Камелеон - это искусственно созданный белок, основанный на варианте зеленого флуоресцентного белка, который используется для визуализации уровней кальция в живых клетках. Это генетически закодированный сенсор кальция, созданный Роджером Цзянем и его коллегами. [1] Название представляет собой смесь CaM (распространенное сокращение от кальмодулина ) и хамелеона.чтобы указать на тот факт, что сенсорный белок претерпевает изменение конформации и излучает измененную длину волны при связывании кальция с элементом кальмодулина Cameleon. Cameleon был первым генетически закодированным датчиком кальция, который можно было использовать для логометрических измерений, и первым, который был использован у трансгенных животных для регистрации активности нейронов и мышечных клеток. [2] Камелеон и другие генетически закодированные индикаторы кальция (GECI) нашли множество применений в нейробиологии и других областях биологии. Он был создан путем слияния BFP , кальмодулина , кальмодулин-связывающего пептида M13 и EGFP . [3]
Механизм
ДНК, кодирующая слитый белок камелеона, должна быть либо стабильно, либо временно введена в интересующую клетку. Белок, производимый клеткой в соответствии с этой информацией ДНК, затем служит флуоресцентным индикатором концентрации кальция. В присутствии кальция Ca 2+ связывается с M13, что позволяет кальмодулину оборачиваться вокруг домена M13. Это сближает два варианта белка GFP, что увеличивает эффективность FRET между ними.
Рекомендации
- ^ Мияваки А, Griesbeck О, Heim R, Цяня RY (1999). «Динамические и количественные измерения Ca2 + с использованием улучшенных Cameleon» . Proc Natl Acad Sci USA . 96 (5): 2135–40. Bibcode : 1999PNAS ... 96.2135M . DOI : 10.1073 / pnas.96.5.2135 . PMC 26749 . PMID 10051607 .
- ^ Керр Р., Лев-Рам В., Бэрд Дж., Винсент П., Цзянь Р. Ю., Шафер В. Р. (2000). «Оптическая визуализация переходных процессов кальция в нейронах и мышцах глотки C. elegans». Нейрон . 26 : 583–94. DOI : 10.1016 / s0896-6273 (00) 81196-4 . PMID 10896155 .
- ^ Мияваки А., Ллопис Дж., Хейм Р. и др. (1997). «Флуоресцентные индикаторы Са2 + на основе зеленых флуоресцентных белков и кальмодулина» . Природа . 388 (6645): 882–7. Bibcode : 1997Natur.388..882M . DOI : 10.1038 / 42264 . PMID 9278050 .