Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
DMPD
TMPD

Тест на оксидазу - это тест, используемый в микробиологии для определения того, продуцирует ли бактерия определенные цитохром-соксидазы . [1] Он использует диски , пропитанные с реагентом , такие как N, N, N ', N' -tetramethyl- р -phenylenediamine (ТМФД) или N, N - диметил - р -phenylenediamine ( DMPD ), который также является окислительно - восстановительный индикатор . Реагент имеет цвет от темно-синего до бордового при окислении и бесцветный при восстановлении. Оксидаза-положительные бактерии обладают цитохромоксидазой или индофенолоксидазой (железосодержащим гемопротеином).[2] Оба они катализируют перенос электронов от донорных соединений (НАДН) к акцепторам электронов (обычно к кислороду). Тестовый реагент, дигидрохлорид TMPD, действует как искусственный донор электронов для фермента оксидазы. Окисленный реагент образует окрашенное соединение индофенолового синего. Система цитохрома обычно присутствует только у аэробных организмов, которые способны использовать кислород в качестве конечного акцептора электронов. Конечным продуктом этого метаболизма является вода или перекись водорода (расщепляемая каталазой ). [3]

Классификация [ править ]

Штаммы могут быть либо оксидазо-положительными (OX +), либо оксидазо-отрицательными (OX-).

OX + [ редактировать ]

OX + обычно означает, что бактерия содержит цитохром с оксидазу (также известный как Комплекс IV ) и поэтому может использовать кислород для производства энергии путем преобразования O 2 в H 2 O 2 или H 2 O с помощью цепи переноса электронов .

Pseudomonadaceae , как правило , ОХ + [ править ]

Грамотрицательные диплококки Neisseria и Moraxella являются оксидаза-положительными. [4]

Многие грамотрицательные стержни с изогнутой спиралью также являются оксидазо-положительными, в том числе Helicobacter pylori , Vibrio cholerae и Campylobacter jejuni .

Переменная оксидазы

Legionella pneumophila может быть оксидазно-положительной. [5]

OX− [ править ]

OX- обычно означает, что бактерия не содержит цитохром с-оксидазу и, следовательно, либо не может использовать кислород для производства энергии с цепью переноса электронов, либо использует другой цитохром для передачи электронов кислороду.

Энтеробактерии обычно представляют собой OX−. [6]

Процедуры [ править ]

  1. Смочите каждый диск примерно четырьмя петлями для посева деионизированной воды.
  2. Используйте петлю для асептического переноса на диск большой массы чистых бактерий.
  3. Наблюдайте за диском до трех минут. Если область инокуляции изменится с темно-синего на темно-бордовый или почти на черный, то результат положительный. Если изменение цвета не происходит в течение трех минут, результат отрицательный.

В качестве альтернативы живые бактерии, культивируемые на чашках с триптиказо-соевым агаром, могут быть получены с использованием стерильной техники с посевом в одну линию. Засеянные чашки инкубируют при 37 ° C в течение 24–48 часов для образования колоний. Следует использовать свежие бактериальные препараты. После того, как колонии вырастут на среде, на поверхность каждого тестируемого организма добавляют 2-3 капли реагента DMPD.

  • Положительный результат теста (OX +) приведет к изменению цвета с фиолетового на пурпурный в течение 10–30 секунд.
  • Отрицательный тест (OX-) приведет к бледно-розовому цвету или отсутствию окраски.

Ссылки [ править ]

  1. ^ «Оксидазный тест и модифицированный оксидазный тест» . Архивировано из оригинала на 2018-02-23 . Проверено 7 ноября 2008 .
  2. ^ . Айзенберг HD, редактор. Справочник по процедурам клинической микробиологии. Американское общество микробиологии; 2004. с. 3.3.2-3.3.2.13
  3. ^ MacFaddin JF, редактор. Биохимические тесты для идентификации медицинских бактерий. 3-е изд. Филадельфия: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс; 2000. с. 363-7
  4. ^ ST, Коуэн; Сталь, KJ (1993). Руководство Коуэна и Стила по идентификации медицинских бактерий (3-е изд.). Кембридж: Издательство Кембриджского университета. ISBN 9780511527104.
  5. ^ "UK СМИ" (PDF) .
  6. ^ Фармер Дж. Дж., Фаннинг Г. Р., Хантли-Картер Г. П. и др. (Май 1981 г.). «Kluyvera, новый (переопределенный) род в семействе Enterobacteriaceae: идентификация Kluyvera ascorbata sp. Nov. И Kluyvera cryocrescens sp. Nov. В клинических образцах» . J. Clin. Microbiol . 13 (5): 919–33. PMC 273917 . PMID 7240403 .  

Больше ссылок:

Американское общество микробиологии, протокол теста на оксидазу. 2013. ASM MicrobeLibrary, 1–9.

Cheng WJ, Lin CW, Wu TG, Su CS, Hsieh M. S. 2013. Калибровка тест-полосок на основе глюкозооксидазы для измерения капиллярной крови с образцами венозной крови, насыщенной кислородом. Clinica Chimica Acta. 415, 152–157.

Corchia L, Hubault R, Quinquenel B, N'Guyen. 2015. Быстро развивающийся конъюнктивит, вызванный Pasteurella Multocida, возникающий после прямой инокуляции капельками животных на хозяина с ослабленным иммунитетом. BMC Ophthalmology 15.1, 21.

Флок С., Аларкон-Гутьеррес Э., Крике С. 2007. Анализ ABTS активности фенолоксидазы в почве. Журнал микробиологических методов. 71, 319–324.

Габи В.Л., Хэдли С. 1957. Практический лабораторный тест для идентификации синегнойной палочки. Журнал бактериологии. 74, 356–358.

Гилани М., Мунир Т., Латиф М., Гилани М., Рехман С., Ансари М., Хафиз А., Наджиб С., Саад Н. 2015. Эффективность дорипенема in vitro против Pseudomonas Aeruginosa и Acinetobacter Baumannii с помощью E-теста. Журнал Колледжа врачей и хирургов Пакистан 25, 726-729.

Kuss S, Tanner EEL, Ordovas-Montanes M, Compton R G. 2017. Электрохимическое распознавание и количественная оценка экспрессии цитохрома C в аэробах / анаэробах с использованием ,, ',' - тетраметил - фенилендиамина (TMPD). Химическая наука 8.11, 7682-7688. Интернет.

Иванова Н.В., Землак Т.С., Ханнер Р.Х., Хеберт П.Д. Н. 2007. Универсальные смеси праймеров для штрих-кодирования ДНК рыб. Заметки о молекулярной экологии. 7, 544–54.

Принц С. 2009. Практическое руководство по медицинской микробиологии (Jaypee Brothers Medical Publishers (P) Ltd.) 112–112.

Шилдс П., Кэткарт Л. 2013. Протокол теста на оксидазу - Библиотека. Американское общество микробиологов, ASM MicrobeLibrary, 1–5.

Стил К. Дж. 1961. Оксидазная реакция как таксономический инструмент. Журнал общей микробиологии. 25, 297–306.

Zanderigo F et al. 2018. [11C] Связывание гармина с моноаминоксидазой A головного мозга: свойства повторного тестирования и неинвазивная количественная оценка. Молекулярная визуализация и биология. 20, 667–681.

Внешние ссылки [ править ]

  • Видео теста оксидазы
  • Процедура оксидазного теста