 | Эта статья требует дополнительных ссылок для проверки . ( ноябрь 2006 г. ) ( Узнайте, как и когда удалить этот шаблон сообщения ) |
Трипсинизация - это процесс диссоциации клеток с использованием трипсина , протеолитического фермента, расщепляющего белки, для отделения прикрепленных клеток от сосуда, в котором они культивируются. При добавлении в культуру клеток трипсин расщепляет белки, которые позволяют клеткам прилипать к сосуду. Трипсинизация часто используется для переноса клеток в новый сосуд. По завершении процесса трипсинизации клетки будут находиться во взвешенном состоянии и будут иметь округлую форму.
В экспериментальных целях клетки часто культивируют в контейнерах, которые имеют форму пластиковых колб или тарелок. В таких колбах клетки снабжают средой для роста, содержащей основные питательные вещества, необходимые для пролиферации, и клетки прилипают к контейнеру и друг к другу по мере роста.
Этот процесс культивирования клеток или ткани требует способа отделения клеток от контейнера и друг от друга. Трипсин, фермент, обычно обнаруживаемый в пищеварительном тракте , можно использовать для «переваривания» белков, которые способствуют адгезии к контейнеру и между клетками.
После того, как клетки отделились от своего контейнера, необходимо дезактивировать трипсин, если только трипсин не является синтетическим, поскольку белки клеточной поверхности также будут расщепляться со временем, и это повлияет на функционирование клеток. [1] Трипсин ингибируется сывороткой, которая обеспечивает двухвалентные катионы, такие как кальций и магний, которые играют роль как во внутриклеточном, так и во внутриклеточном сигнальном процессе, т.е. формируют CAM, поэтому сыворотка обычно добавляется в контейнер после отделения клеток - это может быть подтверждено наблюдение под микроскопом.
Трипсинизация часто проводится для обеспечения перехода клеток в новый контейнер, наблюдения для экспериментов или уменьшения степени слияния в колбе путем удаления некоторого процента клеток.
Ссылки [ править ]
- ^ Хуанг, HL; Hsing, HW; Лай, ТС; Чен, YW; Ли, TR; Чан, HT; Лю, ПК; Wu, CL; Лу, YC; Лин, СТ; Линь, CW; Lai, CH; Чанг, HT; Чжоу, HC; Чан, HL (2010). «Трипсин-индуцированное изменение протеома во время клеточного субкультивирования в клетках млекопитающих» . Журнал биомедицинских наук . 17 (1): 36. DOI : 10,1186 / 1423-0127-17-36 . PMC 2873939 . PMID 20459778 .
