Молярный коэффициент затухания

Молярный коэффициент ослабления является измерение того, насколько сильно через химические частицы затухает свет при заданной длине волны . Это внутреннее свойство вида. Единица СИ молярного коэффициента ослабления является квадратным метром на моль ( м ² / моль ), но на практике, как правило , величины выражены через M ^-1 ⋅cm ^-1 или L⋅mol ^-1 ⋅cm ^-1 ( обе последние две единицы равны 0,1 м ² / моль ). В более ранней литературе см ²/ моль иногда используется; 1 M ⁻¹ ⋅cm ⁻¹ равно 1000 см ² / моль. Молярный коэффициент ослабления также известен как молярный коэффициент экстинкции и мольные поглощательная , но использование этих альтернативных терминов было обескуражено IUPAC. ^{[1] [2]}

Закон Бера – Ламберта [ править ]

Абсорбцию из материала , который имеет только один ослабляющие видов также зависит от длины пути и концентрации видов, в соответствии с законом Ламберта-Бера

${\ displaystyle A = \ varepsilon c \ ell,}$

где

• ε - молярный коэффициент затухания этого материала;
• c - молярная концентрация этих веществ;
• ℓ - длина пути.

В разных дисциплинах существуют разные соглашения относительно того, является ли поглощение декадным (на основе 10) или непьеровским (на основе e), т. Е. Определяется по отношению к передаче через десятичный логарифм (log ₁₀ ) или натуральный логарифм (ln). Молярный коэффициент затухания обычно декадный. ^[3] Когда существует двусмысленность, лучше всего указать, какой из них применим.

Когда в растворе присутствуют компоненты, ослабляющие азот , общая абсорбция представляет собой сумму абсорбций для каждого отдельного вида i :

${\ displaystyle A = \ sum _ {i = 1} ^ {N} A_ {i} = \ ell \ sum _ {i = 1} ^ {N} \ varepsilon _ {i} c_ {i}.}$

Состав смеси N ослабляющих веществ может быть определен путем измерения оптической плотности на N длинах волн (также должны быть известны значения молярного коэффициента ослабления для каждого компонента на этих длинах волн). Выбранные длины волн обычно являются длинами волн максимального поглощения (максимумов поглощения) для отдельных видов. Ни одна из длин волн не должна быть изобестической точкой для пары видов. Система следующих одновременных уравнений может быть решена для определения концентраций каждого ослабляющего вещества:

${\ displaystyle {\ begin {cases} A (\ lambda _ {1}) = \ ell \ sum _ {i = 1} ^ {N} \ varepsilon _ {i} (\ lambda _ {1}) c_ {i }, \\\ ldots \\ A (\ lambda _ {N}) = \ ell \ sum _ {i = 1} ^ {N} \ varepsilon _ {i} (\ lambda _ {N}) c_ {i} . \\\ end {case}}}$

Молярный коэффициент затухания (в единицах см ² ) напрямую связан с поперечным сечением затухания через постоянную Авогадро N _A : ^[4]

${\ displaystyle \ sigma = \ ln (10) {\ frac {10 ^ {3}} {N _ {\ text {A}}}} \ varepsilon \ приблизительно 3.82353216 \ times 10 ^ {- 21} \, \ varepsilon. }$

Коэффициент массового ослабления [ править ]

Массовый коэффициент ослабления равен молярный коэффициент затухания , деленный на молярной массе .

Белки [ править ]

В биохимии молярный коэффициент ослабления белка при 280 нм зависит почти исключительно от числа ароматических остатков, особенно триптофана , и его можно предсказать по последовательности аминокислот . ^[5] Точно так же коэффициент экстинкции нуклеиновых кислот при 260 нм можно предсказать, исходя из нуклеотидной последовательности.

Если известен молярный коэффициент ослабления, его можно использовать для определения концентрации белка в растворе.

Ссылки [ править ]

Внешние ссылки [ править ]

• Nikon MicroscopyU: Introduction to Fluorescent Proteins включает таблицу молярного коэффициента ослабления флуоресцентных белков .