 | Эта статья требует дополнительных ссылок для проверки . ( январь 2020 г. ) ( Узнайте, как и когда удалить это сообщение-шаблон ) |
Рестрикционный фрагмент представляет собой ДНК - фрагмент , полученный от резки нити ДНК с помощью фермента рестрикции (эндонуклеаз рестрикции), этот процесс называется ограничением. [1] Каждый рестрикционный фермент является высокоспецифичным, распознавая определенную короткую последовательность ДНК или сайт рестрикции и разрезая обе цепи ДНК в определенных точках внутри этого сайта. Большинство сайтов рестрикции являются палиндромными (последовательность нуклеотидов одинакова на обеих цепях при считывании в направлении от 5 'до 3' каждой цепи) и составляют от четырех до восьми нуклеотидов.длинный. Многие разрезы выполняются одним рестрикционным ферментом из-за случайного повторения этих последовательностей в длинной молекуле ДНК, что дает набор рестрикционных фрагментов. Конкретная молекула ДНК всегда будет давать один и тот же набор рестрикционных фрагментов при воздействии одного и того же рестрикционного фермента. Рестрикционные фрагменты можно анализировать с использованием таких методов, как гель-электрофорез, или использовать в технологии рекомбинантных ДНК . [2]
Приложения [ править ]
В технологии рекомбинантной ДНК используются специфические эндонуклеазы рестрикции, которые будут выделять конкретный ген и расщеплять сахарно-фосфатные остова в разных точках (сохраняя симметрию), так что двухцепочечные рестрикционные фрагменты имеют одноцепочечные концы. Эти короткие удлинения, называемые липкими концами , могут образовывать пары оснований с водородными связями с дополнительными липкими концами на любой другой ДНК, разрезанной тем же ферментом (например, бактериальной плазмиде).
При электрофорезе в агарозном геле рестрикционные фрагменты дают картину полос, характерную для исходной молекулы ДНК и используемого рестрикционного фермента, например, относительно небольшие молекулы ДНК вирусов и плазмид могут быть идентифицированы просто по структуре их рестрикционных фрагментов. Если нуклеотидные различия двух разных аллелей возникают в пределах сайта рестрикции определенного рестрикционного фермента, расщепление сегментов ДНК людей с разными аллелями для этого конкретного гена этим ферментом приведет к получению разных фрагментов, и каждый из них даст разные рисунки полос в геле. электрофорез.
Ссылки [ править ]
- Перейти ↑ Roberts, RJ (2005). «Как рестрикционные ферменты стали рабочими лошадками молекулярной биологии» . Труды Национальной академии наук . 102 (17): 5905–5908. DOI : 10.1073 / pnas.0500923102 . PMC 1087929 . PMID 15840723 .
- ^ Кэмпбелл, Нил А .; Джейн Б. Рис (2005). Биология (Седьмое изд.). Бенджамин Камминс. ISBN 0-8053-7171-0.
 | Эта статья о генетике - незавершенная . Вы можете помочь Википедии, расширив ее . |
