NeutrAvidin белок является де гликозилированного версия куриного авидин , с массой около 60 000 дальтон . В результате удаления углеводов связывание лектина снижается до неопределяемого уровня, но аффинность связывания биотина сохраняется, поскольку углевод не является необходимым для этой активности. Авидин имеет высокую Pí , но NeutrAvidin имеет почти нейтральный Pí (рН 6,3), сводя к минимуму неспецифические взаимодействия с отрицательно заряженной поверхности клетки или с помощью ДНК / РНК. Нейтравидин все еще имеет остатки лизина, которые остаются доступными для дериватизации или конъюгации .
Как и сам авидин, нейтравидин представляет собой тетрамер с сильным сродством к биотину ( K d = 10 -15 M). В биохимических применениях стрептавидин , который также очень прочно связывается с биотином, может использоваться взаимозаменяемо с нейтравидином.
Авидин, иммобилизованный на твердых носителях, также используется в качестве очищающей среды для захвата меченных биотином молекул белков или нуклеиновых кислот . Например, белки клеточной поверхности могут быть специфически помечены мембранно-непроницаемым биотиновым реагентом , а затем специфически захвачены с использованием носителя NeutrAvidin.
Рекомендации
- Байер, Эд: " Авидин-биотиновый комплекс ", кафедра биологической химии, Институт науки Вейцмана, Израиль
Y. Hiller, JM Gershoni, EA Bayer, M. Wilchek Biochem. J., 248 (1987), стр. 167–171.
EA Bayer, F. De Meester, T. Kulik, M. Wilchek Appl. Biochem. Biotechnol., 53 (1995), стр. 1–9.
AT Marttilaa et al. FEBS Letters 467 (2000), стр. 31–36 Рекомбинантный нейтралитный авидин: негликозилированный кислый мутант куриного авидина, который проявляет высокое сродство к биотину и низкие неспецифические связывающие свойства.