Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Смотрите также: RNA трансфекции и вакцины РНК

Трансфекция - это процесс преднамеренного введения голых или очищенных нуклеиновых кислот в эукариотические клетки . [1] [2] Это может также относиться к другим методам и типам клеток, хотя часто предпочтительны другие термины: « трансформация » обычно используется для описания невирусного переноса ДНК в бактериях и эукариотических клетках неживотного происхождения , включая клетки растений. В клетках животных трансфекция является предпочтительным термином, поскольку трансформация также используется для обозначения прогрессирования в этих клетках до злокачественного состояния ( канцерогенез ). Трансдукциячасто используется для описания вирусопосредованного переноса генов в эукариотические клетки. [2] [3]

Слово « трансфекция» - это набор терминов « транс- и инфекция» . Генетический материал (такой как суперспиральная плазмидная ДНК или конструкции миРНК ) или даже белки, такие как антитела , могут быть трансфицированы.

Трансфекция животных клеток обычно включает открытие временных пор или «дыр» в клеточной мембране, позволяющих поглощать материал. Трансфекцию можно проводить с использованием фосфата кальция (т.е. трикальцийфосфата ), электропорацией , сжатием клеток или смешиванием катионного липида с материалом для получения липосом, которые сливаются с клеточной мембраной и откладывают свой груз внутри.

Трансфекция может привести к неожиданной морфологии и аномалиям в клетках-мишенях.

Терминология [ править ]

Значение термина изменилось. [4] Первоначальное значение трансфекции было «заражение путем трансформации», то есть введение генетического материала, ДНК или РНК, из вируса или бактериофага, инфицирующего прокариоты, в клетки, что приводит к инфекции. Поскольку термин трансформация имеет другое значение в биологии клеток животных (генетическое изменение, позволяющее долгосрочное размножение в культуре или приобретение свойств, типичных для раковых клеток), термин трансфекция приобрел для животных клеток свое нынешнее значение изменения в клетке. свойства, вызванные введением ДНК.

Методы [ править ]

Существуют различные методы введения чужеродной ДНК в эукариотическую клетку : некоторые основаны на физическом лечении (электропорация, сжатие клеток, наночастицы, магнитофекция); другие полагаются на химические материалы или биологические частицы (вирусы), которые используются в качестве носителей. Доставка генов - это, например, один из этапов, необходимых для генной терапии и генетической модификации сельскохозяйственных культур. Существует множество различных методов доставки генов, разработанных для различных типов клеток и тканей, от бактерий до млекопитающих. В целом методы можно разделить на две категории: невирусные и вирусные. [5]

Невирусные методы включают физические методы, такие как электропорация , микроинъекция , генная пушка , импалефекция , гидростатическое давление , непрерывная инфузия и обработка ультразвуком и химические, такие как липофекция , которая представляет собой опосредованный липидами процесс трансфекции ДНК с использованием липосомных векторов. Он также может включать использование полимерных носителей генов (полиплексов). [6]

Доставка генов, опосредованная вирусом , использует способность вируса вводить свою ДНК внутрь клетки-хозяина. Ген, предназначенный для доставки, упакован в вирусную частицу с дефицитом репликации. Вирусы, используемые на сегодняшний день, включают ретровирус , лентивирус , аденовирус , аденоассоциированный вирус и вирус простого герпеса . Однако у использования вирусов для доставки генов в клетки есть недостатки. Вирусы могут доставлять в клетки только очень маленькие фрагменты ДНК, это трудоемко и сопряжено с риском случайных участков вставки, цитопатических эффектов и мутагенеза.

Бактериальные сферопласты могут трансфицировать клетки животных.

Невирусные методы [ править ]

Химическая трансфекция [ править ]

Химическую трансфекцию можно разделить на несколько видов: циклодекстрин , [7] полимеры, [8] липосомы или наночастицы [9] (с химической или вирусной функционализацией или без нее. См. Ниже).

  • В одном из самых дешевых методов используется фосфат кальция , первоначально открытый Ф.Л. Грэхэмом и А.Дж. ван дер Эб в 1973 году [10] (см. Также [11] ). Забуференный HEPES физиологический раствор (HeBS), содержащий ионы фосфата, сочетается с хлоридом кальция.раствор, содержащий ДНК, подлежащую трансфекции. Когда они объединяются, образуется тонкий осадок положительно заряженного кальция и отрицательно заряженного фосфата, связывающий ДНК, подлежащую трансфекции, на ее поверхности. Затем суспензию осадка добавляют к трансфицируемым клеткам (обычно это культура клеток, выращенная в монослое). Путем не совсем понятного процесса клетки поглощают часть осадка, а вместе с ним и ДНК. Этот процесс был предпочтительным методом выявления многих онкогенов. [12]
  • Другой метод - использование катионных полимеров, таких как DEAE-декстран или полиэтиленимин (PEI). Отрицательно заряженная ДНК связывается с поликатионом, и комплекс поглощается клеткой посредством эндоцитоза .
  • Липофекция (или трансфекция липосом ) - это метод, используемый для введения генетического материала в клетку с помощью липосом , которые представляют собой везикулы, которые могут легко сливаться с клеточной мембраной, поскольку оба они состоят из бислоя фосфолипидов . [13] Lipofection обычно использует положительно заряженный ( катионный ) липид ( катионные липосомы или смеси) для образования агрегата с отрицательно заряженным ( анионным ) генетическим материалом. [14] Эта технология трансфекции выполняет те же задачи, что и другие биохимические процедуры с использованием полимеров, DEAE-декстрана ,фосфат кальция и электропорация . Эффективность липофекции можно повысить, обработав трансфицированные клетки легким тепловым шоком . [15]
  • Fugene - это серия широко используемых запатентованных реагентов для нелипосомальной трансфекции, способных напрямую трансфицировать самые разные клетки с высокой эффективностью и низкой токсичностью. [16] [17] [18] [19]
  • Дендример - это класс сильно разветвленных молекул, основанных на различных строительных блоках и синтезированных конвергентным или дивергентным методом. Эти дендримеры связывают нуклеиновые кислоты с образованием дендриплексов, которые затем проникают в клетки. [20] [21]

Нехимические методы [ править ]

Электропоратор с прямоугольной волной и кривой экспоненциального затухания для приложений in vitro, in vivo, с прикрепленными клетками и 96-луночной электропорации. Изготовлено BTX Harvard Apparatus, Холлистон, Массачусетс, США.
  • Электропорация ( электроперенос гена ) - популярный метод, при котором кратковременное увеличение проницаемости клеточной мембраны достигается при воздействии на клетки коротких импульсов сильного электрического поля.
  • Сжатие клеток - это метод, изобретенный в 2012 году Армоном Шарей, Робертом Лангером и Клавсом Йенсеном из Массачусетского технологического института. Он обеспечивает доставку молекул в клетки за счет деформации клеточной мембраны. Это безвекторная микрофлюидная платформа с высокой пропускной способностью для внутриклеточной доставки. Он снижает вероятность токсичности или побочных эффектов, поскольку не зависит от экзогенных материалов или электрических полей. [22]
  • Сонопорация использует ультразвук высокой интенсивности, чтобы вызвать порообразование в клеточных мембранах. Это порообразование объясняется в основном кавитацией пузырьков газа, взаимодействующих с соседними клеточными мембранами, поскольку оно усиливается добавлением ультразвукового контрастного вещества, источника ядер кавитации.
  • Оптическая трансфекция - это метод, при котором крошечная дырка (диаметром ~ 1 мкм) временно создается в плазматической мембране клетки с помощью высоко сфокусированного лазера. Этот метод был впервые описан в 1984 году Tsukakoshi et al., Которые использовали трехкратную частоту Nd: YAG для создания стабильной и временной трансфекции нормальных клеток почек крысы. [23] В этом методе обрабатывается одна клетка за раз, что делает его особенно полезным для анализа отдельных клеток.
  • Слияние протопластов - это метод, при котором трансформированные бактериальные клетки обрабатывают лизоцимом для удаления клеточной стенки. После этого используются слитые агенты (например, вирус Сендай, ПЭГ, электропорация) для слияния протопласта, несущего интересующий ген, с клеткой-реципиентом-мишенью. Основным недостатком этого метода является то, что бактериальные компоненты также неспецифично вводятся в клетку-мишень.
  • Импалефекция - это метод введения ДНК, связанной с поверхностью нановолокна, которое вставляется в клетку. Этот подход также может быть реализован с массивами нановолокон, которые вводятся в большое количество клеток и интактной ткани.
  • Гидродинамическая доставка - это метод, используемый у мышей и крыс, но в меньшей степени у более крупных животных, у которых ДНК чаще всего в плазмидах (включая транспозоны ) может быть доставлена ​​в печень с помощью гидродинамической инъекции, которая включает в себя вливание относительно большого объема в печень. кровь менее чем за 10 секунд; почти вся ДНК экспрессируется в печени с помощью этой процедуры. [24] [25] [26]

Методы на основе частиц [ править ]

  • Прямой подход к трансфекции является генной пушки , где ДНК соединена с наночастицами из инертного твердого вещества (обычно золота), который затем «выстрел» непосредственно в клетки-мишени ядра . [27]
  • Магнитофекция или трансфекция с помощью магнита - это метод трансфекции, в котором для доставки ДНК в клетки-мишени используется магнитная сила. Нуклеиновые кислоты сначала связаны с магнитными наночастицами. Затем приложение магнитной силы толкает комплексы частиц нуклеиновой кислоты по направлению к клеткам-мишеням и внутрь, откуда освобождается груз. [28]
  • Инфекция осуществляется путем проникновения в клетки удлиненных наноструктур и массивов таких наноструктур, таких как углеродные нановолокна или кремниевые нанопроволоки , функционализированные плазмидной ДНК .
  • Другой метод трансфекции на основе частиц известен как бомбардировка частицами. Нуклеиновая кислота доставляется через мембрану с высокой скоростью, обычно через микрочастицы. [2]

Другие (и гибридные) методы [ править ]

Другие методы трансфекции включают нуклеофекцию , которая оказалась очень эффективной при трансфекции клеточной линии THP-1 , создание жизнеспособной клеточной линии, которая была способна дифференцироваться в зрелые макрофаги [29], и тепловой шок .

Вирусные методы [ править ]

ДНК также может быть введена в клетки с использованием вирусов в качестве носителя. В таких случаях метод называется трансдукцией , и говорят, что клетки трансдуцируются. Аденовирусные векторы могут быть полезны для методов вирусной трансфекции, поскольку они могут переносить гены в самые разные клетки человека и имеют высокие скорости переноса. [2] Лентивирусные векторы также полезны из-за их способности трансдуцировать клетки, которые в настоящее время не подвергаются митозу.

Стабильная и временная трансфекция [ править ]

Стабильная и временная трансфекция различаются по своему долгосрочному воздействию на клетку; стабильно трансфицированная клетка будет непрерывно экспрессировать трансфицированную ДНК и передавать ее дочерним клеткам , тогда как временно трансфицированная клетка будет экспрессировать трансфицированную ДНК в течение короткого периода времени и не будет передавать ее дочерним клеткам.

Для некоторых применений трансфекции достаточно, если трансфицированный генетический материал экспрессируется только временно. Поскольку ДНК, введенная в процессе трансфекции, обычно не интегрируется в ядерный геном, чужеродная ДНК будет разбавляться посредством митоза или деградировать. [30] Клеточные линии, экспрессирующие ядерный антиген 1 (EBNA1) вируса Эпштейна-Барра (EBV) или большой Т-антиген SV40, позволяют эписомную амплификацию плазмид, содержащих вирусные точки начала репликации EBV (293E) или SV40 (293T), в значительной степени снижение скорости разведения. [31]

Если желательно, чтобы трансфицированный ген действительно оставался в геноме клетки и ее дочерних клеток, должна происходить стабильная трансфекция. Для этого маркерный ген котрансфицируется, что дает клетке некоторое селективное преимущество, такое как устойчивость к определенному токсину . Некоторые (очень немногие) трансфицированные клетки случайно интегрировали чужеродный генетический материал в свой геном. Если затем токсин добавить в культуру клеток, только те несколько клеток, в геном которых интегрирован маркерный ген, смогут пролиферировать , в то время как другие клетки погибнут. После применения этого селективного стресса (давления отбора) в течение некоторого времени остаются только клетки со стабильной трансфекцией, и их можно культивировать дальше. [32]

Обычными агентами для выбора стабильной трансфекции являются:

  • Генетицин , или G418, нейтрализованный продуктом гена устойчивости к неомицину
  • Пуромицин
  • Зеоцин
  • Гигромицин B
  • Бластицидин S

Трансфекция РНК [ править ]

Основная статья: трансфекция РНК

РНК также можно трансфицировать в клетки для временной экспрессии кодируемого ею белка или для изучения кинетики распада РНК . Трансфекция РНК часто используется в первичных клетках, которые не делятся.

siRNA также можно трансфицировать для достижения молчания РНК (т.е. потери РНК и белка из гена-мишени). Это стало основным приложением в исследованиях для достижения « нокдауна » интересующих белков (например, эндотелина-1 [33] ) с потенциальным применением в генной терапии. Ограничением подхода сайленсинга являются токсичность трансфекции для клеток и потенциальные «нецелевые» эффекты на экспрессию других генов / белков.

См. Также [ править ]

  • Нацеливание на гены
  • Миникруг
  • Протофекция
  • Трансформация
  • Трансдукция
  • Трансген
  • Вектор (молекулярная биология)
  • Вирусный вектор

Ссылки [ править ]

  1. ^ Трансфекция в Национальной медицинской библиотеке США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)
  2. ^ a b c d «Трансфекция» . Руководство по протоколам и приложениям . Промега.
  3. ^ Трансдукция, генетика в Национальной медицинской библиотеке США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)
  4. ^ " Трансфекция " в Медицинском словаре Дорланда
  5. Перейти ↑ Kamimura K, Suda T, Zhang G, Liu D (октябрь 2011 г.). «Достижения в системах доставки генов» . Фармацевтическая медицина . 25 (5): 293–306. DOI : 10.1007 / bf03256872 . PMC 3245684 . PMID 22200988 .  
  6. ^ Saul JM, Linnes MP, Ратнер BD, Giachelli CM, Пун SH (ноябрь 2007). «Доставка невирусных генных носителей из сферических фибриновых каркасов для устойчивой экспрессии трансгена». Биоматериалы . 28 (31): 4705–16. DOI : 10.1016 / j.biomaterials.2007.07.026 . PMID 17675152 . 
  7. ^ Menuel S, Fontanay S, Clarot I, Duval RE, Diez L, Marsura A (декабрь 2008). «Синтез и способность к комплексообразованию нового бис- (гуанидиния) -тетракис- (бета-циклодекстрин) дендримерного тетрапода в качестве потенциальной системы доставки генов (ДНК и миРНК). Изучение клеточной трансфекции миРНК». Биоконъюгатная химия . 19 (12): 2357–62. DOI : 10.1021 / bc800193p . PMID 19053312 . 
  8. ^ Фишер Д, фон Арп А, Kunath К, Петерсен Н, Li Y, Киссел Т (2002). «Сополимеры этиленимина и N- (2-гидроксиэтил) этиленимина как инструменты для изучения влияния структуры полимера на физико-химические и биологические свойства комплексов ДНК». Биоконъюгатная химия . 13 (5): 1124–33. DOI : 10.1021 / bc025550w . PMID 12236795 . 
  9. ^ «Реагенты для трансфекции на основе наночастиц» . Ресурсы по исследованию трансфекции биологии . Transfection.ws.
  10. ^ Graham FL, ван - дер - Eb AJ (апрель 1973). «Новый метод определения инфекционности ДНК аденовируса 5 человека». Вирусология . 52 (2): 456–67. DOI : 10.1016 / 0042-6822 (73) 90341-3 . PMID 4705382 . 
  11. ^ Bacchetti S, Graham FL (апрель 1977). «Перенос гена тимидинкиназы в клетки человека с дефицитом тимидинкиназы с помощью очищенной вирусной ДНК простого герпеса» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 74 (4): 1590–4. Bibcode : 1977PNAS ... 74.1590B . DOI : 10.1073 / pnas.74.4.1590 . PMC 430836 . PMID 193108 .  
  12. ^ Криглер M (1991). Перенос и экспрессия: лабораторное руководство . WH Freeman. С. 96–97. ISBN 978-0-7167-7004-6.
  13. ^ Felgner PL, Gadek TR, Холм М, Р Роман, Чан HW, Wenz М, Нортроп ДП, Ringold Г.М., Даниэльсен М (ноябрь 1987). «Липофекция: высокоэффективная липид-опосредованная процедура ДНК-трансфекции» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 84 (21): 7413–7. Bibcode : 1987PNAS ... 84.7413F . DOI : 10.1073 / pnas.84.21.7413 . PMC 299306 . PMID 2823261 .  
  14. ^ Felgner JH, Кумар R, Сридхар CN, Уилер CJ, YJ Цай, Пограничный Р, Р Рэмси, Мартин М, Felgner PL (январь 1994). «Улучшенная доставка генов и исследования механизмов с новой серией катионных липидных составов» . Журнал биологической химии . 269 (4): 2550–61. DOI : 10.1016 / S0021-9258 (17) 41980-6 . PMID 8300583 . 
  15. ^ Трубы BL, Vasanwala FH, Тсанг TC, Чжан T, P Ло, Харрис DT (январь 2005 г.). «Кратковременный тепловой шок увеличивает стабильную интеграцию липид-опосредованных трансфекций ДНК» . Биотехнологии . 38 (1): 48–52. DOI : 10.2144 / 05381bm05 . PMID 15679084 . 
  16. Перейти ↑ Jacobsen LB, Calvin SA, Colvin KE, Wright M (июнь 2004 г.). «Реагент для трансфекции FuGENE 6: нежная сила». Методы . Трансфекция клеток млекопитающих. 33 (2): 104–12. DOI : 10.1016 / j.ymeth.2003.11.002 . PMID 15121164 . 
  17. ^ Хеллгрен я, Drvota В, Пипер R, S Enoksson, Бломберг Р, ислам КБ, Sylvén С (август 2000 г.). «Высокоэффективный клеточно-опосредованный перенос генов с использованием невирусных векторов и FuGene6: исследования in vitro и in vivo». Клеточные и молекулярные науки о жизни . 57 (8–9): 1326–33. DOI : 10.1007 / PL00000769 . PMID 11028922 . S2CID 27916034 .  
  18. ^ Lakshmipathy U, Thyagarajan B (2011). Первичные и стволовые клетки: технологии переноса генов и приложения (1-е изд.). Вили-Блэквелл. ISBN 978-0-470-61074-9.
  19. ^ Арнольд А.С., Лапорта В, С Dumont, Апперт-Коллина А, Эрбахер Р, Coupin О, Леви Р, Р Poindron, Гис JP (февраль 2006 г.). «Сравнение реагентов для эффективной трансфекции первичных миобластов человека: FuGENE 6, Effectene и ExGen 500». Фундаментальная и клиническая фармакология . 20 (1): 81–9. DOI : 10.1111 / j.1472-8206.2005.00344.x . PMID 16448398 . S2CID 42585711 .  
  20. ^ Сапра, Рахит; Verma, Ram P .; Maurya, Govind P .; Дхаван, Самир; Бабу, Джиша; Харидас, В. (13.11.2019). «Конструктор пептидов и белковых дендримеров: поперечный анализ». Химические обзоры . 119 (21): 11391–11441. DOI : 10.1021 / acs.chemrev.9b00153 . ISSN 0009-2665 . PMID 31556597 .  
  21. ^ Heitz, Марк; Явор, Саша; Дарбре, Тамис; Реймон, Жан-Луи (21.08.2019). «Стереоселективные pH-чувствительные пептидные дендримеры для трансфекции миРНК». Биоконъюгатная химия . 30 (8): 2165–2182. DOI : 10.1021 / acs.bioconjchem.9b00403 . ISSN 1043-1802 . PMID 31398014 .  
  22. ^ Sharei А, Зольдан Дж, Адамо А, Сим WY, чо N, Джексон Е, Мао S, Шнайдер S, Хан МДж, Литтон-Жан А, Баст ПА, Jhunjhunwala S, Ли Дж, Геллер Д.А., Кан JW, Hartoularos ОГО , Ким К.С., Андерсон Д.Г., Лангер Р., Дженсен К.Ф. (февраль 2013 г.). «Безвекторная микрофлюидная платформа для внутриклеточной доставки» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 110 (6): 2082–7. Bibcode : 2013PNAS..110.2082S . DOI : 10.1073 / pnas.1218705110 . PMC 3568376 . PMID 23341631 .  
  23. ^ Tsukakoshi M, Kurata S, Nomiya Y, et al. (1984). «Новый метод трансфекции ДНК с помощью лазерной микролучевой хирургии клеток». Прикладная физика B: Фотофизика и лазерная химия . 35 (3): 135–140. Bibcode : 1984ApPhB..35..135T . DOI : 10.1007 / BF00697702 . S2CID 123250337 . 
  24. ↑ Zhang G, Budker V, Wolff JA (июль 1999 г.). «Высокий уровень экспрессии чужеродных генов в гепатоцитах после инъекции в хвостовую вену обнаженной плазмидной ДНК». Генная терапия человека . 10 (10): 1735–7. DOI : 10.1089 / 10430349950017734 . PMID 10428218 . 
  25. ↑ Zhang G, Vargo D, Budker V, Armstrong N, Knechtle S, Wolff JA (октябрь 1997 г.). «Экспрессия обнаженной плазмидной ДНК, введенной в афферентные и эфферентные сосуды печени грызунов и собак». Генная терапия человека . 8 (15): 1763–72. DOI : 10.1089 / hum.1997.8.15-1763 . PMID 9358026 . 
  26. ^ Белл JB, Podetz-Pedersen KM, Аронович EL, Belur LR, McIvor RS, Hackett PB (2007). «Преимущественная доставка транспозонной системы« Спящая красавица »в печень мышей путем гидродинамической инъекции» . Протоколы природы . 2 (12): 3153–65. DOI : 10.1038 / nprot.2007.471 . PMC 2548418 . PMID 18079715 .  
  27. ^ О'Брайен, Джон А .; Ламмис, Сара CR (2011). «Нанобиолистика: метод биолистической трансфекции клеток и тканей с использованием генной пушки с новыми снарядами нанометрового размера» . BMC Biotechnology . 11 : 66. DOI : 10,1186 / 1472-6750-11-66 . PMC 3144454 . PMID 21663596 .  
  28. ^ "Magnetofection - Магнитная трансфекция и трансдукция" . OzBiosciences - Искусство систем доставки.
  29. ^ Schnoor M, Buers I, Sietmann A, Brodde MF, Hofnagel O, Robenek H, Lorkowski S (май 2009). «Эффективная невирусная трансфекция клеток THP-1». Журнал иммунологических методов . 344 (2): 109–15. DOI : 10.1016 / j.jim.2009.03.014 . PMID 19345690 . 
  30. ^ Ким Т.К., Eberwine JH (август 2010). «Трансфекция клеток млекопитающих: настоящее и будущее» . Аналитическая и биоаналитическая химия . 397 (8): 3173–8. DOI : 10.1007 / s00216-010-3821-6 . PMC 2911531 . PMID 20549496 .  
  31. ^ Durocher Y, Перре S, Камен A (январь 2002). «Высокоуровневая и высокопроизводительная продукция рекомбинантного белка путем временной трансфекции суспензионных человеческих клеток 293-EBNA1» . Исследования нуклеиновых кислот . 30 (2): 9e – 9. DOI : 10.1093 / NAR / 30.2.e9 . PMC 99848 . PMID 11788735 .  
  32. ^ Fanelli A (2016). «Наука создания стабильной клеточной линии» . Проверено 23 декабря 2017 года .
  33. ^ Mawji IA, Marsden PA (июнь 2006). «Трансфекция РНК - универсальный инструмент для исследования посттранскрипционной регуляции эндотелина-1» . Экспериментальная биология и медицина . 231 (6): 704–708. DOI : 10,3181 / 00379727-231-2310704 (неактивный 2021-01-15). PMID 16740984 . CS1 maint: DOI неактивен с января 2021 г. ( ссылка )

Дальнейшее чтение [ править ]

  • Сегура Т., Ши Л.Д. (2001). «Материалы для доставки невирусных генов». Ежегодный обзор исследований материалов . 31 : 25–46. Bibcode : 2001AnRMS..31 ... 25S . DOI : 10.1146 / annurev.matsci.31.1.25 .
  • Луо Д., Зальцман В.М. (январь 2000 г.). «Системы доставки синтетической ДНК». Природа Биотехнологии . 18 (1): 33–7. DOI : 10.1038 / 71889 . PMID  10625387 . S2CID  7068508 .
  • Бонетта Л. (2005). «Изнутри - оценка способов доставки генов». Природные методы . 2 (11): 875–883. DOI : 10.1038 / nmeth1105-875 . S2CID  8078059 .

Внешние ссылки [ править ]

  • Трансфекция в Национальной медицинской библиотеке США по медицинским предметным рубрикам (MeSH)
  • Ресурс биологических исследований - статьи и форумы о трансфекции
  • Исследования в области оптической трансфекции в Университете Сент-Эндрюс
  • 10-й американо-японский симпозиум по системам доставки лекарств