Из Википедии, свободной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

Synapto-pHluorin - это генетически закодированный оптический индикатор высвобождения и рециркуляции везикул. Он используется в неврологии для изучения высвобождения медиатора. Он состоит из pH-чувствительной формы зеленого флуоресцентного белка (GFP), слитого с люминальной стороной мембранного белка, ассоциированного с везикулами (VAMP). При кислом pH внутри везикул трансмиттера синапто-pHфлуорин не флуоресцирует ( гасится ). Когда везикулы высвобождаются, синапто-флюорин подвергается воздействию нейтрального внеклеточного пространства, и пресинаптический терминал становится ярко флуоресцентным. После эндоцитоза везикулы снова подкисляются, и цикл может начаться снова. Химическое подщелачиваниевсех везикул часто используется для нормализации сигналов синапто-флюорина. Synapto-pHluorin иногда состоит из желтого флуоресцентного белка (YFP) для мониторинга цитоплазмы, поскольку его pK a выше, чем GFP (7,1 против 6,0). [1]

История [ править ]

Synapto-pHluorin был изобретен Gero Miesenböck в 1998 году. [2] В 2006 году была опубликована улучшенная версия, использующая синаптофизин для нацеливания GFP на везикулы. [3] В 2013 году был представлен двухцветный датчик высвобождения (ratio-sypHy) для определения размера рециклирующего пула в отдельных синапсах. [4]

Приложения [ править ]

Synapto-pHluorin в основном используется нейробиологами для изучения высвобождения и рециркуляции медиатора на пресинаптических окончаниях . [4] Он также был применен к изучению инсулина секреции в бета - клетках в поджелудочной железе . [5]

Ссылки [ править ]

  1. ^ Эшби, Майкл С .; Ибараки, Киоко; Хенли, Джереми М. (май 2004 г.). «Снаружи зеленый: отслеживание белков клеточной поверхности с помощью pH-чувствительного GFP» . Тенденции в неврологии . 27 (5): 257–261. DOI : 10.1016 / j.tins.2004.03.010 .
  2. ^ Miesenböck, Геро; Де Анжелис, Дино А .; Ротман, Джеймс Э. (июль 1998 г.). «Визуализация секреции и синаптической передачи с помощью pH-чувствительных зеленых флуоресцентных белков» . Природа . 394 (6689): 192–195. DOI : 10.1038 / 28190 . ISSN 1476-4687 . 
  3. ^ Грансет, Бьёрн; Одерматт, Бенджамин; Ройл, Стивен Дж .; Лагнадо, Леон (сентябрь 2006 г.). «Клатрин-опосредованный эндоцитоз является доминирующим механизмом извлечения пузырьков в синапсах гиппокампа» . Нейрон . 51 (6): 773–786. DOI : 10.1016 / j.neuron.2006.08.029 .
  4. ^ а б Роза, Тобиас; Шененбергер, Филипп; Джезек, Карел; Эртнер, Томас Г. (2013). «Уточнение развития цикла пузырьков в коллатеральных синапсах Шаффера» . Нейрон . 77 (6): 1109–1121. DOI : 10.1016 / j.neuron.2013.01.021 . PMID 23522046 . 
  5. ^ Tsuboi, Takashi; Раттер, Гай А. (апрель 2003 г.). «Множественные формы экзоцитоза типа« поцелуй и беги », выявленные с помощью микроскопии неувядающих волн» . Текущая биология . 13 (7): 563–567. DOI : 10.1016 / S0960-9822 (03) 00176-3 .