альбумин | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|
Идентификаторы | ||||||
Организм | ||||||
Условное обозначение | ALB | |||||
Entrez | 280717 | |||||
HomoloGene | 105925 | |||||
RefSeq (мРНК) | NM_180992 | |||||
RefSeq (Prot) | NP_851335 | |||||
UniProt | P02769 | |||||
Прочие данные | ||||||
Хромосома | 6: 91.54 - 91.57 Мб | |||||
|
Бычий сывороточный альбумин ( BSA или «фракция V» ) представляет собой белок сывороточного альбумина, полученный от коров. Он часто используется в качестве стандарта концентрации белка в лабораторных экспериментах.
Прозвище «Фракция V» относится к альбумину, являющемуся пятой фракцией оригинальной методологии очистки Эдвина Кона, в которой использовались различные характеристики растворимости белков плазмы . Манипулируя концентрацией растворителя, pH, уровнями солей и температурой , Кон смог извлечь последовательные «фракции» плазмы крови . Этот процесс был сначала коммерциализирован с человеческим альбумином для медицинского использования, а затем адаптирован для производства BSA.
Свойства [ править ]
Полноразмерный белок-предшественник БСА имеет длину 607 аминокислот (АК). N-терминал 18-остаток сигнальный пептид отрезается от белка - предшественника при секреции, следовательно , исходный продукт белок содержит 589 аминокислотных остатков. Еще шесть аминокислот расщепляются с образованием зрелого белка BSA, который содержит 583 аминокислоты. [1]
Пептид | Позиция | Длина (AA) | МВт Да |
---|---|---|---|
Предшественник полной длины | 1 - 607 | 607 | 69 324 |
Сигнальный пептид | 1–18 | 18 | 2,107 |
Пропептид | 19–24 | 6 | 478 |
Зрелый белок | 25–607 | 583 | 66 463 |
Физические свойства BSA:
- Количество аминокислотных остатков: 583
- Молекулярный вес: 66 463 Да (= 66,5 кДа)
- изоэлектрическая точка в воде при 25 ° C: 4,7 [2]
- Коэффициент экстинкции 43 824 M -1 см -1 на 279 нм [3]
- Размеры: 140 × 40 × 40 Å (вытянутый эллипсоид, где a = b <c) [4]
- pH 1% раствора: 5,2-7 [5] [6]
- Оптическое вращение: [α] 259 : -61 °; [α] 264 : -63 ° [5] [6]
- Радиус Стокса (r s ): 3,48 нм [7]
- Константа седиментации, S 20, W × 10 13 : 4,5 (мономер), 6,7 (димер) [5] [6]
- Константа диффузии, D 20, W × 10 −7 см 2 / с: 5,9 [5] [6]
- Частичный удельный объем, V 20 : 0,733 [5] [6]
- Характеристическая вязкость, η: 0,0413 [5] [6]
- Коэффициент трения, f / f0: 1,30 [5] [6]
- Приращение показателя преломления (578 нм) × 10 −3 : 1,90 [5] [6]
- Оптическое поглощение, A 279 нм 1 г / л : 0,667 [5] [6]
- Среднее вращение остатка, [м '] 233 : 8443 [5] [6]
- Средняя эллиптичность остатка: 21,1 [θ] 209 нм ; 20,1 [θ] 222 нм [5] [6]
- Расчетная а-спираль,%: 54 [5] [6]
- Расчетная b-форма,%: 18 [5] [6]
Приложения [ править ]
BSA имеет множество биохимических применений, включая ELISA (иммуноферментный анализ), иммуноблоттинг и иммуногистохимию . Поскольку БСА представляет собой небольшой, стабильный, умеренно нереактивный белок, его часто используют в качестве блокатора в иммуногистохимии. [8] Во время иммуногистохимии, которая представляет собой процесс, который использует антитела для идентификации антигенов в клетках, срезы тканей часто инкубируют с блокаторами BSA для связывания неспецифических участков связывания. [9] [10] Это связывание BSA с неспецифическими сайтами связывания увеличивает вероятность того, что антитела будут связываться только с интересующими антигенами. [11]Блокатор БСА улучшает чувствительность за счет уменьшения фонового шума, так как участки покрыты умеренно нереактивным белком. [12] [13] Во время этого процесса минимизация неспецифического связывания антител важна для получения максимального отношения сигнал / шум. [12] БСА также используется в качестве питательного вещества в культуре клеток и микробов. При рестрикционном переваривании BSA используется для стабилизации некоторых ферментов во время переваривания ДНК и предотвращения адгезии фермента к реакционным пробиркам, наконечникам пипеток и другим сосудам. [14] Этот белок не влияет на другие ферменты.которые не нуждаются в стабилизации. BSA также обычно используется для определения количества других белков путем сравнения неизвестного количества белка с известным количеством BSA (см. Анализ белка Брэдфорда ). БСА используется из-за его способности усиливать сигнал в анализах, его отсутствия эффекта во многих биохимических реакциях и его низкой стоимости, так как его большие количества можно легко очистить из бычьей крови, побочного продукта животноводства. Еще одно применение BSA заключается в том, что его можно использовать для временного выделения веществ, которые блокируют активность необходимого фермента, тем самым препятствуя полимеразной цепной реакции (ПЦР). [15] BSA широко используется в качестве шаблона для синтеза наноструктур. [16]
БСА также является основным компонентом фетальной бычьей сыворотки , обычной среды для культивирования клеток.
См. Также [ править ]
- Допустимая суточная доза
- Белковая аллергия
- Сывороточный альбумин человека
- Сывороточный альбумин
Ссылки [ править ]
- ^ Majorek К.А., Porebski PJ, Дояла A, Циммерман MD, Jablonska K, Стюарт AJ, Chruszcz M, Minor W (октябрь 2012). «Структурная и иммунологическая характеристика альбуминов сыворотки крупного рогатого скота, лошади и кролика» . Молекулярная иммунология . 52 (3–4): 174–82. DOI : 10.1016 / j.molimm.2012.05.011 . PMC 3401331 . PMID 22677715 .
- ^ Ge S, Kojio К, ТАКАХАРА А, Кэджияма Т (1998). «Адсорбция бычьего сывороточного альбумина на иммобилизованной органотрихлорсилановой поверхности: влияние фазового разделения на характер адсорбции белка». Журнал науки о биоматериалах, полимерное издание . 9 (2): 131–50. DOI : 10.1163 / 156856298x00479 . PMID 9493841 .
- Перейти ↑ Peters T (1975). Путман Ф.В. (ред.). Белки плазмы . Академическая пресса. С. 133–181.
- Перейти ↑ Wright AK, Thompson MR (февраль 1975). «Гидродинамическая структура бычьего сывороточного альбумина, определяемая кратковременным двойным лучепреломлением» . Биофизический журнал . 15 (2 Пет 1): 137–41. DOI : 10.1016 / S0006-3495 (75) 85797-3 . PMC 1334600 . PMID 1167468 .
- ^ Б с д е е г ч я J к л м Патнут FW (1975). Белки плазмы: структура, функция и генетический контроль . 1 (2-е изд.). Нью-Йорк: Academic Press. С. 141, 147. ASIN B007ESU1JQ .
- ^ a b c d e f g h i j k l m "Альбумин из бычьей сыворотки" (PDF) . Сигма-Олдрич . Проверено 5 июля 2013 года .
- ↑ Axelsson I (май 1978 г.). «Характеристика белков и других макромолекул с помощью хроматографии на агарозном геле». Журнал хроматографии A . 152 (1): 21–32. DOI : 10.1016 / S0021-9673 (00) 85330-3 .
- ^ «Сывороточные альбумины и аллергия» . База знаний по структурной биологии . Национальный институт общих медицинских наук Национальных институтов здравоохранения. Октябрь 2013.
- ^ «Что такое иммуногистохимия (IHC)» . Иммуногистохимия . Sino Biological Inc.
- ^ Farwell А.П., Dubord-Tomasetti SA (сентябрь 1999). «Гормон щитовидной железы регулирует экспрессию ламинина в развивающемся мозжечке крысы» . Эндокринология . 140 (9): 4221–7. DOI : 10.1210 / en.140.9.4221 . PMID 10465295 .
- ^ >. «Советы по снижению фона ELISA» . Биокомпар . Сравните сети. 8 октября 2012 г.
- ^ a b Ouellet, Мишель (24 декабря 2006 г.). «Как блокирование работает в иммуноцитохимическом анализе с сывороткой или BSA» . Сеть MadSci: Биохимия . Сеть MadSci.
- ^ «Blocker ™ BSA (10X) в PBS» . Thermo Fisher Scientific . Thermo Fisher Scientific Inc. Архивировано из оригинала на 2017-03-30.
- ^ "BSA FAQ" . Invitrogen. Архивировано из оригинала на 2011-12-28 . Проверено 19 января 2012 года .
- ^ Kreader CA (март 1996). «Снятие ингибирования амплификации в ПЦР с бычьим сывороточным альбумином или белком гена 32 Т4» . Прикладная и экологическая микробиология . 62 (3): 1102–6. PMC 167874 . PMID 8975603 .
- ^ Рахмани Т, Hajian А, Афхи А, Багеря Н (2018). «Новый и высокоэффективный сенсорный слой, не содержащий ферментов, для электрохимического обнаружения метилпаратиона на основе биметаллических нанокластеров Au – Ag, созданных на основе BSA». Новый химический журнал . 42 (9): 7213–22. DOI : 10.1039 / C8NJ00425K .
Дальнейшее чтение [ править ]
- Хираяма К., Акаси С., Фуруя М., Фукухара К. (декабрь 1990 г.). «Быстрое подтверждение и пересмотр первичной структуры бычьего сывороточного альбумина с помощью ESIMS и Frit-FAB LC / MS». Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях . 173 (2): 639–46. DOI : 10.1016 / S0006-291X (05) 80083-X . PMID 2260975 .
- Чжан М., Десаи Т., Феррари М. (май 1998 г.). «Белки и клетки на кремниевых поверхностях, иммобилизованных ПЭГ» (PDF) . Биоматериалы . 19 (10): 953–60. DOI : 10.1016 / S0142-9612 (98) 00026-X . PMID 9690837 .[ постоянная мертвая ссылка ]
- Мудрый С.А., Уоттерс Р.Л. (30.06.2010). «Альбумин бычьей сыворотки (7% раствор)» (pdf) . Сертификат анализа . Национальный институт стандартов и технологий США . Проверено 22 декабря 2011 .
Внешние ссылки [ править ]
- Сыворотка + альбумин + бычий продукт по медицинским предметным рубрикам Национальной медицинской библиотеки США (MeSH)