3,3',5,5'-тетраметилбензидин
3,3',5,5'-тетраметилбензидин или ТМБ представляет собой хромогенный субстрат, используемый в процедурах окрашивания в иммуногистохимии , а также в качестве визуализирующего реагента, используемого в твердофазных иммуноферментных анализах ( ELISA ). [1] ТМБ представляет собой белое твердое вещество, которое в растворе с этилацетатом образует бледную сине-зеленую жидкость . TMB разрушается под воздействием солнечного света и флуоресцентных ламп .
TMB может выступать в качестве донора водорода для восстановления перекиси водорода до воды ферментами пероксидазы , такими как пероксидаза хрена .
Образующийся диимин вызывает окрашивание раствора в синий цвет, и это изменение цвета можно увидеть на спектрофотометре при длинах волн 370 и 650 нм.
Реакцию можно остановить добавлением кислоты или другого останавливающего реагента. Использование серной кислоты окрашивает ТМБ в желтый цвет. Цвет можно прочитать при 450 нм. [2]
TMB следует хранить вдали от прямых солнечных лучей, так как он светочувствительный. Неизвестно, является ли ТМБ канцерогенным, и данные противоречивы: ТМБ не оказывает мутагенного действия по тесту Эймса , [3] [4] [5] [6] и не индуцирует образование опухолей в одногрупповом исследовании 24 человек. крысы. [3] На основании этих данных он использовался в качестве замены канцерогенным соединениям, таким как бензидин [7] и о-фенилендиамин.
