Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

Индуцированная остановка клеточного цикла - это использование химических веществ или генетических манипуляций для искусственного прекращения прохождения клеточного цикла . Останавливаются клеточные процессы, такие как дублирование генома и деление клеток . [1] Он может быть временным или постоянным. [1] Это искусственная активация естественных контрольных точек клеточного цикла , вызванная экзогенными стимулами, контролируемыми экспериментатором.

Модельные организмы [ править ]

Некоторые индуцированные остановки клеточного цикла происходят в ооцитах Xenopus (лягушки).

В контексте академических исследований остановка клеточного цикла обычно выполняется в модельных организмах и клеточных экстрактах, таких как Saccharomyces cervisiae (дрожжи) или ооциты Xenopus (яйца лягушки). [2] [3] Экстракты яйцеклеток лягушки широко используются в исследованиях клеточного цикла, поскольку они относительно большие, достигают в диаметре 1 мм и поэтому содержат большое количество белка, что упрощает измерение уровня белка. [4]

Цели [ править ]

Существует множество причин, по которым исследователь может захотеть временно или навсегда предотвратить продвижение по клеточному циклу.

Синхронизация клеточного цикла [ править ]

В некоторых экспериментах исследователь может захотеть контролировать и синхронизировать время, когда группа клеток переходит к следующей фазе клеточного цикла. [5] Клетки могут быть вызваны к остановке по мере их прибытия (в разные моменты времени) в определенную фазу, так что, когда остановка снимается (например, спасая развитие клеточного цикла путем введения другого химического вещества), все клетки возобновляют клеточный цикл. прогрессирование одновременно. В дополнение к этому методу, действующему как научный контроль того, когда клетки возобновляют клеточный цикл, его можно использовать для исследования необходимости и достаточности .

Другой причиной важности синхронности является контроль количества содержания ДНК, которое варьируется в разных частях клеточного цикла в зависимости от того, произошла ли репликация ДНК с момента последнего цикла завершенного митоза и цитокинеза. [6]

Кроме того, синхронизация большого количества клеток в одной фазе позволяет собирать достаточно большие группы клеток в одном цикле для использования в других анализах, таких как вестерн-блоттинг и секвенирование РНК . [7]

Ремонт повреждений ДНК [ править ]

Исследователи могут изучать механизмы восстановления повреждений ДНК . Учитывая, что некоторые из перечисленных ниже механизмов индукции остановки клеточного цикла включают повреждение ДНК, это позволяет исследовать, как клетка реагирует на повреждение своего генетического материала. [8]

Определение функции белков in vivo [ править ]

Генная инженерия клеток с определенными нокаутами генов также может привести к клеткам, которые останавливаются на разных фазах клеточного цикла. Примеры включают:

  • G 1 : дрожжи Saccharomyces cerevisiae, экспрессирующие доминантные мутантные аллели остановки CDC28 в G 1 , что указывает на то, что CDC28 необходим для перехода за пределы фазы G 1 . [9]
  • S: Schizosaccharomyces pombe (делящиеся дрожжи), экспрессирующие чувствительную к температуре мутантную форму ДНК-полимеразы дельта (pol delta ts03) в S-фазе. [10]
  • G 2 : Делящиеся дрожжи, экспрессирующие некоторые мутантные формы CDC2, неспособные задерживаться в G 2 в ответ на повреждение ДНК, что указывает на то, что продукт гена участвует в аресте G 2 . [11]
  • М: мутантный скрининг почкующихся дрожжей с остановкой митоза идентифицировал CDC16 , CDC23 и CDC27 как ключевые гены, которые при мутации вызывают остановку митоза. [12]

Блокировка фазы G 1 [ править ]

Фазы клеточного цикла

Фаза G 1 является первой из четырех фаз клеточного цикла и является частью интерфазы . Находясь в G 1, клетка синтезирует информационную РНК (мРНК) и белки для подготовки к последующим этапам интерфазы, ведущей к митозу. В человеческих соматических клетках , клеточный цикл длится около 18 часов, а G 1 фаза составляет около 1 / 3 того времени. [13] С другой стороны, у эмбрионов лягушки, морского ежа и плодовой мушки фаза G 1 очень короткая и вместо этого представляет собой небольшой промежуток между цитокинезом и фазой S. [13]

Альфа-фактор [ править ]

α-фактор - это феромон, секретируемый Saccharomyces cervisiae, который задерживает дрожжевые клетки в фазе G 1 . Это происходит за счет ингибирования фермента аденилатциклазы . [2] Фермент катализирует превращение аденозинтрифосфата (АТФ) в 3 ', 5'-циклический АМФ (цАМФ) и пирофосфат . [14]

Контактное торможение [ править ]

Контактное ингибирование - это метод остановки клеток, когда соседние клетки вступают в контакт друг с другом. Это приводит к образованию единственного слоя арестованных клеток из арестованных клеток, и это процесс, который особенно отсутствует в раковых клетках . Предполагаемый механизм зависит от p27 Kip1 , ингибитора циклин-зависимой киназы . [15] Уровень белка p27 Kip1 повышен в останавливающих клетках. Этот естественный процесс можно воспроизвести в лаборатории посредством сверхэкспрессии p27 Kip1 , что приводит к индуцированной остановке клеточного цикла в фазе G 1 . [16]

Мимозин [ править ]

Мимозин - это растительная аминокислота, которая, как было показано, обратимо ингибирует прогрессирование за пределы фазы G 1 в некоторых клетках человека, включая лимфобластоидные клетки . [5] Его предлагаемый механизм действия является железо / цинк хелатор , что истощает железа в клетке. Это вызывает двухцепочечные разрывы в ДНК, подавляя репликацию ДНК. Это может включать блокирование действия железозависимой рибонуклеотидредуктазы . Он также может ингибировать транскрипцию серингидроксиметилтрансферазы , которая имеет зависимость от цинка. [17]

Лишение сыворотки [ править ]

В культуре клеток сыворотка - это среда для выращивания клеток, содержащая питательные вещества для вирусов. Использование депривации сыворотки - частичное или полное удаление сыворотки и ее питательных веществ - было показано, чтобы остановить и синхронизировать прогрессирование клеточного цикла в фазе G 0 , например, в астроцитах новорожденных млекопитающих [18] и фибробластах крайней плоти человека . [19]

Похожий подход - аминокислотное голодание. При выращивании в среде без некоторых незаменимых аминокислот, таких как метионин , некоторые клетки задерживаются в ранней фазе G 1 . [5]

Арест фазы S [ править ]

Фаза S следует за фазой G 1 через переход G 1 / S и предшествует фазе G 2 в интерфазе и является частью клеточного цикла, в котором реплицируется ДНК. Поскольку точное дублирование генома имеет решающее значение для успешного деления клеток, процессы, происходящие во время S-фазы, жестко регулируются и широко консервативны. Комплексы до репликации, собранные до S-фазы, превращаются в активные репликационные вилки . [20] Движущей силой этого преобразования являются Cdc7 и S-фаза циклин-зависимых киназ , которые активируются после перехода G 1 / S. [20]

Афидиколин [ править ]

Афидиколин - это антибиотик, выделенный из грибка Cephalosporum aphidicola . Это обратимый ингибитор репликации ядерной ДНК эукариот, который блокирует прохождение S-фазы. Его механизм является ингибирование ДНК - полимеразы и D . Структурное исследование показало, что это, как полагают, происходит за счет связывания альфа-активного сайта полимеразы и «вращения матрицы гуанина», что предотвращает связывание дезоксицитидинтрифосфата (dCTP) . [21] Этот блок S-фазы вызывает апоптоз в клетках HeLa . [5]

2,3-DCPE [ править ]

2 [[3- (2,3-дихлорфенокси) пропил] амино] этанол (2,3-DCPE) представляет собой небольшую молекулу, которая вызывает остановку S-фазы. [22] Это было продемонстрировано на линиях раковых клеток и подавляет экспрессию B-клеточной лимфомы-экстрабольшой ( Bcl-XL ), антиапоптотического белка, который предотвращает высвобождение митохондриального содержимого, такого как цитохром c .

Блокировка фазы G 2 [ править ]

Фаза G 2 является завершающей частью интерфазы и непосредственно предшествует митозу. Он будет введен в обычные клетки только в том случае, если репликация ДНК в S-фазе завершится успешно. Это период быстрого роста клеток и синтеза белка, во время которого клетка готовится к митозу.

Разрушение мРНК циклина [ править ]

Циклины - это белки, которые контролируют прохождение клеточного цикла путем активации циклин-зависимых киназ. Разрушение эндогенной циклиновой матричной РНК клетки может задерживать экстракты яиц лягушки в интерфазе и предотвращать их попадание в митоз. [3] Введение мРНК экзогенного циклина также является достаточным для восстановления прогрессирования клеточного цикла. [3] Одним из методов такого разрушения является использование антисмысловых олигонуклеотидов , фрагментов РНК, которые связываются с мРНК циклина и предотвращают трансляцию мРНК в белок циклин. [23] На самом деле это может быть использовано для разрушения специфичных для фазы циклинов за пределами G 2 - например, разрушениемРНК циклина D1 с помощью антисмысловых олигонуклеотидов предотвращает переход от фазы G 1 к фазе S. [24]

Митотическая остановка [ править ]

Митоз не является межфазной частью клеточного цикла и генерирует две дочерние клетки.

Митоз является заключительной частью клеточного цикла и следует за интерфазой. Она состоит из четырех фаз - профазы , метафазы , анафазы и телофазе - и включает в себя конденсацию хромосом в ядре , растворение ядерной оболочки , и разделение сестринских хроматид с помощью шпинделя волокон . По завершении митоза волокна веретена исчезают, и ядерная мембрана восстанавливается вокруг каждого из двух наборов хромосом. После успешного митоза клетка физически разделяется на две идентичные дочерние клетки в процессе, называемом цитокинезом., и на этом завершается полный цикл клеточного цикла. Каждая из этих новых клеток потенциально может повторно войти в фазу G 1 и снова начать клеточный цикл. [25]

Гидроксимочевина [ править ]

Гидроксимочевина (HU) - это низкомолекулярный препарат, который ингибирует фермент рибонуклеотидредуктазу (RNR), предотвращая катализ превращения дезоксирибонуклеотидов (DNT) в рибонуклеотиды . Предполагается, что в RNR есть свободный радикал тирозила, который блокируется HU. [6] [26] Свободные радикалы необходимы для восстановления DNT и вместо этого улавливаются HU. [27] Было показано, что HU останавливает клетки как в S-фазе (здоровые клетки), так и непосредственно перед цитокинезом (мутантные клетки). [26]

Нокодазол [ править ]

Нокодазол - это химический агент, препятствующий полимеризации микротрубочек. [28] Клетки, обработанные нокодазолом, задерживают содержание ДНК в G 2 или M фазе, что можно проверить с помощью проточной цитометрии. С помощью микроскопии было установлено, что они действительно входят в митоз, но не могут образовывать веретена, необходимые для метафазы, потому что микротрубочки не могут полимеризоваться. [29] Исследования механизма показали, что он потенциально предотвращает образование альфа / бета-гетеродимера тубулином. [30]

Таксол [ править ]

Таксол действует противоположно нокодазолу, вместо этого стабилизируя полимер микротрубочек и предотвращая его разборку. Это также вызывает остановку фазы M, поскольку веретено, которое должно разъединять сестринские хроматиды, не может разобрать. [31] [32] Он действует через специфический сайт связывания на полимере микротрубочек и, как таковой, не требует GTP или других кофакторов для индукции полимеризации тубулина. [33]

Температура [ править ]

Было показано, что температура регулирует развитие клеточного цикла HeLa. Было обнаружено, что митоз является наиболее чувствительной к температуре частью клеточного цикла. [34] Остановка митоза перед цитокинезом была видна по накоплению клеток в митозе при температурах ниже нормы в диапазоне 24-31ºC (75,2-87,8ºF). [34]

Подтверждение [ править ]

Есть несколько методов, которые можно использовать для проверки того, что клетки были арестованы в нужной фазе.

Проточная цитометрия [ править ]

Проточная цитометрия - это метод измерения физических и химических характеристик популяции клеток с использованием лазеров и флуорофорных красителей, ковалентно связанных с белковыми маркерами. [35] Чем сильнее сигнал, тем больше в нем определенного белка. Окрашивание ДНК красителями иодидом пропидия или 4 ', 6'-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) позволяет разграничивать или сортировать клетки между фазами G 1, S или G 2 / M. [36]

Иммуноблоттинг [ править ]

Иммуноблоттинг - это обнаружение определенных белков в образце ткани или экстракте. Первичные антитела распознают и связывают рассматриваемый белок, и добавляются вторичные антитела, распознающие первичные антитела. Затем вторичное антитело визуализируется путем окрашивания или иммунофлуоресценции , что позволяет косвенно определять исходный белок-мишень.

Иммуноблоттинг может быть проведен для обнаружения циклинов , белков, регулирующих клеточный цикл. [37] Различные классы циклинов активируются и подавляются в разных частях клеточного цикла. Измерение циклинов из экстракта арестованной клетки может определить, в какой фазе находится клетка. Например, пик белка циклина E будет указывать на переход G 1 / S , пик циклина A будет указывать на позднюю фазу G 2 и циклин В пике будет означать митоз. [38]

Индикатор клеточного цикла на основе флуоресценции убиквитинирования (FUCCI) [ править ]

FUCCI - это система, которая использует преимущество специфической для фазы клеточного цикла экспрессии белков и их деградации по пути убиквитин-протеасома . Два флуоресцентных зонда - Cdt1 и Geminin, конъюгированные с флуоресцентными белками, - позволяют визуализировать в реальном времени фазу клеточного цикла, в которой находится клетка. [39]

Ссылки [ править ]

  1. ↑ a b Li Y, Fan J, Ju D (1 января 2019 г.). «15 - Обеспокоенность нейротоксичностью систем доставки, нацеленных на мозг». В Гао Х, Гао Х (ред.). Система адресной доставки лекарств в мозг . Академическая пресса. С. 377–408. DOI : 10.1016 / B978-0-12-814001-7.00015-9 . ISBN 978-0-12-814001-7.
  2. ^ а б Ляо Х., Торнер Дж. (апрель 1980 г.). «Дрожжевой феромон альфа-фактор ингибирует аденилатциклазу» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 77 (4): 1898–902. Bibcode : 1980PNAS ... 77.1898L . DOI : 10.1073 / pnas.77.4.1898 . PMC 348616 . PMID 6246513 .  
  3. ^ a b c Мюррей А.В., Киршнер М.В. (май 1989 г.). «Синтез циклина запускает цикл ранних эмбриональных клеток». Природа . 339 (6222): 275–80. Bibcode : 1989Natur.339..275M . DOI : 10.1038 / 339275a0 . PMID 2566917 . S2CID 4352582 .  
  4. ^ Лодиш Х, Берк А, Зипурский С.Л. и др. (2000). «Раздел 13.2: Биохимические исследования ооцитов, яиц и ранних эмбрионов» . Молекулярная клеточная биология (4-е изд.). Нью-Йорк: WH Freeman. ISBN 0-7167-3136-3.
  5. ^ a b c d Крек В., Де Каприо Дж. А. (1995). «Сотовая синхронизация» . Методы в энзимологии . Эльзевир. 254 : 114–24 . DOI : 10.1016 / 0076-6879 (95) 54009-1 . ISBN 978-0-12-182155-5. PMID  8531680 .
  6. ^ a b Коч А., Уилер Л.Дж., Мэтьюз К.К., Меррилл Г.Ф. (январь 2004 г.). «Гидроксимочевина останавливает репликацию ДНК с помощью механизма, который сохраняет базальные пулы dNTP» . Журнал биологической химии . 279 (1): 223–30. DOI : 10.1074 / jbc.M303952200 . PMID 14573610 . 
  7. ^ Перселл М, Крюгер А, Tainsky М.А. (2014-12-15). «Профили экспрессии генов репликативного и индуцированного старения» . Клеточный цикл . 13 (24): 3927–37. DOI : 10.4161 / 15384101.2014.973327 . PMC 4615143 . PMID 25483067 .  
  8. Перейти ↑ Singh A, Xu YJ (ноябрь 2016 г.). «Механизмы уничтожения клеток гидроксимочевины» . Гены . 7 (11): 99. DOI : 10,3390 / genes7110099 . PMC 5126785 . PMID 27869662 .  
  9. ^ Менденхалл MD, Ричардсон HE, Рид SI (июнь 1988). «Доминантные отрицательные мутации протеинкиназы, которые придают фенотип остановки G1» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 85 (12): 4426–30. Bibcode : 1988PNAS ... 85.4426M . DOI : 10.1073 / pnas.85.12.4426 . PMC 280442 . PMID 3288995 .  
  10. ↑ Uchiyama M, Galli I, Griffiths DJ, Wang TS (июнь 1997 г.). «Новый мутантный аллель Schizosaccharomyces pombe rad26, неспособный контролировать прогрессирование S-фазы для предотвращения преждевременного митоза» . Молекулярная и клеточная биология . 17 (6): 3103–15. DOI : 10,1128 / MCB.17.6.3103 . PMC 232163 . PMID 9154809 .  
  11. ^ аль-Khodairy F, Carr AM (апрель 1992 г.). «Мутанты репарации ДНК, определяющие пути контрольных точек G2 у Schizosaccharomyces pombe» . Журнал EMBO . 11 (4): 1343–50. DOI : 10.1002 / j.1460-2075.1992.tb05179.x . PMC 556583 . PMID 1563350 .  
  12. ^ Hwang LH, Мюррей AW (октябрь 1997). «Новый дрожжевой скрининг мутантов с остановкой митоза позволяет идентифицировать DOC1, новый ген, участвующий в протеолизе циклина» . Молекулярная биология клетки . 8 (10): 1877–87. DOI : 10.1091 / mbc.8.10.1877 . PMC 25633 . PMID 9348530 .  
  13. ^ а б Морган Д.О. (2007). Клеточный цикл: принципы управления . New Science Press. ISBN 978-0-19-920610-0. OCLC  70173205 .
  14. ^ Zhang G, Liu Y, Ruoho А.Е., Херли JH (март 1997). «Структура каталитического ядра аденилатциклазы». Природа . 386 (6622): 247–53. Bibcode : 1997Natur.386..247Z . DOI : 10.1038 / 386247a0 . PMID 9069282 . S2CID 4329051 .  
  15. ^ Seluanov А, Хайн С, Azpurua Дж, Feigenson М, Боццелла М, Z Мао и др. (Ноябрь 2009 г.). «Повышенная чувствительность к контактному торможению - ключ к разгадке устойчивости голого землекопа к раку» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 106 (46): 19352–7. Bibcode : 2009PNAS..10619352S . DOI : 10.1073 / pnas.0905252106 . PMC 2780760 . PMID 19858485 .  
  16. ↑ Li J, Yang XK, Yu XX, Ge ML, Wang WL, Zhang J, Hou YD (август 2000 г.). «Сверхэкспрессия p27 (KIP1) индуцировала остановку клеточного цикла в фазе G (1) и последующий апоптоз в клеточной линии HCC-9204» . Всемирный журнал гастроэнтерологии . 6 (4): 513–521. doi : 10.3748 / wjg.v6.i4.513 (неактивен 2021-01-11). PMC 4723549 . PMID 11819639 .  CS1 maint: DOI неактивен с января 2021 г. ( ссылка )
  17. ^ «Мимозин» . www.drugbank.ca . Проверено 13 декабря 2019 .
  18. ^ Langan TJ, Rodgers KR, Chou RC (2016-11-05). «Синхронизация культур клеток млекопитающих путем лишения сыворотки». Синхронизация клеточного цикла . Методы молекулярной биологии. 1524 . Springer Нью-Йорк. С. 97–105. DOI : 10.1007 / 978-1-4939-6603-5_6 . ISBN 978-1-4939-6602-8. PMID  27815898 .
  19. ^ Нарасимха AM, Kaulich М, Шапиро Г.С., Choi YJ, Sicinski P, Dowdy SF (июнь 2014). «Циклин D активирует опухолевый супрессор Rb путем монофосфорилирования» . eLife . 3 : e02872. DOI : 10.7554 / eLife.02872 . PMC 4076869 . PMID 24876129 .  
  20. ^ a b Takeda DY, Dutta A (апрель 2005 г.). «Репликация ДНК и прогрессирование через S-фазу» . Онкоген . 24 (17): 2827–43. DOI : 10.1038 / sj.onc.1208616 . PMID 15838518 . 
  21. ↑ Барановский А.Г., Бабаева Н.Д., Сува Ю., Гу Дж., Павлов Ю.И., Тахиров Т.Х. (декабрь 2014 г.). «Структурная основа ингибирования репликации ДНК афидиколином» . Исследования нуклеиновых кислот . 42 (22): 14013–21. DOI : 10.1093 / NAR / gku1209 . PMC 4267640 . PMID 25429975 .  
  22. ^ Чжу Н, Чжан L, В S, Teraishi Ж, Дэвис Дж, Джейкоб Д, Фан Б (июнь 2004 г.). «Индукция остановки S-фазы и сверхэкспрессии p21 небольшой молекулой 23- (2,3-дихлорфенокси) пропил] амино] этанола в корреляции с активацией ERK» . Онкоген . 23 (29): 4984–92. DOI : 10.1038 / sj.onc.1207645 . PMID 15122344 . 
  23. ^ "Словарь терминов рака NCI" . Национальный институт рака . 2011-02-02 . Проверено 13 декабря 2019 .
  24. ^ Saikawa Y, Kubota Т, Отани Y, Kitajima М, Модлин И.М. (октябрь 2001 г.). «Антисмысловой олигонуклеотид циклина D1 ингибирует рост клеток, стимулируемый эпидермальным фактором роста, и индуцирует апоптоз клеток рака желудка» . Японский журнал исследований рака . 92 (10): 1102–9. DOI : 10.1111 / j.1349-7006.2001.tb01065.x . PMC 5926617 . PMID 11676861 .  
  25. ^ «Митоз - обзор | Темы ScienceDirect» . www.sciencedirect.com . Проверено 12 декабря 2019 .
  26. ^ a b Xu YJ, Singh A, Alter GM (ноябрь 2016 г.). «Гидроксимочевина вызывает остановку цитокинеза в клетках, экспрессирующих мутированную стерол-14α-деметилазу в пути биосинтеза эргостерола» . Генетика . 204 (3): 959–973. DOI : 10.1534 / genetics.116.191536 . PMC 5105871 . PMID 27585850 .  
  27. ↑ Platt OS (март 2008 г.). «Гидроксимочевина для лечения серповидноклеточной анемии». Медицинский журнал Новой Англии . 358 (13): 1362–9. DOI : 10.1056 / NEJMct0708272 . PMID 18367739 . 
  28. Перейти ↑ Kuhn M (март 1998). «Деполимеризующие микротрубочки препараты нокодазол и колхицин ингибируют захват Listeria monocytogenes макрофагами P388D1» . Письма о микробиологии FEMS . 160 (1): 87–90. DOI : 10.1111 / j.1574-6968.1998.tb12895.x . PMID 9495017 . 
  29. ^ Kanthou C, Тозера GM (июнь 2009). «Агенты, вызывающие деполимеризацию сосудов микротрубочек: новые терапевтические агенты при онкологии и других патологиях» . Международный журнал экспериментальной патологии . 90 (3): 284–94. DOI : 10.1111 / j.1365-2613.2009.00651.x . PMC 2697551 . PMID 19563611 .  
  30. ^ Xu K, Schwarz PM, Ludueña РФ (февраль 2002). «Взаимодействие нокодазола с изотипами тубулина». Исследования в области разработки лекарств . 55 (2): 91–96. DOI : 10.1002 / ddr.10023 . ISSN 0272-4391 . S2CID 86235729 .  
  31. ↑ Choi YH, Yoo YH (декабрь 2012 г.). «Таксол-индуцированная остановка роста и апоптоз связаны с активацией ингибитора Cdk, p21WAF1 / CIP1, в клетках рака груди человека» . Отчеты онкологии . 28 (6): 2163–9. DOI : 10.3892 / or.2012.2060 . PMID 23023313 . 
  32. ^ Ikui А.Е., Ян CP, Мацумото T, Хорвицы SB (октябрь 2005). «Низкие концентрации таксола вызывают задержку митоза с последующей преждевременной диссоциацией p55CDC от Mad2 и BubR1 и отменой контрольной точки веретена, что приводит к анеуплоидии» . Клеточный цикл . 4 (10): 1385–8. DOI : 10.4161 / cc.4.10.2061 . PMID 16138009 . 
  33. Перейти ↑ Horwitz SB (1994). «Таксол (паклитаксел): механизмы действия». Анналы онкологии . 5 (Дополнение 6): S3-6. PMID 7865431 . 
  34. ^ a b Рао П.Н., Энгельберг Дж. (май 1965 г.). "He La Cells: влияние температуры на жизненный цикл". Наука . 148 (3673): 1092–4. Bibcode : 1965Sci ... 148.1092R . DOI : 10.1126 / science.148.3673.1092 . PMID 14289609 . S2CID 27085343 .  
  35. Перейти ↑ Picot J, Guerin CL, Le Van Kim C, Boulanger CM (март 2012 г.). «Проточная цитометрия: ретроспектива, основы и новейшее оборудование» . Цитотехнология . 64 (2): 109–30. DOI : 10.1007 / s10616-011-9415-0 . PMC 3279584 . PMID 22271369 .  
  36. ^ Pozarowski Р, Darzynkiewicz Z (2004-07-01). «Анализ клеточного цикла методом проточной цитометрии». Контрольно-пропускные пункты и рак . Методы молекулярной биологии. 281 . Humana Press. С. 301–11. DOI : 10.1385 / 1-59259-811-0: 301 . ISBN 978-1-59259-811-3. PMID  15220539 .
  37. ^ Дженкинс CW, Сюн Y (1996). «Иммунопреципитация и иммуноблоттинг в исследованиях клеточного цикла». Клеточный цикл - материалы и методы . Springer Berlin Heidelberg. С. 250–263. DOI : 10.1007 / 978-3-642-57783-3_22 . ISBN 978-3-540-58066-9.
  38. ^ «Циклин - обзор | Темы ScienceDirect» . www.sciencedirect.com . Проверено 12 декабря 2019 .
  39. ^ «Флуоресцентный индикатор клеточного цикла на основе убиквитинирования (FUCCI)» . MBL International . Проверено 12 декабря 2019 .

Внешние ссылки [ править ]

  • ScienceDirect - остановка клеточного цикла