Сефадекс - это гель декстрана с поперечными связями, используемый для гель-фильтрации . Он был запущен компанией Pharmacia в 1959 году после разработки Джеркером Поратом и Пером Флодином . [1] [2] Название происходит от таковой paration Пха rmacia Dex тран. Обычно он изготавливается в форме шариков и чаще всего используется в колоннах для гель-фильтрации . Изменяя степень сшивки, можно изменить фракционные свойства геля.
Эти узкоспециализированные среды для гель-фильтрации и хроматографии состоят из макроскопических гранул, синтетически полученных из полисахаридного декстрана. Органические цепи сшиты с образованием трехмерной сети, имеющей функциональные ионные группы, присоединенные эфирными связями к глюкозным единицам полисахаридных цепей.
Доступные формы включают аниониты и катиониты, а также смолы для гель-фильтрации с различной степенью пористости; Размер бусинок находится в дискретном диапазоне от 20 до 300 мкм .
Сефадекс также используется для ионообменной хроматографии. [3]
Приложения
Сефадекс используется для разделения молекул по молекулярной массе. Сефадекс - более быстрая альтернатива диализу (обессоливанию), требующая низкого коэффициента разбавления (всего 1,4: 1) с высокой степенью восстановления активности. Сефадекс также используется для замены буфера и удаления небольших молекул во время приготовления больших биомолекул, таких как амфолиты, детергенты, радиоактивные или флуоресцентные метки и фенол (во время очистки ДНК).
Специальная гидроксипропилированная [4] форма смолы Sephadex, названная Sephadex LH-20, используется для разделения и очистки небольших органических молекул, таких как стероиды, терпеноиды, липиды. Пример использования - очистка холестерина. [5]
Фракционирование
Эксклюзивная хроматография.
Диапазон фракционирования [6] глобулярных белков и декстранов (Да).
Тип геля | Диапазон фракционирования | |
---|---|---|
Шаровидный Белки | Декстранс | |
G-10 | ≤700 | ≤700 |
G-15 | ≤1500 | ≤1500 |
G-25 | 1000–5000 | 100–5 000 |
G-50 | 1500–30 000 | 500–10 000 |
G-75 | 3000–80 000 | 1000–50 000 |
G-75 SF | 3000–70 000 | 1000–50 000 |
G-100 | 4000–150 000 | 1000–100 000 |
G-100 SF | 4000–100 000 | 1000–100 000 |
G-150 | 5000–300 000 | 1000–150 000 |
G-150 SF | 5000–150 000 | 1000–150 000 |
G-200 | 5000–600 000 | 1000–200 000 |
G-200 SF | 5000–250 000 | 1000–200 000 |
Ионообменная хроматография.
Описание | Функциональность | Размер шарика (µ) |
---|---|---|
Сефадекс-CM C-25 | карбоксиметил | 40–120 |
Сефадекс-СМ С-50 | карбоксиметил | 40–120 |
Сефадекс-ДЭАЭ А-25 | 2- (диэтиламино) этил | 40–120 |
Сефадекс-ДЭАЭ А-50 | 2- (диэтиламино) этил | 40–120 |
Сефадекс-QAE A-25 | четвертичный аминоэтил | 40–120 |
Сефадекс-QAE A-50 | четвертичный аминоэтил | 40–120 |
Сефадекс-СП С-25 | сульфопропил | 40–120 |
Сефадекс-СП С-50 | сульфопропил | 40–120 |
Смотрите также
Рекомендации
- ^ «От Sephadex до GE Healthcare» . chemeurope.com . Архивировано из оригинального 31 -го июля 2012 года . Проверено 2 января 2019 года .
- ^ Порат, Дж; Флодин, П. (1959). «Гель-фильтрация: метод обессоливания и группового разделения». Природа . 183 (4676): 1657–1659. Bibcode : 1959Natur.183.1657P . DOI : 10.1038 / 1831657a0 . ISSN 1476-4687 . PMID 13666849 . S2CID 32287460 .
- ^ «Ионообменная среда Sephadex®» (PDF) . chembio.uoguelph.ca . Pharmacia Biotech.
- ^ GE Healthcare. «Сефадекс LH-20» . Проверено 6 декабря 2019 .
- ^ Ханукоглу И., Джефкоат ЧР (1980). «Отделение прегненолона от холестерина с использованием мини-колонок Sephadex LH-20» . Журнал хроматографии A . 190 (1): 256–262. DOI : 10.1016 / S0021-9673 (00) 85545-4 . ISSN 0021-9673 .
- ^ «Инструкции для Sephadex Media» (PDF) . gelifesciences.co.jp (руководство по продукту). GE Healthcare. 7 апреля 2008 . Проверено 2 января 2019 года .