Адсорбция в расширенном слое (EBA) - это метод препаративной хроматографии , который делает возможной обработку вязких жидкостей и жидкостей в виде твердых частиц.
Принцип [ править ]
В белковые связывания принципы EBA являются такими же , как и в классической хроматографии на колонке и общего ионного обмена , гидрофобного взаимодействия и аффинные хроматографические лиганды могут быть использованы. [1] После завершения стадии адсорбции псевдоожиженный слой промывают, чтобы вымыть оставшиеся твердые частицы. Элюирование адсорбированных белков обычно проводили с потоком элюента в обратном направлении; то есть, как обычный уплотненный слой, для извлечения адсорбированных растворенных веществв меньшем объеме элюента. Однако было разработано новое поколение колонок EBA, которые поддерживают слой в расширенном состоянии во время этой фазы, обеспечивая высокую чистоту и высокий выход, например, MAb [моноклональных антител] в еще меньших объемах элюента. Продолжительность производственного процесса также была значительно сокращена (в некоторых случаях до 7 часов).
Можно подумать, что EBA объединяет этапы «Удаление неразрешимых компонентов» и «Изоляция» четырехэтапной эвристики нисходящей обработки . Основными ограничениями, связанными с технологией EBA, являются взаимодействия и агрегация биомассы на адсорбенте во время обработки. [2]
В то время как в классической колоночной хроматографии используется твердая фаза, образованная уплотненным слоем, в EBA используются частицы в псевдоожиженном состоянии, идеально расширенные в 2 раза. Адсорбция в расширенном слое, однако, отличается от хроматографии в псевдоожиженном слое по существу двумя способами: Смола EBA содержит частицы различного размера и плотности, что приводит к градиенту размера частиц при расширении; и во-вторых, когда кровать находится в расширенном состоянии, образуются локальные петли. Частицы, такие как целые клетки или клеточный мусор, которые забивают колонку с насадочным слоем, легко проходят через псевдоожиженный слой. [3] Таким образом, EBA можно использовать с неочищенными культуральными бульонами или суспензиями разрушенных клеток, минуя начальные стадии очистки, такие как центрифугирование ифильтрация , которая является обязательной при использовании насадочных слоев. В старых конструкциях колонок EBA скорость потока сырья поддерживается достаточно низкой, чтобы твердая насадка оставалась расслоенной и не псевдоожижалась полностью. Следовательно, EBA можно смоделировать как фронтальную адсорбцию в уплотненном слое, а не как хорошо перемешанный адсорбер с непрерывным потоком.
Ссылки [ править ]
- ^ Vennapusa, RR; Биннер, S .; Cabrera, R .; Фернандес-Лахор, М. (2008). «Поверхностная энергия для оценки микробной адгезии на адсорбентах для флюидизированной хроматографии». Инженерия в науках о жизни . 8 (5): 530. DOI : 10.1002 / elsc.200800027 . S2CID 84105652 .
- ^ Vennapusa, R .; Hunegnaw, S .; Cabrera, R .; Фернандес-Лахор, М. (2008). «Оценка взаимодействий адсорбент-биомасса во время адсорбции в расширенном слое на ионообменниках с использованием поверхностной энергетики». Журнал хроматографии A . 1181 (1-2): 9-20. DOI : 10.1016 / j.chroma.2007.11.078 . PMID 18199439 .
- ^ Hjorth, R. (1997). «Адсорбция в расширенном слое в промышленной биотехнологии: последние разработки». Тенденции в биотехнологии . 15 (6): 230–235. DOI : 10.1016 / S0167-7799 (97) 01045-7 . PMID 9183866 .
Внешние ссылки [ править ]
- «Адсорбция в расширенном слое» , Modern Drug Discovery
- Введение в адсорбцию в расширенном слое
.svg){kind=small} | Эта статья по биохимии незавершена . Вы можете помочь Википедии, расширив ее . |
