Эта статья требует дополнительных ссылок для проверки . ( апрель 2009 г. ) |
Чувствительные к температуре мутанты - это варианты генов, которые обеспечивают нормальное функционирование организма при низких температурах, но изменяют функцию при более высоких температурах. Чувствительные к холоду мутанты - это варианты генов, которые обеспечивают нормальное функционирование организма при более высоких температурах, но изменяют функцию при низких температурах.
Большинство чувствительных к температуре мутаций влияют на белки и вызывают потерю функции белка при недопустимой температуре. Допустимая температура - это такая температура, при которой белок обычно может правильно складываться или оставаться правильно свернутым. При более высоких температурах белок становится нестабильным и перестает нормально функционировать. Эти мутации обычно рецессивны у диплоидных организмов. Чувствительные к температуре мутанты реализуют обратимый механизм [1] и способны восстанавливать определенные генные продукты на различных стадиях роста, и это легко сделать путем изменения температуры роста.
Допустимая температура - это температура, при которой чувствительный к температуре продукт мутантного гена приобретает нормальный функциональный фенотип . [2] Когда чувствительный к температуре мутант выращивается в разрешающих условиях, продукт мутированного гена ведет себя нормально (это означает, что фенотип не наблюдается), даже если присутствует мутантный аллель . Это приводит к выживанию клетки или организма, как если бы это был штамм дикого типа . Напротив, недопустимая температура или ограничительная температура - это температура, при которой наблюдается мутантный фенотип.
Мутации, чувствительные к температуре, обычно представляют собой миссенс-мутации, которые затем будут нести функцию определенного необходимого гена при стандартной, допустимой, низкой температуре. В качестве альтернативы он будет лишен функции при довольно высокой недопустимой температуре и будет отображать гипоморфную (частичная потеря функции гена) и среднюю, полупермиссивную температуру. [3]
Чувствительные к температуре мутанты полезны в биологических исследованиях. Они позволяют изучать основные процессы, необходимые для выживания клетки или организма. Мутации основных генов обычно смертельны, и, следовательно, чувствительные к температуре мутанты позволяют исследователям вызывать фенотип при ограничительных температурах и изучать эффекты. Фенотип, чувствительный к температуре, может быть выражен на определенной стадии развития, чтобы изучить эффекты.
В конце 1970-х секреторный путь зарождающихся дрожжей , необходимый для жизнеспособности клетки и роста новых почек, был рассечен с использованием чувствительных к температуре мутантов, что привело к идентификации двадцати трех основных генов. [4]
В 1970-х годах у плодовой мушки было идентифицировано несколько чувствительных к температуре мутантных генов , таких как shibire ts , что привело к первому генетическому расчленению синаптической функции. [5] В 1990-х годах промотор теплового шока hsp70 использовался для терморегулируемой экспрессии генов у плодовой мухи. [6]
Инфекция клетки-хозяина E. coli бактериофагом (фагом) T4, чувствительным к температуре (ts) условно летальным мутантом при высокой рестриктивной температуре, как правило, не приводит к росту фага. Однако коинфекция в рестриктивных условиях с двумя ts- мутантами, дефектными по разным генам, обычно приводит к устойчивому росту из-за межгенной комплементации . Открытие ts- мутантов фага Т4 и использование таких мутантов в тестах комплементации способствовало идентификации многих генов в этом организме. [7] Поскольку несколько копий полипептида, определяемого геном, часто образуют мультимеры, смешанные инфекции с двумя разнымиts- мутанты, дефектные по одному и тому же гену, часто приводят к смешанным мультимерам и частичному восстановлению функции, явление, называемое внутригенной комплементацией. Внутригенная комплементация ts- мутантов, дефектных по тому же гену, может предоставить информацию о структурной организации мультимера. [8]
Рост мутантов фага ts в частично рестриктивных условиях был использован для определения функций генов. Таким образом были идентифицированы гены, используемые для восстановления повреждений ДНК [9] [10], а также гены, влияющие на генетическую рекомбинацию . [11] [12] Например, выращивание мутанта репарации ДНК ts при промежуточной температуре позволит продуцировать некоторое количество фагов-потомков. Однако, если этот ts- мутант облучают УФ-светом, его выживаемость будет более сильно снижена по сравнению с сокращением выживаемости облученного фага Т4 дикого типа.
Условные летальные мутанты, способные расти при высоких температурах, но неспособные расти при низких температурах, также были выделены в фаге Т4. [13] Эти чувствительные к холоду мутанты определили дискретный набор генов, некоторые из которых были ранее идентифицированы другими типами условно-летальных мутантов.