Из Википедии, свободной энциклопедии
  (Перенаправлено из теста фиксации комплемента )
Перейти к навигации Перейти к поиску
Цельобнаруживает специфический антиген или антитело

Тест фиксации комплемента - это иммунологический медицинский тест, который можно использовать для обнаружения присутствия либо специфического антитела, либо специфического антигена в сыворотке пациента , в зависимости от того, происходит ли фиксация комплемента . Он широко использовался для диагностики инфекций, особенно микробов, которые нелегко обнаружить методами культивирования, а также при ревматических заболеваниях. Однако в клинических диагностических лабораториях его в значительной степени вытеснили другие серологические методы, такие как ELISA, и методы обнаружения патогенов на основе ДНК, особенно ПЦР .

Процесс [ править ]

Система комплемента - это система белков сыворотки, которые реагируют с комплексами антиген-антитело. Если эта реакция происходит на поверхности клетки, это приведет к образованию трансмембранных пор и, следовательно, к разрушению клетки. Основные этапы теста фиксации комплемента следующие: [1]

  1. Сыворотка отделяется от пациента.
  2. У пациентов естественно разные уровни белков комплемента в сыворотке крови. Чтобы свести на нет любые эффекты, которые это может иметь на тест, белки комплемента в сыворотке пациента должны быть разрушены и заменены известным количеством стандартизованных белков комплемента.
    1. Сыворотка нагревается таким образом, что все белки комплемента - но ни одно из антител - в ней разрушаются. (Это возможно, потому что белки комплемента гораздо более подвержены разрушению под воздействием тепла, чем антитела.)
    2. К сыворотке добавляют известное количество стандартных белков комплемента. (Эти белки часто получают из сыворотки морской свинки.)
  3. Интересующий антиген добавляется к сыворотке.
  4. В сыворотку добавляют эритроциты овцы (sRBC) [2], которые были предварительно связаны с антителами против sRBC. Тест считается отрицательным, если раствор в этот момент становится розовым, и положительным в противном случае.

Если сыворотка пациента содержит антитела против интересующего антигена, они будут связываться с антигеном на этапе 3 с образованием комплексов антиген-антитело. Белки комплемента вступят в реакцию с этими комплексами и истощатся. Таким образом, когда комплексы sRBC-антитело добавляются на этапе 4, в сыворотке не останется никакого комплемента. Однако, если антитела против интересующего антигена отсутствуют, комплемент не будет истощен, и он будет реагировать с комплексами sRBC-антитело, добавленными на этапе 4, лизируя sRBC и проливая их содержимое в раствор, тем самым окрашивая раствор в розовый цвет. . [1]

Тестирование на антиген [ править ]

Хотя обнаружение антител является более распространенным форматом тестирования, в равной степени можно проверить наличие антигена. В этом случае сыворотка пациента дополняется специфическим антителом, чтобы вызвать образование комплексов; добавление комплемента и индикатора sRBC выполняется, как и раньше.

Полуколичественное тестирование [ править ]

Тест можно сделать количественным, установив серию разведений сыворотки пациента и определив самый высокий фактор разведения, который все равно даст положительный результат теста CF. Этот коэффициент разбавления соответствует титру .

Ссылки [ править ]

  1. ^ a b «Анимационная викторина 4 - Тест на фиксацию дополнения» . Highered.mheducation.com .
  2. ^ С. Ваман Rao (2005). Иммунология: учебник . Alpha Science Int'l Ltd. стр. 112–. ISBN 978-1-84265-255-8. Проверено 3 декабря 2010 года .

Внешние ссылки [ править ]