Стекло микроскопа представляет собой тонкий плоский кусок стекла , как правило , 75 на 26 мм (3 дюйма на 1) и около 1 мм толщиной, используется для объектов справедливы и для исследования под микроскопом . Обычно объект устанавливается (закрепляется) на предметном стекле, а затем оба вместе помещаются в микроскоп для просмотра. Такое расположение позволяет быстро вставлять и извлекать из микроскопа несколько установленных на предметных стеклах объектов, маркировать, транспортировать и хранить в соответствующих футлярах для предметных стекол или папках и т. Д.
Предметные стекла микроскопа часто используются вместе с покровным стеклом или покровным стеклом, меньшим и более тонким листом стекла, который помещают поверх образца. Предметные стекла удерживаются на предметном столике микроскопа с помощью зажимов для предметных стекол, зажимов для предметных стекол или перекрестного стола, который используется для достижения точного дистанционного перемещения предметного стекла на предметном столике микроскопа (например, в автоматизированной / управляемой компьютером системе или при касании слайд пальцами не подходит из-за риска загрязнения или неточности)
История [ править ]
Источником концепции были куски слоновой кости или кости , содержащие образцы, помещенные между дисками из прозрачной слюды , которые вставлялись в зазор между предметным столиком и объективом. [1] Эти «ползунки» были популярны в викторианской Англии до тех пор, пока Королевское микроскопическое общество не представило стандартизированное предметное стекло для микроскопа. [2]
Размеры и типы [ править ]
Стандартное предметное стекло микроскопа имеет размеры около 75 мм на 25 мм (3 дюйма на 1 дюйм) и имеет толщину около 1 мм. Доступен ряд других размеров для различных специальных целей, таких как 75 x 50 мм для геологического использования, 46 x 27 мм для петрографических исследований и 48 x 28 мм для шлифов . Слайды обычно изготавливаются из обычного стекла, а их края часто шлифуются или полируются.
Предметные стекла микроскопа обычно изготавливаются из стекла оптического качества , такого как натриево-кальциевое или боросиликатное стекло , но также используются специальные пластмассы. Предметные стекла из плавленого кварца часто используются, когда важна ультрафиолетовая прозрачность, например, в флуоресцентной микроскопии . [3] [4]
Хотя обычные слайды являются наиболее распространенными, существует несколько специализированных типов. На предметном стекле с вогнутостью или полостью имеется одно или несколько неглубоких углублений («лунок»), предназначенных для удерживания более толстых предметов и определенных образцов, таких как жидкости и тканевые культуры . [5] Слайды могут иметь закругленные углы для повышения безопасности или прочности, или срезанный угол для использования с зажимом скольжения или поперечным столом, где слайд фиксируется подпружиненным изогнутым рычагом, контактирующим с одним углом, заставляя противоположный угол салазок против прямоугольного рычага, который не двигается. Если бы эта система использовалась с суппортом, который не имел этих срезанных углов, углы были бы сколами, и суппорт мог расколоться. [5]
Сетка слайд отмечен сеткой линий (например, 1 мм сетка) , что позволяет размер объектов видны при увеличении , чтобы быть легко оценена и обеспечивает опорные участки для подсчета мелких объектов. Иногда один квадрат сетки сам подразделяется на более мелкую сетку. Предметные стекла для специализированных приложений, таких как гемоцитометры для подсчета клеток, могут иметь различные резервуары, каналы и барьеры, вытравленные или отшлифованные на их верхней поверхности. [6] Различные устойчивые маркировки или маски могут быть напечатаны , обработаны пескоструйной обработкой или нанесены на поверхность производителем, обычно с использованием инертных материалов, таких как ПТФЭ.. [7]
Нейбауэр слайд для подсчета клеток. | Изображение под микроскопом сетки предметного стекла Нойбауэра, используемой для подсчета клеток . | Предметное стекло Нойбауэра, удерживаемое на штативе микроскопа зажимом для предметного стекла на поперечном столе. |
Некоторые слайды имеют на одном конце матовую или покрытую эмалью область для маркировки карандашом или ручкой. [5] Слайды могут иметь специальные покрытия, нанесенные производителем, например, для химической инертности или повышенной адгезии клеток . Покрытие может иметь постоянный электрический заряд для удержания тонких или порошкообразных образцов. Обычные покрытия включают поли-L-лизин , силанов , эпоксидные смолы , [5] [7] или даже золото . [8]
Монтаж [ править ]
Размещение образцов на предметных стеклах микроскопа часто имеет решающее значение для успешного просмотра. Этой проблеме уделялось много внимания в последние два столетия, и это хорошо развитая область с множеством специализированных, а иногда и довольно сложных техник. Образцы часто удерживаются на месте с помощью стеклянных покровных стекол меньшего размера .
Основная функция покровного стекла заключается в том, чтобы твердые образцы прижимались плоско, а жидкие образцы формировались в плоский слой одинаковой толщины. Это необходимо, потому что микроскопы с высоким разрешением имеют очень узкую область, в которой они фокусируются.
Покровное стекло часто выполняет еще несколько функций. Он удерживает образец на месте (либо за счет веса покровного стекла, либо, в случае влажного монтажа, за счет поверхностного натяжения ) и защищает образец от пыли и случайного контакта. Он защищает линзу объектива микроскопа от контакта с образцом и наоборот; в масляной иммерсионной микроскопии или иммерсионной микроскопии в воде покровное стекло предотвращает контакт между иммерсионной жидкостью и образцом. Покровное стекло можно приклеить к предметному стеклу, чтобы изолировать образец, замедляя обезвоживание и окисление.образца, а также предотвращение загрязнения. Используется ряд герметиков, включая коммерческие герметики, лабораторные препараты или даже обычный прозрачный лак для ногтей , в зависимости от образца. Не содержащий растворителей герметик, который можно использовать для образцов живых клеток, представляет собой «валап», смесь вазелина , ланолина и парафина в равных частях. [9] Культуры микробов и клеток можно выращивать непосредственно на покровном стекле перед его помещением на предметное стекло, а образцы можно постоянно закреплять на стекле, а не на предметном стекле. [9]
Покровные стекла доступны в различных размерах и толщинах. [10] Использование неправильной толщины может привести к сферической аберрации и снижению разрешения и интенсивности изображения. Специальные объективы могут использоваться для получения изображений образцов без покровных стекол или могут иметь корректирующие кольца, которые позволяют пользователю приспособиться к альтернативной толщине покровного стекла. [11] [12]
Сухое крепление [ править ]
При сухом креплении , простейшем виде крепления, объект просто помещается на направляющую. Сверху может быть помещено покровное стекло, чтобы защитить образец и объектив микроскопа, а также чтобы образец оставался неподвижным и прижатым. Эта установка может быть успешно использована для просмотра таких образцов, как пыльца, перья, волосы и т. Д. Она также используется для исследования частиц, захваченных прозрачными мембранными фильтрами (например, при анализе переносимой по воздуху пыли ).
Мокрое или временное крепление [ править ]
При влажном креплении образец помещают в каплю воды или другой жидкости, удерживаемой между предметным стеклом и покровным стеклом за счет поверхностного натяжения . Этот метод обычно используется, например, для наблюдения за микроскопическими организмами, которые растут в воде пруда или других жидких средах, особенно при изучении их движения и поведения. Необходимо соблюдать осторожность, чтобы исключить пузырьки воздуха, которые могут мешать обзору и затруднять движения организмов. Примером временного влажного крепления является крепление из лактофуксина , которое обеспечивает как закрепление образца, так и окрашивание фуксином .
Подготовленное или постоянное крепление [ править ]
Для патологических и биологических исследований образец обычно проходит сложную гистологическую подготовку, которая включает в себя его фиксацию для предотвращения разложения, удаление любой содержащейся в нем воды, замену воды парафином , разрезание его на очень тонкие срезы с помощью микротома , размещение срезов на предметное стекло микроскопа, окрашивая ткань различными красителями для выявления определенных компонентов ткани, очищая ткань, чтобы сделать ее прозрачной, и покрывая ее покровным стеклом и монтажной средой.
Разбросанный маунт [ править ]
Крепление к стеклу описывает изготовление предметных стекол палинологического микроскопа путем суспендирования концентрированного образца в дистиллированной воде , помещения образцов на предметное стекло и обеспечения возможности испарения воды . [13]
Монтажный носитель [ править ]
Монтажа среда представляет собой раствор , в котором образец встроен, как правило , под покровным стеклом. Простые жидкости, такие как вода или глицерин, можно рассматривать как монтажную среду, хотя этот термин обычно относится к соединениям, которые затвердевают в постоянное крепление. Популярные монтажные носители включают в себя предметный столик Permount , [14] и монтажную среду Hoyer в и альтернативный глицерин желе [15] Свойства хорошей монтажной среды включают , имеющий показатель преломленияблизка к стеклу (1,518), не реагирует с образцом, стабильность во времени без кристаллизации, потемнения или изменения показателя преломления, растворимость в среде, в которой был приготовлен образец ( водной или неполярной , такой как ксилол или толуол ), не вызывая выцветания или выщелачивания пятен образца. [16]
Примеры монтажных носителей [ править ]
Водный [ править ]
Широко используется в иммунофлуоресцентной цитохимии, где невозможно заархивировать флуоресценцию. Временное хранение должно производиться в темном влажном помещении. Типичные примеры:
- Глицерин-PBS (9: 1) с антипоглощением, например, любым из следующих [17]
- п-фенилендиамин
- пропилгаллат
- 1,4-Диазабицикло (2,2,2) -октан (DABCO) (очень популярен)
- Аскорбиновая кислота
- Мовиол или Гельватол
- Желатин
- устанавливать
- Vectashield
- Продлить золото
- CyGEL / CyGEL Sustain (для иммобилизации живых, незафиксированных клеток и организмов)
Безводный [ править ]
Используется, когда требуется постоянное крепление
- Permount (толуол и полимер a-пинена, b-пинена, дипентена, b-фелландрена)
- Канадский бальзам
- DPX ( D istrene 80 - коммерческий полистирол , А р lasticizer например , дибутилфталат и ксилол )
- DPX новый (с ксилолом, но без канцерогенного дибутилфталата )
- Энтеллан (с толуолом)
- Энтеллан новый
- Hempstead Halide Hoyer's Medium (запатентованная формулировка традиционной среды Хойера, содержащая 60% хлорала , но не содержащая известных канцерогенов)
- Neo-Mount (совместим с алифатическим нео-прозрачным покрытием, но несовместим с ароматическими растворителями, такими как ксилол)
В отличие от других типов / значений слова «монтаж» [ править ]
В отличие от монтажа, необходимого для стеклянных покровных стекол, подобный монтаж может быть выполнен для хранения более объемных образцов в стеклянных контейнерах в музеях. Однако для пробоподготовки используется совершенно другой тип монтажа , который может относиться к биологическим или небиологическим материалам и далее подразделяется на процессы монтажа «горячего» (компрессионного) и «холодного» (литьевого) типа. [18] [19] Хотя это называется «монтаж», в гистологии он больше похож на встраивание, и его не следует путать с описанным выше монтажом. Термин «монтаж» в других областях имеет множество других значений.
См. Также [ править ]
- чашка Петри
Ссылки [ править ]
- ^ Адам, Джордж. Очерки под микроскопом. 1798
- ^ Connett, Джесс (4 октября 2017). «Искусство невидимого» . Бристоль24-7 . Проверено 29 марта 2018 .
- ^ Кварцевые микроскопические слайды и покровные стекла с коммерческого веб-сайта (Тед Пелла). Проверено 23 января 2010 г.
- ^ Кварцевые микроскопы и покровные стекла Архивировано 10 августа 2015 г. настранице каталога Wayback Machine с коммерческого веб-сайта (SPI Supplies). Проверено 23 января 2010 г.
- ^ a b c d Страница каталога гистологии и световой микроскопии с коммерческого веб-сайта (EMS). Проверено 23 января 2010 г.
- ^ "Коллекция микроскопии Ленца" (PDF) . Проверено 29 марта 2018 . [ постоянная мертвая ссылка ]
- ^ a b Страница каталога препаратов для микроскопии с коммерческого сайта (ТЕКДОН). Проверено 23 января 2010 г.
- ^ Страница каталога покрытых золотом предметных стекол микроскопа и комплекта для визуализации ДНК с коммерческого веб-сайта (Asylum Research). Проверено 31 августа 2011 г.
- ^ a b Микроскопия - Протоколы, заархивированные 3 апреля 2013 г. на веб-странице преподавания Archive.today Онкологическим центром Мурса Калифорнийского университета в Сан-Диего. Проверено 07 февраля 2013 г.
- ^ Технические характеристики GE с коммерческого сайта (Тед Пелла). Проверено 23 января 2010 г.
- ^ "Ошейники коррекции покровного стекла" . Ресурсный центр по микроскопии . Олимп . Дата обращения 4 июня 2017 .
- ^ Майкл В. Дэвидсон (2010), Оптические аберрации , глава навеб-сайте Molecular Expressions в Университете штата Флорида. Последнее изменение 15 июня 2006 г., 14:39, просмотрено 12 января 2010 г.
- ^ Zippi, Пьер А. (1991). «Техника монтажа и размещения образца с помощью SEM и светового микроскопа для изучения палинологических креплений на одном образце». Микропалеонтология . 37 (4): 407–13. DOI : 10.2307 / 1485913 . JSTOR 1485913 .
- ^ "Паспорт безопасности материала, монтажная среда для постоянного монтажа" (PDF) . Проверено 29 марта 2018 .
- ^ "Глицериновое желе в качестве замены раствора Mountant Хойера" . www.mobot.org . Проверено 29 марта 2018 .
- ^ Медицинская лабораторная наука: теория и практика Очей и Колкаткер, стр. 446.
- ^ Крепление образцов флуоресценции, среда для закрепления и агенты против тушения - Институт исследований мозга UCLA
- ^ Среда для холодного и горячего монтажа, формы и камера давления - Электронная микроскопия
- ^ Allied High Tech - Союзные высокотехнологичные продукты | Металлографическое монтажное оборудование
 | Wikibook Школа Науки есть страница по теме: Микроскоп слайд |
