Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Конструирование рекомбинантной ДНК, в которой фрагмент чужеродной ДНК вставлен в плазмидный вектор. В этом примере ген, обозначенный белым цветом, инактивируется при вставке фрагмента чужеродной ДНК.
Часть серии по
Генная инженерия
Генная инженерия logo.png
 
Генетически модифицированные организмы
История и регулирование
Процесс
Приложения
Споры

Молекулы рекомбинантной ДНК ( рДНК ) - это молекулы ДНК , образованные лабораторными методами генетической рекомбинации (такими как молекулярное клонирование ), которые объединяют генетический материал из нескольких источников, создавая последовательности , которые иначе не были бы обнаружены в геноме .

Рекомбинантная ДНК - это общее название фрагмента ДНК, который был создан путем объединения как минимум двух фрагментов из двух разных источников. Рекомбинантная ДНК возможна, потому что молекулы ДНК всех организмов имеют одинаковую химическую структуру и отличаются только нуклеотидной последовательностью в пределах этой идентичной общей структуры. Молекулы рекомбинантной ДНК иногда называют химерной ДНК , потому что они могут состоять из материала двух разных видов, например, из мифической химеры . Технология R-ДНК использует палиндромные последовательности и приводит к образованию липких и тупых концов .

Последовательности ДНК, используемые при создании рекомбинантных молекул ДНК, могут происходить от любого вида . Например, ДНК растений может быть соединена с ДНК бактерий, или ДНК человека может быть соединена с ДНК грибов. Кроме того, последовательности ДНК, которые не встречаются в природе, могут быть созданы путем химического синтеза ДНК и включены в рекомбинантные молекулы. Используя технологию рекомбинантной ДНК и синтетическую ДНК, можно создать буквально любую последовательность ДНК и ввести ее в любой из очень широкого круга живых организмов.

Белки, которые могут быть результатом экспрессии рекомбинантной ДНК в живых клетках, называются рекомбинантными белками . Когда рекомбинантная ДНК, кодирующая белок, вводится в организм-хозяин, рекомбинантный белок не обязательно продуцируется. [1] Экспрессия чужеродных белков требует использования специализированных экспрессионных векторов и часто требует значительной реструктуризации чужеродными кодирующими последовательностями. [2]

Рекомбинантная ДНК отличается от генетической рекомбинации тем, что первая является результатом искусственных методов в пробирке, а вторая - нормальным биологическим процессом, который приводит к повторному смешиванию существующих последовательностей ДНК практически во всех организмах.

Создание ДНК [ править ]

Основная статья: Молекулярное клонирование

Молекулярное клонирование - это лабораторный процесс, используемый для создания рекомбинантной ДНК. [3] [4] [5] [6] Это один из двух наиболее широко используемых методов, наряду с полимеразной цепной реакцией (ПЦР), используемых для управления репликацией любой конкретной последовательности ДНК, выбранной экспериментатором. Между методами есть два принципиальных различия. Во-первых, молекулярное клонирование включает репликацию ДНК внутри живой клетки, в то время как ПЦР реплицирует ДНК в пробирке, свободной от живых клеток. Другое отличие состоит в том, что клонирование включает вырезание и вставку последовательностей ДНК, а ПЦР амплифицируется путем копирования существующей последовательности.

Для образования рекомбинантной ДНК требуется вектор клонирования , молекула ДНК, которая реплицируется в живой клетке. Векторы обычно происходят из плазмид или вирусов и представляют собой относительно небольшие сегменты ДНК, которые содержат необходимые генетические сигналы для репликации, а также дополнительные элементы для удобства вставки чужеродной ДНК, идентификации клеток, содержащих рекомбинантную ДНК, и, при необходимости, экспрессии чужеродная ДНК. Выбор вектора для молекулярного клонирования зависит от выбора организма-хозяина, размера клонируемой ДНК и от того, должна ли и как экспрессироваться чужеродная ДНК. [7] Сегменты ДНК могут быть объединены с использованием различных методов, таких как клонирование рестриктазой / лигазой илиСборка Гибсона .

В стандартных протоколах клонирования клонирование любого фрагмента ДНК по существу включает семь этапов: (1) Выбор организма-хозяина и вектора клонирования, (2) Получение векторной ДНК, (3) Подготовка ДНК для клонирования, (4) Создание рекомбинантная ДНК, (5) введение рекомбинантной ДНК в организм-хозяин, (6) отбор организмов, содержащих рекомбинантную ДНК, и (7) скрининг клонов с желаемыми вставками ДНК и биологическими свойствами. [6] Эти шаги подробно описаны в соответствующей статье ( молекулярное клонирование ).

Выражение ДНК [ править ]

Основная статья: Производство белка

После трансплантации в организм-хозяин чужеродная ДНК, содержащаяся в конструкции рекомбинантной ДНК, может экспрессироваться или не экспрессироваться . То есть ДНК может просто реплицироваться без экспрессии, или она может транскрибироваться и транслироваться, и получается рекомбинантный белок. Вообще говоря, экспрессия чужеродного гена требует реструктуризации гена для включения последовательностей, необходимых для производства молекулы мРНК , которая может использоваться трансляционным аппаратом хозяина (например, промотором , сигналом инициации трансляции и терминатором транскрипции ). [8]В организм-хозяин могут быть внесены специфические изменения для улучшения экспрессии эктопического гена. Кроме того, могут потребоваться изменения и в кодирующих последовательностях, чтобы оптимизировать трансляцию, сделать белок растворимым, направить рекомбинантный белок в нужное клеточное или внеклеточное местоположение и стабилизировать белок от деградации. [9] [10]

Свойства организмов, содержащих рекомбинантную ДНК [ править ]

В большинстве случаев организмы, содержащие рекомбинантную ДНК, имеют явно нормальный фенотип . То есть их внешний вид, поведение и метаболизм обычно не изменяются, и единственный способ продемонстрировать присутствие рекомбинантных последовательностей - это исследовать саму ДНК, обычно с использованием теста полимеразной цепной реакции (ПЦР). [11] Существуют значительные исключения, которые обсуждаются ниже.

Если последовательности рДНК кодируют ген, который экспрессируется, то присутствие РНК и / или белковых продуктов рекомбинантного гена может быть обнаружено, как правило, с использованием методов ОТ-ПЦР или вестерн-гибридизации . [11] Грубые фенотипические изменения не являются нормой, если только рекомбинантный ген не был выбран и модифицирован таким образом, чтобы вызвать биологическую активность в организме хозяина. [12] Дополнительные фенотипы, которые встречаются, включают токсичность для организма-хозяина, вызванную продуктом рекомбинантного гена, особенно если он чрезмерно экспрессируется или экспрессируется в неподходящих клетках или тканях.

В некоторых случаях рекомбинантная ДНК может оказывать вредное воздействие, даже если она не экспрессируется. Одним из механизмов, с помощью которого это происходит, является инсерционная инактивация , при которой рДНК вставляется в ген клетки-хозяина. В некоторых случаях исследователи используют это явление, чтобы « выбить » гены, чтобы определить их биологическую функцию и важность. [13]Другой механизм, с помощью которого вставка рДНК в хромосомную ДНК может влиять на экспрессию генов, - это неправильная активация ранее не экспрессируемых генов клетки-хозяина. Это может произойти, например, когда фрагмент рекомбинантной ДНК, содержащий активный промотор, оказывается рядом с ранее молчащим геном клетки-хозяина, или когда ген клетки-хозяина, который функционирует, чтобы сдерживать экспрессию гена, подвергается инсерционной инактивации рекомбинантной ДНК.

Применение ДНК [ править ]

Рекомбинантная ДНК широко используется в биотехнологии , медицине и исследованиях . Сегодня рекомбинантные белки и другие продукты, полученные в результате использования технологии ДНК, можно найти практически в каждой западной аптеке, у врача или ветеринара, в медицинской испытательной лаборатории и лаборатории биологических исследований. Кроме того, организмы, которыми манипулировали с помощью технологии рекомбинантной ДНК, а также продукты, полученные из этих организмов, нашли свое применение во многих фермах, супермаркетах , аптеках для домашней медицины и даже в зоомагазинах, таких как те, которые продают GloFish и другие генетически модифицированные животные .

Чаще всего рекомбинантная ДНК применяется в фундаментальных исследованиях, в которых технология важна для большинства текущих работ в биологических и биомедицинских науках. [11] Рекомбинантная ДНК используется для идентификации, картирования и определения последовательности генов, а также для определения их функции. Зонды рДНК используются для анализа экспрессии генов в отдельных клетках и в тканях целых организмов. Рекомбинантные белки широко используются в качестве реагентов в лабораторных экспериментах и ​​для создания зондов антител для изучения синтеза белка в клетках и организмах. [4]

Многие дополнительные практические применения рекомбинантной ДНК находят в промышленности, производстве продуктов питания, медицине и ветеринарии, сельском хозяйстве и биоинженерии. [4] Некоторые конкретные примеры приведены ниже.

Рекомбинантный химозин
Найдено в сычуге , химозин представляет собой фермент , необходимый для производства сыра. Это была первая пищевая добавка, созданная с помощью генной инженерии, которая используется в коммерческих целях. Традиционно переработчики получали химозин из сычужного фермента, препарата, полученного из четвертого желудка телят, вскармливаемых молоком. Ученые создали непатогенный штамм (K-12) бактерий E. coli для крупномасштабного лабораторного производства фермента. Этот рекомбинантный фермент, полученный микробиологически, идентичный по структуре ферменту, полученному из теленка, стоит меньше и производится в больших количествах. Сегодня около 60% твердого сыра в США производится с использованием химозина, созданного с помощью генной инженерии. В 1990 году FDA присвоило химозину статус « общепризнанного безопасного » (GRAS) на основании данных, показывающих, что этот фермент безопасен. [14]
Рекомбинантный человеческий инсулин
Практически полностью заменил инсулин, полученный из животных источников (например, свиней и крупного рогатого скота) для лечения инсулинозависимого диабета . Широко используется множество различных препаратов рекомбинантного инсулина. [15] Рекомбинантный инсулин синтезируется путем встраивания гена человеческого инсулина в E. coli или дрожжи (Saccharomyces cerevisiae) [16], которые затем производят инсулин для использования человеком. [17]
Рекомбинантный гормон роста человека (HGH, соматотропин)
Вводится пациентам, у которых гипофиз вырабатывает недостаточное количество для поддержания нормального роста и развития. Прежде чем рекомбинантный гормон роста стал доступным, гормон роста для терапевтического использования был получен из гипофиза трупов. Эта небезопасная практика привела к развитию у некоторых пациентов болезни Крейтцфельдта – Якоба . Рекомбинантный гормон роста устранил эту проблему и теперь используется в терапевтических целях. [18] Спортсмены и другие люди злоупотребляли им как лекарство, повышающее спортивные результаты. [19] Запись в DrugBank
Рекомбинантный фактор свертывания крови VIII
Белок свертывания крови, который вводят пациентам с формами гемофилии с нарушением свертываемости крови, которые не могут продуцировать фактор VIII в количествах, достаточных для поддержания нормальной свертываемости крови. [20] До разработки рекомбинантного фактора VIII белок был получен путем обработки больших количеств человеческой крови от нескольких доноров, которые несли очень высокий риск передачи инфекционных заболеваний , передающихся через кровь , например ВИЧ и гепатита B. Запись в DrugBank
Рекомбинантная вакцина против гепатита В
Инфекция гепатита B контролируется с помощью использования рекомбинантной вакцины против гепатита B, которая содержит форму поверхностного антигена вируса гепатита B, который продуцируется в дрожжевых клетках. Разработка рекомбинантной субъединичной вакцины была важной и необходимой разработкой, поскольку вирус гепатита В, в отличие от других распространенных вирусов, таких как вирус полиомиелита , нельзя выращивать in vitro . Информация о вакцинах от Фонда гепатита В
Диагностика заражения ВИЧ
Каждый из трех широко используемых методов диагностики ВИЧ-инфекции был разработан с использованием рекомбинантной ДНК. Тест на антитела ( ELISA или вестерн-блоттинг ) использует рекомбинантный белок ВИЧ для проверки наличия антител, которые организм вырабатывает в ответ на ВИЧ-инфекцию. ДНК-тест проверяет наличие генетического материала ВИЧ с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Разработка теста RT-PCR стала возможной благодаря молекулярному клонированию и анализу последовательности геномов ВИЧ. Страница тестирования на ВИЧ из Центров по контролю за заболеваниями США (CDC)
Золотой рис
Рекомбинантный сорт риса, который был разработан для экспрессии ферментов, ответственных за биосинтез β-каротина . [12] Этот сорт риса обещает снизить уровень дефицита витамина А среди населения мира. [21] Золотой рис в настоящее время не используется в ожидании решения нормативных вопросов и вопросов интеллектуальной собственности [22] .
Устойчивые к гербицидам культуры
Были разработаны коммерческие сорта важных сельскохозяйственных культур (включая сою, кукурузу / кукурузу, сорго, канолу, люцерну и хлопок), которые включают рекомбинантный ген, который приводит к устойчивости к гербициду глифосату (торговое название Roundup ) и упрощает борьбу с сорняками с помощью глифосата. заявление. [23] Эти культуры широко используются в коммерческих целях в нескольких странах.
Устойчивые к насекомым культуры
Bacillus thuringeiensis - это бактерия, которая естественным образом вырабатывает белок ( токсин Bt ) с инсектицидными свойствами. [21] Бактерия применялась к посевам в качестве стратегии борьбы с насекомыми в течение многих лет, и эта практика получила широкое распространение в сельском хозяйстве и садоводстве. Недавно были разработаны растения, которые экспрессируют рекомбинантную форму бактериального белка, которая может эффективно контролировать некоторых насекомых-хищников. Экологические проблемы, связанные с использованием этих трансгенных культур, полностью не решены. [24]

История [ править ]

Идея рекомбинантной ДНК была впервые предложена Питером Лоббаном, аспирантом профессора Дейла Кайзера с факультета биохимии Медицинской школы Стэнфордского университета. [25] Первые публикации, описывающие успешное производство и внутриклеточную репликацию рекомбинантной ДНК, появились в 1972 и 1973 годах в Стэнфорде и UCSF . [26] [27] [28] [29] В 1980 году Пол Берг , профессор кафедры биохимии в Стэнфорде и автор одной из первых статей [26], был удостоен Нобелевской премии по химии за свою работу по нуклеиновым кислотам. «с особым вниманием к рекомбинантной ДНК». Вернер Арбер, Гамильтон Смит и Дэниел Натанс разделили Нобелевскую премию по физиологии и медицине 1978 года за открытие рестрикционных эндонуклеаз, которые усовершенствовали методы технологии рДНК.

Стэнфордский университет подал заявку на патент США на рекомбинантную ДНК в 1974 году, указав в качестве изобретателей Герберта Бойера (профессора Калифорнийского университета в Сан-Франциско ) и Стэнли Н. Коэна (профессора Стэнфордского университета ); этот патент был получен в 1980 году. [30] Первым лицензированным лекарством, созданным с использованием технологии рекомбинантной ДНК, был человеческий инсулин, разработанный Genentech и лицензированный Eli Lilly and Company . [31]

Противоречие [ править ]

Ученые, связанные с первоначальной разработкой методов рекомбинантной ДНК, признали, что у организмов, содержащих рекомбинантную ДНК, существует возможность иметь нежелательные или опасные свойства. На конференции Asilomar 1975 года по рекомбинантной ДНКэти опасения были обсуждены, и был введен добровольный мораторий на исследования рекомбинантной ДНК для экспериментов, которые считались особенно рискованными. Этот мораторий широко соблюдался до тех пор, пока Национальные институты здравоохранения (США) не разработали и не выпустили официальные инструкции по работе с рДНК. Сегодня рекомбинантные молекулы ДНК и рекомбинантные белки обычно не считаются опасными. Однако остаются опасения по поводу некоторых организмов, экспрессирующих рекомбинантную ДНК, особенно когда они покидают лабораторию и попадают в окружающую среду или в пищевую цепь. Эти опасения обсуждаются в статьях о генетически модифицированных организмах и спорах о генетически модифицированных пищевых продуктах.. Кроме того, существуют опасения по поводу побочных продуктов в биофармацевтическом производстве, когда рекомбинантная ДНК приводит к образованию определенных белковых продуктов. Основной побочный продукт, называемый белком клетки-хозяина , исходит из системы экспрессии хозяина и представляет угрозу для здоровья пациента и окружающей среды в целом. [32] [33]

См. Также [ править ]

  • Asilomar конференция по рекомбинантной ДНК
  • Генная инженерия
  • Генетически модифицированный организм
  • Рекомбинантный вирус
  • Векторная ДНК
  • Биомолекулярная инженерия
  • Технология рекомбинантной ДНК
  • Белок клетки-хозяина

Ссылки [ править ]

  1. ^ Rosano, Germán L .; Чеккарелли, Эдуардо А. (17 апреля 2014 г.). «Экспрессия рекомбинантного белка в Escherichia coli: достижения и проблемы» . Границы микробиологии . 5 : 172. DOI : 10,3389 / fmicb.2014.00172 . ISSN  1664-302X . PMC  4029002 . PMID  24860555 .
  2. ^ «Промоторы, используемые для регулирования экспрессии генов» . www.cambia.org . Проверено 16 февраля 2018 .
  3. ^ Кэмпбелл, Нил А. и Рис, Джейн Б. (2002). Биология (6-е изд.) . Сан-Франциско: Эддисон Уэсли. С. 375–401. ISBN 978-0-201-75054-6.
  4. ^ a b c Питер Уолтер; Альбертс, Брюс; Джонсон, Александр С .; Льюис, Джулиан; Рафф, Мартин С .; Робертс, Кит (2008). Молекулярная биология клетки (5-е издание, расширенная версия) . Нью-Йорк: Наука Гарланд. ISBN 978-0-8153-4111-6.. Четвертое издание доступно в Интернете на книжной полке NCBI: ссылка
  5. ^ Берг, Джереми Марк; Тимочко, Джон Л .; Страйер, Люберт (2010). Биохимия, 7-е изд. (Биохимия (Берг)) . WH Freeman & Company. ISBN 978-1-4292-2936-4.Пятое издание доступно онлайн на книжной полке NCBI: ссылка
  6. ^ a b Уотсон, Джеймс Д. (2007). Рекомбинантная ДНК: гены и геномы: краткий курс . Сан-Франциско: WH Freeman. ISBN 978-0-7167-2866-5.
  7. ^ Рассел, Дэвид В .; Сэмбрук, Джозеф (2001). Молекулярное клонирование: лабораторное руководство . Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк: Лаборатория Колд-Спринг-Харбор. ISBN 978-0-87969-576-7.
  8. ^ Hannig, G .; Макридес, С. (1998). «Стратегии оптимизации экспрессии гетерологичных белков в Escherichia coli». Тенденции в биотехнологии . 16 (2): 54–60. DOI : 10.1016 / S0167-7799 (97) 01155-4 . PMID 9487731 . 
  9. ^ Brondyk, WH (2009). «Глава 11 Выбор подходящего метода экспрессии рекомбинантного белка». Руководство по очистке белков, 2-е издание . Методы в энзимологии. 463 . С. 131–147. DOI : 10.1016 / S0076-6879 (09) 63011-1 . ISBN 9780123745361. PMID  19892171 .
  10. ^ Ортега, Клаудиа; Прието, Даниэль; Абреу, Сесилия; Оппеццо, Пабло Хавьер; Корреа, Агустин (2018). «Набор векторов с несколькими отсеками и множественными хозяевами для экспрессии и очистки рекомбинантных белков» . Границы микробиологии . 9 : 1384. DOI : 10,3389 / fmicb.2018.01384 . ISSN 1664-302X . PMC 6030378 . PMID 29997597 .   
  11. ^ a b c Браун, Терри (2006). Клонирование генов и анализ ДНК: введение . Кембридж, Массачусетс: Blackwell Pub. ISBN 978-1-4051-1121-8.
  12. ^ a b Ye, X .; Аль-Бабили, С .; Klöti, A .; Zhang, J .; Lucca, P .; Beyer, P .; Потрикус, И. (2000). «Разработка пути биосинтеза провитамина А (бета-каротин) в (не содержащий каротиноидов) эндосперм риса». Наука . 287 (5451): 303–305. Bibcode : 2000Sci ... 287..303Y . DOI : 10.1126 / science.287.5451.303 . PMID 10634784 . 
  13. ^ Коллер, BH; Smithies, О. (1992). «Изменение генов у животных путем нацеливания на гены». Ежегодный обзор иммунологии . 10 : 705–730. DOI : 10.1146 / annurev.iy.10.040192.003421 . PMID 1591000 . 
  14. ^ Донна У. Фогт и Микки Пэриш. (1999) Пищевая биотехнология в США: наука, регулирование и проблемы
  15. ^ Гуаланди-Синьорини, А .; Георгий, Г. (2001). «Препараты инсулина - обзор». Европейский обзор медицинских и фармакологических наук . 5 (3): 73–83. PMID 12004916 . 
  16. ^ # Инсулин аспарт
  17. ^ DrugBank: Обычный инсулин (DB00030)
  18. ^ Фон Фанге, Т .; McDiarmid, T .; MacKler, L .; Золотор, А. (2008). «Клинические исследования: Может ли рекомбинантный гормон роста эффективно лечить идиопатический низкий рост?». Журнал семейной практики . 57 (9): 611–612. PMID 18786336 . 
  19. ^ Фернандес, М .; Хози, Р. (2009). «Наркотики, повышающие спортивную результативность, ловят и не спортсменов». Журнал семейной практики . 58 (1): 16–23. PMID 19141266 . 
  20. Перейти ↑ Manco-Johnson, MJ (2010). «Достижения в уходе и лечении детей с гемофилией». Успехи педиатрии . 57 (1): 287–294. DOI : 10.1016 / j.yapd.2010.08.007 . PMID 21056743 . 
  21. ^ а б Пейн, Дж. А; Шиптон, Калифорния; Chaggar, S .; Хауэллс, РМ; Кеннеди, MJ; Vernon, G .; Райт, штат Вашингтон; Hinchliffe, E .; Адамс, JL; Сильверстоун, Алабама; Дрейк, Р. (2005). «Повышение питательной ценности золотого риса за счет увеличения содержания провитамина А». Природа Биотехнологии . 23 (4): 482–487. DOI : 10.1038 / nbt1082 . PMID 15793573 . S2CID 632005 .  
  22. ↑ Deccan Herald, «Иностранная группа поддерживает« золотой рис »в Индии», 18 марта 2015 г. http://www.deccanherald.com/content/466247/foreign-group-roots-golden-rice.html
  23. ^ Funke, T .; Han, H .; Healy-Fried, M .; Фишер, М .; Шенбрунн, Э. (2006). «Молекулярная основа устойчивости к гербицидам культур Roundup Ready» . Труды Национальной академии наук . 103 (35): 13010–13015. Bibcode : 2006PNAS..10313010F . DOI : 10.1073 / pnas.0603638103 . PMC 1559744 . PMID 16916934 .  
  24. ^ Мендельсон, М .; Kough, J .; Vaituzis, Z .; Мэтьюз, К. (2003). "Безопасны ли Bt-культуры?" . Природа Биотехнологии . 21 (9): 1003–1009. DOI : 10.1038 / nbt0903-1003 . PMID 12949561 . S2CID 16392889 .  
  25. ^ Лир, Дж. (1978). Рекомбинантная ДНК: невыразимая история . Нью-Йорк: Crown Publishers. п. 43.
  26. ^ a b Джексон, Д .; Саймонс, Р.; Берг, П. (1972). «Биохимический метод вставки новой генетической информации в ДНК обезьяньего вируса 40: кольцевые молекулы ДНК SV40, содержащие гены лямбда-фага и оперон галактозы Escherichia coli» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 69 (10): 2904–2909. Bibcode : 1972PNAS ... 69.2904J . DOI : 10.1073 / pnas.69.10.2904 . PMC 389671 . PMID 4342968 .  
  27. ^ Mertz, JE; Дэвис, Р.В. (1972). «Расщепление ДНК эндонуклеазой рестрикции R 1 приводит к образованию липких концов» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 69 (11): 3370–4. Bibcode : 1972PNAS ... 69.3370M . DOI : 10.1073 / pnas.69.11.3370 . PMC 389773 . PMID 4343968 .  
  28. ^ Лоббан, П .; Кайзер, А. (1973). «Ферментативное соединение молекул ДНК от конца к концу». Журнал молекулярной биологии . 78 (3): 453–471. DOI : 10.1016 / 0022-2836 (73) 90468-3 . PMID 4754844 . 
  29. ^ Коэн, S .; Чанг, А .; Boyer, H .; Хеллинг, Р. (1973). «Конструирование биологически функциональных бактериальных плазмид in vitro» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 70 (11): 3240–3244. Bibcode : 1973PNAS ... 70.3240C . DOI : 10.1073 / pnas.70.11.3240 . PMC 427208 . PMID 4594039 .  
  30. ^ Хьюз, С. (2001). «Создание долларов из ДНК. Первый крупный патент в области биотехнологии и коммерциализации молекулярной биологии, 1974-1980» (PDF) . Исида; Международный обзор, посвященный истории науки и ее культурному влиянию . 92 (3): 541–575. DOI : 10.1086 / 385281 . ЛВП : 10161/8125 . PMID 11810894 .  
  31. ^ Джонсон, IS (1983). «Человеческий инсулин из технологии рекомбинантной ДНК». Наука . 219 (4585): 632–637. Bibcode : 1983Sci ... 219..632J . DOI : 10.1126 / science.6337396 . PMID 6337396 . 
  32. ^ Ван, Син; Хантер, Алан К .; Мозье, Нед М. (15.06.2009). «Белки клетки-хозяина в разработке биопрепаратов: идентификация, количественное определение и оценка риска» . Биотехнология и биоинженерия . 103 (3): 446–458. DOI : 10.1002 / bit.22304 . ISSN 0006-3592 . PMID 19388135 . S2CID 22707536 .   
  33. ^ Bracewell, Дэниел G .; Фрэнсис, Ричард; Smales, К. Марк (2015-07-14). «Будущее идентификации белков клетки-хозяина (HCP) в процессе разработки и производства связано с управлением, основанным на оценке риска» . Биотехнология и биоинженерия . 112 (9): 1727–1737. DOI : 10.1002 / bit.25628 . ISSN 0006-3592 . PMC 4973824 . PMID 25998019 .   

Дальнейшее чтение [ править ]

  • Восьмой день творения: создатели революции в биологии . Книги Touchstone, ISBN 0-671-22540-5 . 2-е издание: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996 г. в мягкой обложке: ISBN 0-87969-478-5 .  
  • Миклас, Дэвид. 2003. Наука о ДНК: первый курс . Пресса Колд Спринг-Харбор: ISBN 978-0-87969-636-8 . 
  • Расмуссен, Николас , Джин-Жокеи: Наука о жизни и рост биотехнологического предприятия , Johns Hopkins University Press, (Балтимор), 2014 . ISBN 978-1-42141-340-2 . 
  • Розенфельд, Израиль. 2010. ДНК: графическое руководство по молекуле, которая потрясла мир . Издательство Колумбийского университета: ISBN 978-0-231-14271-7 . 
  • Шульц, Марк и Зандер Кэннон. 2009. Материал жизни: графическое руководство по генетике и ДНК . Хилл и Ван: ISBN 0-8090-8947-5 . 
  • Ватсон, Джеймс. 2004. ДНК: Секрет жизни . Случайный дом: ISBN 978-0-09-945184-6 . 

Внешние ссылки [ править ]

Библиотечные ресурсы о
рекомбинантных белках
  • Ресурсы в вашей библиотеке
  • Ресурсы в других библиотеках
  • Информационный бюллетень по рекомбинантной ДНК (из Университета Нью-Гэмпшира)
  • Плазмиды в дрожжах (информационный бюллетень Государственного университета Сан-Диего)
  • Анимация, иллюстрирующая создание рекомбинантной ДНК и продукцию чужеродного белка рекомбинантными бактериями
  • Исследование рекомбинантной ДНК в UCSF и коммерческое применение в Genentech Отредактированная стенограмма интервью 1994 года с Гербертом Бойером, проект «Живая история». Устная история.
  • Руководство по принципам и методам очистки рекомбинантных белков