Химерные нуклеазы представляют собой пример сконструированных белков, которые должны содержать ДНК-связывающий домен для придания последовательности специфичности и нуклеазный домен для расщепления ДНК .
ДНК-связывающие домены [ править ]
ДНК-связывающие домены, включая основную спираль-петлю-спираль , цинковый палец , спираль-поворот-спираль и мотивы лейциновой застежки-молнии , были использованы при конструировании нуклеаз, специфичных для последовательности. Из них цинковые пальцы были предложены наиболее важными из-за их модульности, позволяющей создавать индивидуализированный ДНК-связывающий домен. [1]
Нуклеазный домен [ править ]
Нуклеазный домен отвечает за физическое расщепление цепей ДНК и может вводить как одноцепочечные, так и двухцепочечные разрывы. FokI является примером специфической для последовательности эндонуклеазы , неспецифический нуклеазный домен которой вводит двухцепочечные разрывы, и использовался в различных экспериментах, включая идентификацию сайтов связывания с высоким и низким сродством факторов транскрипции in vitro , для изучения рекрутирования факторов к промоторным сайтам in vivo с использованием идентификации положения белка с помощью анализа нуклеазного хвоста и для изучения белков, специфичных для взаимодействия с ДНК в конформации Z-ДНК (Durai et al., 2005 и ссылки в нем).
См. Также [ править ]
Ссылки [ править ]
- ^ Durai S, мани М, Kandavelou К, Ву Дж, Porteus МН, Chandrasegaran S (2005). «Нуклеазы цинковых пальцев: специально разработанные молекулярные ножницы для геномной инженерии клеток растений и млекопитающих» . Nucleic Acids Res . 33 (18): 5978–90. DOI : 10.1093 / NAR / gki912 . PMC 1270952 . PMID 16251401 .