Из Википедии, бесплатной энциклопедии
  (Перенаправлен из кислотостойкого пятна )
Перейти к навигации Перейти к поиску
Визуализация микобактерий туберкулеза с помощью красителя Циля – Нильсена
Окрашивание по Цилю – Нильсену (кислотостойкое) - схема основных этапов

Окрашивание по Цилю-Нильсену - это разновидность кислотостойких красителей, впервые представленная Полем Эрлихом . Окрашивание по Цилю – Нильсену - это бактериологическая окраска, используемая для идентификации кислотоустойчивых организмов, в основном микобактерий . Он назван в честь двух немецких врачей, которые изменили окраску: бактериолога Франца Циля (1859–1926) и патолога Фридриха Нильсена (1854–1898).

Микобактерии [ править ]

В образцах анатомической патологии иммуногистохимия и модификации окрашивания Циля-Нильсена (такие как метод Фите-Фарако ) имеют сопоставимую диагностическую ценность. Оба они превосходят традиционное окрашивание по Цилю-Нильсену. [1]

Род Mycobacterium - это медленно растущие бактерии, состоящие из небольших палочек, слегка изогнутых или прямых, и считаются грамположительными. Некоторые виды микобактерий образуют ветви или нити. Некоторые микобактерии являются свободноживущими сапрофитами, но многие из них являются патогенами, вызывающими заболевания у животных и людей. Mycobacterium bovis вызывает туберкулез крупного рогатого скота. Поскольку туберкулез может передаваться людям, молоко пастеризуется, чтобы убить любые бактерии. [2] Некоторые виды Mycobacterium, вызывающие заболевания у людей, включают Mycobacterium leprae , Mycobacterium kansasii , Mycobacterium marinum , Mycobacterium bovis , Mycobacterium africanum и представителейКомплекс Mycobacterium avium . Mycobacterium tuberculosis - это разновидность микобактерий, вызывающих туберкулез (ТБ). Mycobacterium tuberculosis - это бактерия, передающаяся по воздуху, которая обычно поражает легкие человека. [3] [4] Симптомы туберкулеза включают сильный кашель, боль в груди, усталость, потерю веса, отсутствие аппетита, озноб, лихорадку и ночную потливость. [5] Типичная схема лечения латентной инфекции ТБ включает использование изониазида, рифапентина и рифампицина. Режим изменен для тех, у кого развился лекарственно-устойчивый штамм туберкулеза. [6] Обследование на туберкулез включает анализ крови, кожные пробы и рентген грудной клетки. [7]При просмотре мазков на туберкулез он окрашивается кислотостойкой краской. Эти кислотоустойчивые организмы, такие как Mycobacterium, содержат в своих клеточных стенках большое количество липидных веществ, называемых миколиновыми кислотами. Эти кислоты устойчивы к окрашиванию обычными методами, такими как окрашивание по Граму . [8] Его также можно использовать для окрашивания некоторых других бактерий, таких как Nocardia . Реагенты, используемые для окрашивания по Цилю – Нильсену: карбол фуксин , кислый спирт и метиленовый синий . Кислотоустойчивые бациллы после окрашивания становятся ярко-красными.

Грибы [ править ]

Окрашивание по Цилю-Нильсену представляет собой разновидность пятен от грибка с узким спектром действия. Пятна от грибка с узким спектром действия являются селективными и могут помочь дифференцировать и идентифицировать грибок. [9] Результаты окрашивания по Цилю-Нильсену различаются, потому что многие клеточные стенки грибов не являются кислотоустойчивыми. [10] Пример распространенного типа кислотоустойчивого грибка, который обычно окрашивают с помощью окрашивания по Цилю-Нильсену, называется Histoplasma (HP). [11] Гистоплазма содержится в почве и фекалиях птиц и летучих мышей. [12] Люди могут заразиться гистоплазмозом при вдыхании спор грибов. Гистоплазма попадает в организм и попадает в легкие, где споры превращаются в дрожжи. [13]Дрожжи попадают в кровоток и поражают лимфатические узлы и другие части тела. Обычно люди не заболевают от вдыхания спор, но если и заболевают, то обычно имеют симптомы гриппа. [14] Другой вариант этого метода окрашивания используется в микологии для дифференциального окрашивания кислотоустойчивых отложений в кутикулярных гифах некоторых видов грибов рода Russula . [15] [16] Некоторые свободные эндоспоры можно спутать с небольшими дрожжами, поэтому окрашивание используется для идентификации неизвестных грибов. [17] Это также полезно для идентификации некоторых простейших, а именно Cryptosporidium и Isospora.. Окрашивание по Цилю – Нильсену также может затруднить диагностику в случае парагонимоза, поскольку яйца в образце мокроты на яйцеклетку и паразиты (O&P) могут растворяться пятном, и часто используется в этой клинической обстановке, поскольку признаки и симптомы парагонимоза очень похожи те из туберкулеза.

История [ править ]

В 1882 году Роберт Кох открыл этиологию туберкулеза. [18] Вскоре после открытия Коха Пол Эрлих разработал краситель для микобактерий туберкулеза, названный окраской квасцов гематоксилином. [19] Франц Циль затем изменил технику окрашивания Эрлиха, применив карболовую кислоту в качестве протравы. Фридрих Нильсен оставил протраву, выбранную Цилем, но заменил первичную окраску на карбол-фуксин. Модификации Циля и Нильсена вместе разработали окраску Циля-Нильсена. Другой кислотоупорный атлас был разработан Джозефом Киньюном с использованием техники окрашивания по Цилю-Нильсену, но с исключением этапа нагрева из процедуры. Это новое пятно от киньюна было названо пятном киньюна.

Процедура [ править ]

Типичная процедура окрашивания AFB включает падение клеток в суспензии на предметное стекло, затем сушку жидкости на воздухе и фиксацию клеток нагреванием. [20]

Резюме кислотоустойчивого красителя (окраска Циля – Нильсена) [21]
ПрименениеРеагентЦвет ячейки
Кислотный быстроНекислотное быстрое
Первичный красительКарбол фуксинкрасныйкрасный
Обесцвечивающее средствоКислый спирткрасныйБесцветный
Счетчик пятенМетиленовый синий / малахитовый зеленыйкрасныйСиний

Исследования показали, что окраска AFB без посева имеет плохую прогностическую ценность. Культивирование КУБ необходимо проводить вместе с окрашиванием КУБ; это имеет гораздо более высокую отрицательную прогностическую ценность.

Механизм кислотостойкого окрашивания в кислотоустойчивых и некислотных клетках. [22] [23] [24]

Объяснение механизма [ править ]

Первоначально карбол-фуксин окрашивает каждую клетку. Когда они очищаются кислотно-спиртовым раствором, окрашиваются только некислотные бактерии, так как у них нет толстого воскового липидного слоя, как у кислотоустойчивых бактерий. Когда применяется контркрашивание, некислотные бактерии захватывают его и становятся синими (метиленовый синий) или зеленым (малахитовый зеленый) при просмотре под микроскопом. Кислотоустойчивые бактерии удерживают карбол-фуксин, поэтому они кажутся красными.

Модификации [ править ]

  • 1% -ный сернокислый спирт для актиномицетов , нокардии .
  • 0,5–1% -ный сернокислый спирт для ооцист изоспор , циклоспор .
  • 0,25–0,5% сернокислый спирт для бактериальных эндоспор.
  • Дифференциальное окрашивание - использовалась ледяная уксусная кислота, нагрев не применялся, вторичное окрашивание - метиленовый синий Лёффлера.
  • Также доступна модификация киньюна (или холодная техника Циля – Нильсена).
  • Протокол, в котором детергент заменяется высокотоксичным фенолом в окрашивающем растворе фуксина. [25]

См. Также [ править ]

  • Среда Левенштейна – Йенсена
  • Окраска по Граму
  • Kinyoun пятно
  • Кислотостойкость
  • Франц Циль
  • Фридрих Нильсен

Примеры сетевых протоколов [ править ]

  • Протокол Циля – Нильсена ( формат PDF ).

Ссылки [ править ]

  1. ^ Crothers, Джессика W; Лага, Альваро К.; Соломон, Исаак Х (2021). «Клинические характеристики микобактериальной иммуногистохимии в образцах анатомической патологии». Американский журнал клинической патологии . 155 (1): 97–105. DOI : 10.1093 / ajcp / aqaa119 . ISSN  0002-9173 . PMID  32915191 .
  2. ↑ Sandman, Кэтлин, Джоан Уилли и Дороти Вуд. Микробиология Прескотта. 11-е изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Высшее образование Макгроу-Хилла, 2020. Печать. п. 541
  3. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Основные факты о туберкулезе. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/default.htm
  4. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Как распространяется туберкулез. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/howtbspreads.htm
  5. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Признаки и симптомы. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/signsandsymptoms.htm
  6. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Схемы лечения латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ). 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/treatment/ltbi.htm
  7. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Тестирование и диагностика. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/testing/default.htm
  8. ↑ Морелло, Жозефина А., Пол А. Гранато, Марион Э. Уилсон и Верна Мортон. Лабораторное руководство и рабочая тетрадь по микробиологии: приложения к уходу за пациентами. 10-е изд. Бостон: Высшее образование Макгроу-Хилла, 2006. Печать. [ требуется страница ]
  9. ^ Veerappan, R., Miller, LE, Sosinski, C., & Youngberg, GA (2006) Узкий спектр окрашивания Pityrosporum. Журнал кожной патологии: ноябрь 2006 г., Vol. 33, No. 11, pp. 731-734.
  10. ^ Хак, A. (2010). Использование специальных красителей при грибковых инфекциях. Подключение: 187-194
  11. ^ Rajeshwari, М., Xess И., Шарма, МС, и Джейн, Д. (2017). Кислотостойкость гистоплазмы в практике хирургической патологии. Журнал патологии и трансляционной медицины, 51 (5), 482–487. DOI: 10.4132 / jptm.2017.07.11
  12. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Гистоплазмоз. 13 августа 2018 г. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/index.html .
  13. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Источники гистоплазмоза. 11 февраля 2019 г. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/causes.html
  14. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Симптомы гистоплазмоза. 13 августа 2018 г. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/symptoms.html
  15. ^ Romagnesi, H. (1967). Les Russules d'Europe et d'Afrique du Nord . Бордас. ISBN 0-934454-87-6.[ требуется страница ]
  16. ^ Ларджент, D; Д Джонсон; Р. Уотлинг (1977). Как отнести грибы к III роду: микроскопические особенности . Mad River Press. п. 25. ISBN 0-916422-09-7.
  17. ^ Янгберг, Джордж А .; Валлен, Эллен ДБ; Гиоргадзе, Тамар А. (ноябрь 2003 г.). «Узкоспектральное гистохимическое окрашивание грибов». Архив патологии и лабораторной медицины . 127 (11): 1529–30. DOI : 10,1043 / 1543-2165 (2003) 127 <1529: NHSOF> 2.0.CO; 2 (неактивный 2021-01-14). PMID 14567744 . CS1 maint: DOI inactive as of January 2021 (link)
  18. ^ ДиНардо, Эндрю Р .; Ланге, Кристоф; Мандалакас, Анна М. (1 мая 2016 г.). «Редакционный комментарий: 1, 2, 3 (года)… и ты ушел: конец 123-летней исторической эры» . Клинические инфекционные болезни . 62 (9): 1089–1091. DOI : 10,1093 / CID / ciw041 . PMID 26839384 . 
  19. ^ Сингхал, Риту; Myneedu, Vithal Prasad (март 2015 г.). «Микроскопия как средство диагностики туберкулеза легких» . Международный журнал микобактериологии . 4 (1): 1–6. DOI : 10.1016 / j.ijmyco.2014.12.006 . PMID 26655191 . 
  20. ^ Лебоффе, Майкл Дж. И Бертон Э. Пирс. Теория и основы применения микробиологической лаборатории. Morton Publishing, 2019. Печать. п. 179. [ необходима страница ]
  21. ^ Кислотно-стойкое окрашивание - принцип, процедура, интерпретация и примеры. Сагар Арьял, 8 мая 2015 г.
  22. ^ «Онлайн-микробиологические заметки» . Онлайн-микробиологические заметки . Проверено 29 ноября 2017 .
  23. ^ "Дом - микробеонлайн" . microbeonline.com . Проверено 29 ноября 2017 .
  24. ^ Кумар, Суриндер (2012). Учебник микробиологии . п. 315.
  25. ^ Эллис, RC; Л.А. Заброварный. (1993). «Более безопасный метод окрашивания кислотоустойчивых бацилл» . Журнал клинической патологии . 46 (6): 559–560. DOI : 10.1136 / jcp.46.6.559 . PMC 501296 . PMID 7687254 .  

Библиография [ править ]

  • «Микробиология с заболеваниями по системам организма», Роберт В. Бауман, 2009 г., Pearson Education, Inc.

Внешние ссылки [ править ]

  • СМИ, связанные с пятном Циля-Нильсена, на Викискладе?