Эффекторные нуклеазы, подобные активатору транскрипции ( TALEN ), представляют собой рестрикционные ферменты, которые могут быть сконструированы для разрезания определенных последовательностей ДНК. Их получают путем слияния эффекторного ДНК-связывающего домена TAL с доменом расщепления ДНК ( нуклеаза, разрезающая цепи ДНК). Эффекторы, подобные активаторам транскрипции (TALE), могут быть сконструированы для связывания практически с любой желаемой последовательностью ДНК, поэтому в сочетании с нуклеазой ДНК можно разрезать в определенных местах. [1] Рестрикционные ферменты могут быть введены в клетки для использования при редактировании генов или для редактирования генома in situ , метод, известный какредактирование генома с помощью инженерных нуклеаз . Наряду с нуклеазами «цинковые пальцы» и CRISPR / Cas9 , TALEN является важным инструментом в области редактирования генома .
TALE ДНК-связывающий домен
Эффекторы TAL - это белки, которые секретируются бактериями Xanthomonas через их систему секреции типа III, когда они заражают растения . [2] ДНК-связывающий домен содержит повторяющуюся высококонсервативную последовательность из 33–34 аминокислот с расходящимися 12-ю и 13-ю аминокислотами. Эти две позиции, называемые Repeat Variable Diresidue (RVD), очень вариабельны и показывают сильную корреляцию со специфическим распознаванием нуклеотидов . [3] [4] Эта прямая взаимосвязь между аминокислотной последовательностью и распознаванием ДНК позволила сконструировать специфические ДНК-связывающие домены путем выбора комбинации повторяющихся сегментов, содержащих соответствующие RVD. [1] Примечательно, что небольшие изменения в RVD и включение «нетрадиционных» последовательностей RVD могут улучшить специфичность нацеливания. [5]
Домен расщепления ДНК
Неспецифический домен расщепления ДНК на конце эндонуклеазы FokI можно использовать для конструирования гибридных нуклеаз , активных в дрожжевом анализе. [6] [7] Эти реагенты также активны в клетках растений [8] [9] и в клетках животных. [9] [10] [11] [12] Первоначальные исследования TALEN использовали домен расщепления FokI дикого типа, но в некоторых последующих исследованиях TALEN [11] [13] [14] также использовались варианты домена расщепления FokI с мутациями, предназначенными для улучшения расщепления. специфичность [15] [16] и активность расщепления. [17] Домен FokI функционирует как димер, требуя двух конструкций с уникальными ДНК-связывающими доменами для сайтов в целевом геноме с правильной ориентацией и промежутками. Как количество аминокислотных остатков между доменом связывания ДНК TALE и доменом расщепления FokI, так и количество оснований между двумя отдельными сайтами связывания TALEN, по-видимому, являются важными параметрами для достижения высоких уровней активности. [10] [18]
Инжиниринг TALEN constructs
Простая взаимосвязь между аминокислотной последовательностью и распознаванием ДНК связывающего домена TALE позволяет эффективно создавать белки. В этом случае искусственный синтез генов проблематичен из-за неправильного отжига повторяющейся последовательности, обнаруженной в связывающем домене TALE. [19] Одним из решений этого является использование общедоступной программы (DNAWorks [20] ) для расчета олигонуклеотидов, подходящих для сборки в двухэтапной ПЦР- сборке олигонуклеотидов с последующей амплификацией целого гена. Также сообщалось о ряде модульных схем сборки для создания инженерных конструкций TALE. [9] [19] [21] [22] [23] [24] Оба метода предлагают систематический подход к конструированию ДНК-связывающих доменов, который концептуально подобен модульному методу сборки для создания доменов узнавания ДНК цинкового пальца .
Трансфекция
После сборки конструкций TALEN их вставляют в плазмиды ; затем клетки-мишени трансфицируются плазмидами, генные продукты экспрессируются и попадают в ядро для доступа к геному. Альтернативно конструкции TALEN могут быть доставлены в клетки в виде мРНК, что исключает возможность геномной интеграции белка, экспрессирующего TALEN. Использование вектора мРНК также может резко повысить уровень гомологически направленной репарации (HDR) и успешность интрогрессии во время редактирования гена.
Редактирование генома
Механизмы
TALEN можно использовать для редактирования геномов, вызывая двухцепочечные разрывы (DSB), на которые клетки реагируют с помощью механизмов восстановления.
Негомологичное соединение концов (NHEJ) непосредственно лигирует ДНК с любой стороны двухцепочечного разрыва, где существует очень небольшое перекрытие последовательностей для отжига или оно отсутствует. Этот механизм репарации вызывает ошибки в геноме через инделки (вставки или делеции) или хромосомную перестройку; любые такие ошибки могут сделать генные продукты, закодированные в этом месте, нефункциональными. [10] Поскольку эта активность может варьироваться в зависимости от вида, типа клеток, используемого гена-мишени и нуклеазы, ее следует контролировать при разработке новых систем. Может быть проведен простой анализ гетеродуплексного расщепления, который обнаруживает любые различия между двумя аллелями, амплифицированными с помощью ПЦР. Продукты расщепления можно визуализировать на простых агарозных гелях или пластинчатых гелевых системах.
Альтернативно, ДНК может быть введена в геном через NHEJ в присутствии экзогенных двухцепочечных фрагментов ДНК. [10]
Гомологически направленная репарация также может вводить чужеродную ДНК в DSB, поскольку трансфецированные двухцепочечные последовательности используются в качестве матриц для ферментов репарации. [10]
Приложения
TALEN использовался для эффективной модификации геномов растений [25], создавая экономически важные продовольственные культуры с благоприятными питательными качествами. [26] Их также использовали для разработки инструментов для производства биотоплива . [27] Кроме того, он был использован для создания стабильно модифицированных эмбриональных стволовых клеток человека и индуцированных клонов плюрипотентных стволовых клеток (IPSC) и линий эритроидных клеток человека [11] [28] для создания нокаута C. elegans , [12] нокаута крысы , [13] мыши с нокаутом, [29] и рыбки данио с нокаутом . [14] [30] Кроме того, этот метод можно использовать для создания организмов, вызывающих нокаут. Wu et al. Получили крупный рогатый скот с нокаутом Sp110, используя никазы Талена для индукции повышенной устойчивости туберкулеза. [31] Этот подход также использовался для получения крыс с нокаутом с помощью микроинъекции мРНК TALEN в одноклеточные эмбрионы. [32]
TALEN также использовался экспериментально для исправления генетических ошибок, лежащих в основе болезни. [33] Например, он был использован в пробирке , чтобы исправить генетические дефекты , которые вызывают расстройства , такие как серповидно - клеточной анемии , [28] [34] пигментная ксеродерма , [35] и эпидермолиз буллезной . [36] Недавно было показано, что TALEN может быть использован в качестве инструмента, позволяющего использовать иммунную систему для борьбы с раком; TALEN-опосредованное нацеливание может генерировать Т-клетки, устойчивые к химиотерапевтическим препаратам и проявляющие противоопухолевую активность. [37] [38]
Теоретически геномная специфичность сконструированных слияний TALEN позволяет исправлять ошибки в отдельных генетических локусах посредством гомологически направленной репарации с правильной экзогенной матрицы. [33] В действительности, однако, применение TALEN in situ в настоящее время ограничено отсутствием эффективного механизма доставки, неизвестными иммуногенными факторами и неопределенностью в специфичности связывания TALEN. [33]
Еще одним новым применением TALEN является его способность сочетаться с другими инструментами геномной инженерии, такими как мегануклеазы . Область связывания ДНК эффектора TAL может быть объединена с доменом расщепления мегануклеазы для создания гибридной архитектуры, сочетающей легкость инженерии и высокоспецифичную активность связывания ДНК эффектора TAL с низкой частотой сайтов и специфичностью мегануклеазы. [39]
По сравнению с другими методами редактирования генома TALEN находится посередине по сложности и стоимости. В отличие от ZFN , TALEN распознает одиночные нуклеотиды. Гораздо проще спроектировать взаимодействия между ДНК-связывающими доменами TALEN и их целевыми нуклеотидами, чем создать взаимодействия с ZNF и их целевыми нуклеотидными триплетами. [40] С другой стороны, CRISPR полагается на образование рибонуклеотидного комплекса, а не на распознавание белок / ДНК. gRNA могут быть нацелены практически на любую последовательность в геноме, и их можно дешево производить, что делает CRISPR более эффективным и менее дорогим, чем TALEN и ZFN. TALEN в конечном итоге в 200 раз дороже, чем CRISPR, и на его выполнение требуется на несколько месяцев больше.
Точность эффекторной нуклеазы TAL
Нецелевое действие активной нуклеазы может приводить к нежелательным двухцепочечным разрывам и, следовательно, может приводить к хромосомным перестройкам и / или гибели клеток. Были проведены исследования для сравнения относительной токсичности, связанной с нуклеазами, доступных технологий. Основываясь на этих исследованиях [18] и максимальном теоретическом расстоянии между связыванием ДНК и нуклеазной активностью, считается, что конструкции TALEN обладают наибольшей точностью среди доступных в настоящее время технологий. [41]
Смотрите также
- Редактирование генома с помощью инженерных нуклеаз
- Нуклеаза цинкового пальца
- Мегануклеаза
- CRISPR
Рекомендации
- ^ a b Boch J (февраль 2011 г.). «СКАЗКИ о нацеливании на геном». Природа Биотехнологии . 29 (2): 135–6. DOI : 10.1038 / nbt.1767 . PMID 21301438 .
- ^ Бох Дж., Бонас Ю. (сентябрь 2010 г.). "Эффекторы Xanthomonas AvrBs3 типа III: открытие и функции". Ежегодный обзор фитопатологии . 48 : 419–36. DOI : 10.1146 / annurev-phyto-080508-081936 . PMID 19400638 .
- ^ Boch J, Scholze H, Schornack S, Landgraf A, Hahn S, Kay S, Lahaye T, Nickstadt A, Bonas U (декабрь 2009 г.). «Нарушение кода специфичности связывания ДНК эффекторов TAL-типа III». Наука . 326 (5959): 1509–12. Bibcode : 2009Sci ... 326.1509B . DOI : 10.1126 / science.1178811 . PMID 19933107 .
- ^ Москоу MJ, Богданов AJ (декабрь 2009 г.). «Простой шифр управляет распознаванием ДНК эффекторами TAL». Наука . 326 (5959): 1501. Bibcode : 2009Sci ... 326.1501M . DOI : 10.1126 / science.1178817 . PMID 19933106 .
- ^ Juillerat A, Pessereau C, Dubois G, Guyot V, Maréchal A, Valton J, Daboussi F, Poirot L, Duclert A, Duchateau P (январь 2015 г.). «Оптимизированная настройка специфичности TALEN с использованием нестандартных RVD» . Научные отчеты . 5 : 8150. Bibcode : 2015NatSR ... 5E8150J . DOI : 10.1038 / srep08150 . PMC 4311247 . PMID 25632877 .
- ^ Кристиан М., Чермак Т., Дойл Е.Л., Шмидт С., Чжан Ф., Хаммель А., Богданов А.Дж., Войтас Д.Ф. (октябрь 2010 г.). «Нацеливание на двухцепочечные разрывы ДНК с помощью эффекторных нуклеаз TAL» . Генетика . 186 (2): 757–61. DOI : 10.1534 / genetics.110.120717 . PMC 2942870 . PMID 20660643 .
- ^ Ли Т., Хуанг С., Цзян В.З., Райт Д., Сполдинг М.Х., Weeks DP, Ян Б. (январь 2011 г.). «Нуклеазы TAL (TALN): гибридные белки, состоящие из эффекторов TAL и домена расщепления ДНК FokI» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (1): 359–72. DOI : 10.1093 / NAR / gkq704 . PMC 3017587 . PMID 20699274 .
- ^ Махфуз М.М., Ли Л., Шамимуззаман М., Вибово А., Фанг X, Чжу Дж. К. (февраль 2011 г.). «Разработанная de novo гибридная нуклеаза, подобная активатору транскрипции (TALE), с новой специфичностью связывания ДНК создает двухцепочечные разрывы» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 108 (6): 2623–8. Bibcode : 2011PNAS..108.2623M . DOI : 10.1073 / pnas.1019533108 . PMC 3038751 . PMID 21262818 .
- ^ а б в Чермак Т., Дойл Е.Л., Кристиан М., Ван Л., Чжан Ю., Шмидт С., Баллер Дж. А., Сомия Н. В., Богданов А. Дж., Войтас Д. Ф. (июль 2011 г.). «Эффективный дизайн и сборка пользовательских TALEN и других эффекторных конструкций на основе TAL для нацеливания на ДНК» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (12): e82. DOI : 10.1093 / NAR / gkr218 . PMC 3130291 . PMID 21493687 .
- ^ а б в г д Miller JC, Tan S, Qiao G, Barlow KA, Wang J, Xia DF, Meng X, Paschon DE, Leung E, Hinkley SJ, Dulay GP, Hua KL, Ankoudinova I, Cost GJ, Urnov FD, Zhang HS, Holmes MC , Чжан Л., Грегори П.Д., Ребар Э.Д. (февраль 2011 г.). «СКАЗКА об архитектуре нуклеазы для эффективного редактирования генома». Природа Биотехнологии . 29 (2): 143–8. DOI : 10.1038 / nbt.1755 . PMID 21179091 .
- ^ а б в Хоккемейер Д., Ван Х., Киани С., Лай С.С., Гао К., Кэссиди Дж. П., Кост Дж. Дж., Чжан Л., Сантьяго Й., Миллер Дж. К., Цейтлер Б., Чероне Дж. М., Мэн Х, Хинкли С.Дж., Ребар Е.Дж., Грегори П.Д., Урнов Ф.Д. , Jaenisch R (июль 2011 г.). «Генетическая инженерия плюрипотентных клеток человека с использованием нуклеаз TALE» . Природа Биотехнологии . 29 (8): 731–4. DOI : 10.1038 / nbt.1927 . PMC 3152587 . PMID 21738127 .
- ^ а б Wood AJ, Lo TW, Zeitler B, Pickle CS, Ralston EJ, Lee AH, Amora R, Miller JC, Leung E, Meng X, Zhang L, Rebar EJ, Грегори П.Д., Урнов FD, Meyer BJ (июль 2011 г.). «Целевое редактирование генома между видами с использованием ZFN и TALEN» . Наука . 333 (6040): 307. Bibcode : 2011Sci ... 333..307W . DOI : 10.1126 / science.1207773 . PMC 3489282 . PMID 21700836 .
- ^ а б Тессон Л., Усал С., Менорет С., Люнг Е., Найлс Б.Дж., Реми С., Сантьяго Ю., Винсент А.И., Мэн Х, Чжан Л., Грегори П.Д., Анегон И., Стоимость ГДж (август 2011 г.). «Нокаутные крысы, полученные в результате микроинъекции эмбрионов TALEN» . Природа Биотехнологии . 29 (8): 695–6. DOI : 10.1038 / nbt.1940 . PMID 21822240 .
- ^ а б Хуан П., Сяо А., Чжоу М., Чжу З., Лин С., Чжан Б. (август 2011 г.). «Наследственное нацеливание гена у рыбок данио с использованием индивидуальных TALEN». Природа Биотехнологии . 29 (8): 699–700. DOI : 10.1038 / nbt.1939 . PMID 21822242 .
- ^ Дойон Й, Во Т.Д., Мендель М.С., Гринберг С.Г., Ван Дж., Ся Д.Ф., Миллер Дж. К., Урнов Ф. Д., Грегори П. Д., Холмс М.С. (январь 2011 г.). «Повышение активности нуклеазы цинкового пальца с улучшенной облигатной гетеродимерной архитектурой». Методы природы . 8 (1): 74–9. DOI : 10.1038 / nmeth.1539 . PMID 21131970 .
- ^ Щепек М., Брондани В., Бюхель Дж., Серрано Л., Сегал Д. Д., Катомен Т. (июль 2007 г.). «Модернизация интерфейса димеризации на основе структуры снижает токсичность нуклеаз типа« цинковые пальцы » (PDF) . Природа Биотехнологии . 25 (7): 786–93. DOI : 10.1038 / nbt1317 . PMID 17603476 .
- ^ Гуо Дж., Гадж Т., Барбас К.Ф. (июль 2010 г.). «Направленная эволюция расширенного и высокоэффективного домена расщепления FokI нуклеазами цинкового пальца» . Журнал молекулярной биологии . 400 (1): 96–107. DOI : 10.1016 / j.jmb.2010.04.060 . PMC 2885538 . PMID 20447404 .
- ^ а б Муссолино С., Морбитцер Р., Лютге Ф., Даннеманн Н., Лахайе Т., Катомен Т. (ноябрь 2011 г.). «Новый каркас нуклеазы TALE обеспечивает высокую активность редактирования генома в сочетании с низкой токсичностью» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (21): 9283–93. DOI : 10.1093 / NAR / gkr597 . PMC 3241638 . PMID 21813459 .
- ^ а б Чжан Ф., Конг Л., Лодато С., Косури С., Чёрч Г.М., Арлотта П. (февраль 2011 г.). «Эффективное конструирование последовательности-специфичных эффекторов TAL для модуляции транскрипции млекопитающих» . Природа Биотехнологии . 29 (2): 149–53. DOI : 10.1038 / nbt.1775 . PMC 3084533 . PMID 21248753 .
- ^ Гувер Д. (2012). «Использование DNAWorks в разработке олигонуклеотидов для синтеза генов на основе ПЦР». Синтез генов . Методы молекулярной биологии. 852 . С. 215–23. DOI : 10.1007 / 978-1-61779-564-0_16 . ISBN 978-1-61779-563-3. PMID 22328436 .
- ^ Морбитцер Р., Эльзэссер Дж., Хауснер Дж., Лахайе Т. (июль 2011 г.). «Сборка пользовательских ДНК-связывающих доменов TALE-типа путем модульного клонирования» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (13): 5790–9. DOI : 10.1093 / NAR / gkr151 . PMC 3141260 . PMID 21421566 .
- ^ Ли Т., Хуанг С., Чжао X, Райт Д.А., Карпентер С., Сполдинг М.Х., Weeks DP, Ян Б. (август 2011 г.). «Модульно собранные дизайнерские эффекторные нуклеазы TAL для целевого нокаута и замены генов у эукариот» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (14): 6315–25. DOI : 10.1093 / NAR / gkr188 . PMC 3152341 . PMID 21459844 .
- ^ Geissler R, Scholze H, Hahn S, Streubel J, Bonas U, Behrens SE, Boch J (2011). Шиу С. (ред.). «Активаторы транскрипции генов человека с программируемой ДНК-специфичностью» . PLOS ONE . 6 (5): e19509. Bibcode : 2011PLoSO ... 619509G . DOI : 10.1371 / journal.pone.0019509 . PMC 3098229 . PMID 21625585 .
- ^ Вебер Э, Грюцнер Р., Вернер С., Энглер С., Мариллонне С. (2011). Бендахман М (ред.). «Сборка дизайнерских эффекторов TAL методом клонирования Golden Gate» . PLOS ONE . 6 (5): e19722. Bibcode : 2011PLoSO ... 619722W . DOI : 10.1371 / journal.pone.0019722 . PMC 3098256 . PMID 21625552 .
- ^ Чжан Ю., Чжан Ф., Ли Х, Баллер Дж. А., Ци Й., Старкер К. Г., Богданов А. Дж., Войтас Д. Ф. (январь 2013 г.). «Эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции, обеспечивают эффективную инженерию генома растений» . Физиология растений . 161 (1): 20–7. DOI : 10.1104 / pp.112.205179 . PMC 3532252 . PMID 23124327 .
- ^ Хаун В., Коффман А., Класен Б.М., Деморест З.Л., Лоуи А., Рэй Е, Реттерат А., Стоддард Т., Джуллерат А., Седрон Ф., Матис Л., Войтас Д. Ф., Чжан Ф. (сентябрь 2014 г.). «Повышение качества соевого масла за счет целенаправленного мутагенеза семейства гена десатуразы жирных кислот 2» . Журнал биотехнологии растений . 12 (7): 934–40. DOI : 10.1111 / pbi.12201 . PMID 24851712 .
- ^ Дабусси Ф., Ледюк С., Марешал А., Дюбуа Дж., Гайо В., Перес-Мишо С., Амато А., Фальсиатор А., Жюльерат А., Бердели М., Войтас Д. Ф., Каварек Л., Дюшато П. (май 2014 г.). «Геномная инженерия расширяет возможности диатомовой водоросли Phaeodactylum tricornutum для биотехнологии» . Nature Communications . 5 : 3831. Bibcode : 2014NatCo ... 5.3831D . DOI : 10.1038 / ncomms4831 . PMID 24871200 .
- ^ а б Винерт Б., Фаннелл А. П., Нортон Л. Дж., Пирсон Р. К., Уилкинсон-Уайт Л. Е., Лестер К., Вадолас Дж., Портеус М. Х., Мэтьюз Дж. М., Куинлан К. Г., Кроссли М. (2015). «Редактирование генома для введения полезной природной мутации, связанной с повышенным содержанием глобина плода» . Nature Communications . 6 : 7085. Bibcode : 2015NatCo ... 6.7085W . DOI : 10.1038 / ncomms8085 . PMID 25971621 .
- ^ Дэвис Б., Дэвис Дж., Прис С., Пулияди Р., Шумска Д., Бхаттачарья С. (2013). «Сайт-специфическая мутация локуса Zic2 путем микроинъекции мРНК TALEN в мышиные ооциты CD1, C3H и C57BL / 6J» . PLOS ONE . 8 (3): e60216. Bibcode : 2013PLoSO ... 860216D . DOI : 10.1371 / journal.pone.0060216 . PMC 3610929 . PMID 23555929 .
- ^ Сандер Дж. Д., Кейд Л., Хайтер С., Рейон Д., Петерсон Р. Т., Джунг Дж. К., Йе Дж. Р. (август 2011 г.). «Направленное разрушение генов в соматических клетках рыбок данио с использованием сконструированных TALEN» . Природа Биотехнологии . 29 (8): 697–8. DOI : 10.1038 / nbt.1934 . PMC 3154023 . PMID 21822241 .
- ^ Ву Х, Ван И, Чжан И, Ян М, Ур Дж, Лю Дж, Чжан И (март 2015 г.). «Нокин SP110, опосредованный TALE никазой, наделяет крупный рогатый скот повышенной устойчивостью к туберкулезу» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 112 (13): E1530-9. Bibcode : 2015PNAS..112E1530W . DOI : 10.1073 / pnas.1421587112 . PMC 4386332 . PMID 25733846 .
- ^ Понсе де Леон V, Мерильят AM, Тессон Л., Анегон I, Хаммлер Э. (2014). «Создание TALEN-опосредованных нокаутом крыс GRdim путем гомологичной рекомбинации» . PLOS ONE . 9 (2): e88146. Bibcode : 2014PLoSO ... 988146P . DOI : 10.1371 / journal.pone.0088146 . PMC 3921256 . PMID 24523878 .
- ^ а б в Карлсон Д.Ф., Фаренкруг СК, Хакетт ПБ (январь 2012 г.). «Нацеливание на ДНК пальцами и таленами» . Молекулярная терапия. Нуклеиновые кислоты . 1 (3): e3. DOI : 10.1038 / mtna.2011.5 . PMC 3381595 . PMID 23344620 .
- ^ Рамалингам С., Анналуру Н., Кандавелу К., Чандрасегаран С. (2014). «TALEN-опосредованное создание и генетическая коррекция индуцированных заболеванием плюрипотентных стволовых клеток человека». Современная генная терапия . 14 (6): 461–72. DOI : 10.2174 / 1566523214666140918101725 . PMID 25245091 .
- ^ Dupuy A, Valton J, Leduc S, Armier J, Galetto R, Gouble A, Lebuhotel C, Stary A, Pâques F, Duchateau P, Sarasin A, Daboussi F (2013). «Направленная генная терапия клеток пигментной ксеродермы с использованием мегануклеазы и TALEN ™» . PLOS ONE . 8 (11): e78678. Bibcode : 2013PLoSO ... 878678D . DOI : 10.1371 / journal.pone.0078678 . PMC 3827243 . PMID 24236034 .
- ^ Осборн М.Дж., Старкер К.Г., МакЭлрой А.Н., Уэббер Б.Р., Риддл М.Дж., Ся Л., ДеФео А.П., Габриэль Р., Шмидт М., фон Калле С., Карлсон Д.Ф., Мадер М.Л., Джунг Дж.К., Вагнер Дж.Э., Войтас Д.Ф., Блазар Б.Р., Толар J (июнь 2013 г.). «Генная коррекция буллезного эпидермолиза на основе TALEN» . Молекулярная терапия . 21 (6): 1151–9. DOI : 10.1038 / mt.2013.56 . PMC 3677309 . PMID 23546300 .
- ^ Валтон Дж., Гайо В., Марешаль А., Филхол Дж. М., Джульерат А., Дюклер А., Дюшато П., Пуаро Л. (сентябрь 2015 г.). «Разработанная CAR T-клетка с множественной лекарственной устойчивостью для аллогенной комбинированной иммунотерапии» . Молекулярная терапия . 23 (9): 1507–18. DOI : 10.1038 / mt.2015.104 . PMC 4817890 . PMID 26061646 .
- ^ Пуаро Л., Филип Б., Шиффер-Манниуи С., Ле Клерр Д., Шион-Сотинель I, Дерниам С., Потрел П., Бас С., Лемер Л., Галетто Р., Лебуотель С, Эйкем Дж., Чунг Г. В., Дюклер А., Губль А., Арноулд С., Пеггс К., Пуле М., Шаренберг А.М., Смит Дж. (Сентябрь 2015 г.). "Платформа для производства мультиплексных геномных Т-клеток для" готовой "адоптивной Т-клеточной иммунотерапии" . Исследования рака . 75 (18): 3853–64. DOI : 10.1158 / 0008-5472.CAN-14-3321 . PMID 26183927 .
- ^ Буассель С., Джарджур Дж., Астрахань А., Адей А., Губл А., Дюшато П., Шендур Дж., Стоддард Б. Л., Черто М. Т., Бейкер Д., Шаренберг А. М. (февраль 2014 г.). «MegaTALs: архитектура нуклеаз с редким расщеплением для терапевтической геномной инженерии» . Исследования нуклеиновых кислот . 42 (4): 2591–601. DOI : 10.1093 / NAR / gkt1224 . PMC 3936731 . PMID 24285304 .
- ^ «Плюсы и минусы ZFNS, TALENS, CRISPR / CAS» . Лаборатория Джексона . Март 2014 г.
- ^ Больоли, Эльси; Ричард, Магали. «Бостонская консалтинговая группа - Отчет о точности редактирования генов» (PDF) .
Внешние ссылки
- E-TALEN.org Комплексный инструмент для дизайна TALEN
- Молекула месяца PDB Запись в ежемесячном структурном обзоре Protein Database