молекулы и настолько точен, что может даже отделить разные молекулярные изотопы друг от друга.
Разделение ДНК [ править ]
Плавучесть большей части ДНК составляет 1,7 г / см3, что равно плотности 6М раствора CsCl. Плавучая плотность ДНК изменяется в зависимости от содержания в ней GC . Термин « сателлитная ДНК » относится к небольшим полосам повторяющихся последовательностей ДНК с разным составом оснований, плавающим над (богатые A + T) или ниже (богатые G + C) основным компонентом ДНК.
См. Также [ править ]
Ссылки [ править ]
Дальнейшее чтение [ править ]
- Schildkraut, Carl L .; Мармур, Юлий; Доти, Пол (1962). «Определение основного состава дезоксирибонуклеиновой кислоты по ее плавучей плотности в CsCl». Журнал молекулярной биологии . 4 (6): 430–443. DOI : 10.1016 / S0022-2836 (62) 80100-4 . ISSN 0022-2836 .
- Джеймс Грин (25 июня 1998 г.). Принципы и методики рекомбинантной ДНК . CRC Press. С. 278–. ISBN 978-0-8247-9989-2.
