OD600 (также пишется как OD 600 , D 600 , od 600 , OD 600 ) представляет собой аббревиатуру, обозначающую оптическую плотность образца, измеренную при длине волны 600 нм на пути света 1 см (если не указано иное). Его обычно используют в микробиологии для оценки концентрации бактерий или других клеток в жидкости, поскольку длина волны 600 нм мало что повреждает или препятствует их росту . OD 600 — это тип измерения мутности . Поскольку оптическая плотность в случае измерений OD 600 возникает в результате рассеяния света частицами (клетками), а не поглощения , размер и форма, а также мертвые клетки и остатки клеток могут способствовать рассеянию света. Поэтому различные типы клеток, имеющие одинаковую плотность (например, клеток/мл), могут иметь различные значения OD 600 при оценке на аналогичном приборе.
Для мутных образцов, таких как клеточные культуры, основным фактором, влияющим на измеряемую оптическую плотность, является рассеяние света, а не результат молекулярного поглощения в соответствии с законом Бера-Ламберта . Таким образом, измерения зависят от оптической настройки спектрофотометра ( расстояние между держателем кюветы и выходной щелью прибора, оптика монохроматора, геометрия щели и т. д.), разные типы приборов, скорее всего, будут давать разные показания OD 600 для одной и той же мутности. образец. [1]
Измерение изменения OD 600 как функции времени (например, измерение кривой роста ) может указывать на фазу роста культивируемой популяции клеток, т.е. находится ли она в лаг-фазе, лог-фазе или стационарной фазе. [2] Для экспрессии и очистки белка в бактериях рекомендуется, чтобы индукция белка и сбор клеток проводились при определенной OD 600 (обычно в конце логарифмической фазы, OD 600 = 0,4).
OD 600 предпочтительнее УФ-спектроскопии при измерении роста популяции клеток с течением времени, поскольку при этой длине волны клетки не будут погибать, как при слишком сильном УФ-излучении. Также было показано, что УФ-излучение вызывает небольшие и средние мутации у бактерий, потенциально изменяя или разрушая представляющие интерес гены . [3]