Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

293T (или HEK 293T ) представляет собой линию клеток человека , полученную из линии клеток HEK 293 , которая экспрессирует мутантную версию большого Т-антигена SV40 . Он очень часто используется в биологии для экспрессии белков и получения рекомбинантных ретровирусов .

Происхождение [ править ]

293T был создан в лаборатории Michele Calos в Стэнфорде путем стабильной трансфекции линии клеток HEK 293 плазмидой, кодирующей термочувствительный мутант большого Т-антигена SV40; Первоначально он назывался 293 / tsA1609neo . [1] Первым упоминанием линии клеток как «293T» может быть ее использование для создания линии упаковывающих клеток BOSC23 для производства ретровирусных частиц. [2]

Характеристики [ править ]

Трансфекция, использованная для создания 293T (с участием плазмиды pRSV-1609), придает устойчивость к неомицину / G418 и экспрессию аллеля tsA1609 большого Т-антигена SV40; этот аллель полностью активен при 33 ° C ( допустимая температура ), выполняет существенную функцию при 37 ° C и неактивен при 40 ° C. [3] 293T очень эффективно трансфицируется ДНК (как и его родительский HEK 293). Вследствие экспрессии большого Т-антигена SV40 трансфицированные плазмидные ДНК, несущие точку начала репликации SV40, могут реплицироваться в 293T и временно будут поддерживать высокое количество копий; это может значительно увеличить количество рекомбинантного белка или ретровируса, которое может быть произведено из клеток.

Геном [ править ]

Были определены полные геномные последовательности трех различных изолятов 293T. Они очень похожи друг на друга, но обнаруживают заметное отклонение от родительской клеточной линии HEK 293. [4]

Ссылки [ править ]

  1. ^ DuBridge RB, Tang P, Hsia HC, Leong PM, Miller JH, Calos MP (январь 1987). «Анализ мутации в клетках человека с использованием системы челнока вируса Эпштейна-Барра» . Мол. Клетка. Биол . 7 (1): 379–387. DOI : 10,1128 / MCB.7.1.379 . PMC  365079 . PMID  3031469 .
  2. ^ Груша WS, Нолан GP, Скотт М.Л., Балтимор D (15 сентября 1993). «Производство беспомощных ретровирусов с высоким титром путем временной трансфекции» . Proc. Natl. Акад. Sci. США . 90 (18): 8392–8396. DOI : 10.1073 / pnas.90.18.8392 . PMC 47362 . PMID 7690960 .  
  3. ^ Rio DC, Clark SG, Tjian R (4 января 1985). «Система вектор-хозяин млекопитающего, которая регулирует экспрессию и амплификацию трансфицированных генов путем индукции температуры». Наука . 227 (4682): 23–28. DOI : 10.1126 / science.2981116 . PMID 2981116 . 
  4. ^ Лин YC, Буна М, Meuris л, Lemmens я, Ван Рой N, Soete А, Reumers Дж, Moisse М, Плезанс S, Дрманач R, Чен Дж, Speleman Ж, Ламбрехтс D, Ван - де - Peer Y, Тавернье J, Callewaert N (3 сентября 2014 г.). «Динамика генома линии 293 эмбриональной почки человека в ответ на манипуляции клеточной биологии» . Nat. Commun . 5 . 4767. DOI : 10.1038 / ncomms5767 . PMC 4166678 . PMID 25182477 .  

Внешние ссылки [ править ]

  • Запись ATCC для 293T
  • Запись на целлозавр для 293T