7-Аминоактиномицин D ( 7-AAD ) представляет собой флуоресцентное химическое соединение с сильным сродством к ДНК . Он используется в качестве флуоресцентного маркера ДНК в флуоресцентной микроскопии и проточной цитометрии . Он встраивается в двухцепочечную ДНК с высоким сродством к областям, богатым GC, [2] , что делает его полезным для изучения дискретизации хромосом . [3]
С максимумом поглощения при 546 нм 7-ААД эффективно возбуждается с помощью гелий-неонового лазера с длиной волны 543 нм ; его также можно возбудить с несколько меньшей эффективностью с помощью линий аргонового лазера с длиной волны 488 нм или 514 нм. Его излучение имеет очень большой стоксов сдвиг с максимумом в темно-красной области: 647 нм. Таким образом, 7-AAD совместим с большинством синих и зеленых флуорофоров и даже со многими красными флуорофорами в многоцветных приложениях.
7-AAD с трудом проходит через неповрежденные клеточные мембраны ; если его нужно использовать в качестве красителя для визуализации флуоресценции ДНК, клеточная мембрана должна быть проницаема или разрушена. Этот метод можно использовать в сочетании с фиксацией образцов формальдегидом.
7-AAD также используется в качестве красителя жизнеспособности клеток . Клетки с поврежденными мембранами окрашиваются 7-AAD, в то время как живые клетки с неповрежденными клеточными мембранами остаются темными.
Родственное соединение актиномицин D не флуоресцирует, но связывается с ДНК так же, как 7-AAD. Его поглощение изменяется при связывании с ДНК, и его можно использовать в качестве красителя в обычной просвечивающей микроскопии.