Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Мазок крови с пятном Гимзы . Лейкоциты (в центре) в окружении красных кровяных телец .

Окрашивание по Романовскому , также известное как окрашивание по Романовскому – Гимзе , является прототипом метода окрашивания , который был предшественником нескольких различных, но похожих красителей, широко используемых в гематологии (исследование крови) и цитопатологии (исследование больных клеток). Пятна Романовского-типа используются для дифференциации клеток для микроскопического исследования в патологических образцах, особенно кровь и костный мозг пленок, [1] , и для обнаружения паразитов , таких как малярия в крови. [2] [3] [4] [5]Пятна, которые связаны с пятнами типа Романовского или образованы от них, включают пятна Гимзы , Дженнера , Райта , Филда , Мая – Грюнвальда и Лейшмана . Метод окрашивания назван в честь русского врача Дмитрия Леонидовича Романовского (1861–1921), который был одним из первых, кто осознал его возможность использования в качестве пятна крови. [6]

Механизм [ править ]

Ценность окрашивания по Романовскому заключается в его способности воспроизводить широкий диапазон оттенков, что позволяет легко дифференцировать клеточные компоненты. Это явление называется эффектом Романовского или, в более общем смысле, метахромазией . [7]

Эффект Романовского [ править ]

Мазок крови, окрашенный по Гимзе, показывает плазмодий (в центре изображения), паразита, вызывающего малярийные инфекции.

В 1891 году Романовскому [8] [9] [10] разработали пятно с использованием смеси эозином (обычно эозина Y ) и в возрасте растворов метиленового синего , которые образуются оттенки unattributable для одних компонентов окрашивания: отличительные оттенки фиолетового в хроматина из ядро клетки и гранулы цитоплазмы некоторых белых кровяных телец. Это стало известно как эффект Романовского или Романовского-Гимзы. [11] [12] [6] [13] [4] Эозин и чистый метиленовый синий по отдельности (или в комбинации) не вызывают эффекта Романовского, [13] [4]и активные красители, которые производят этот эффект, теперь считаются лазурью B и эозином. [14] [3] [13]

Полихромированный метиленовый синий [ править ]

Пятна типа Романовского могут быть получены либо из комбинации чистых красителей, либо из метиленового синего, который подвергся окислительному деметилированию , что приводит к расщеплению метиленового синего на множество других пятен, некоторые из которых необходимы для создания эффекта Романовского. . [15] [4] Метиленовый синий, который подвергся окислительному процессу, известен как «полихромированный метиленовый синий». [15] [4] Полихромированный метиленовый синий может содержать до 11 красителей, включая метиленовый синий , лазурный A , лазурный B, лазурный C, тионин , метиленовый фиолетовый Бернтезен, метилтионолин и тионолин. [4]Точный состав полихромированного метиленового синего зависит от используемого метода, и даже партии красителя от одного производителя могут различаться по составу. [15]

Хотя было показано, что азур B и эозин являются необходимыми компонентами для создания эффекта Романовского [14] [3] [13], эти красители в их чистых формах не всегда использовались при составлении окрашивающих растворов. [4] Первоначальные источники лазурного B (одного из продуктов окисления метиленового синего) были из растворов полихромированного метиленового синего, которые были обработаны окислителями или подверглись естественному старению в случае Романовского. [3] [13] Эрнст Малаховский в 1891 году был первым, кто целенаправленно применил полихромный метиленовый синий для окраски по типу Романовского. [15] [16]

Типы [ править ]

Май-Грюнвальд-Гимза [ править ]

Основная статья: Пятно Мая – Грюнвальда

Окрашивание по Май-Грюнвальду-Гимзе представляет собой двухэтапную процедуру, которая включает в себя первое окрашивание красителем Мая-Грюнвальда, которое не дает эффекта Романовского, а затем окрашивание красителем Гимза, которое действительно дает эффект Романовского. [17]

Пятна Райта и Райта-Гимзы [ править ]

Основная статья: пятно Райта

Пятно Райта можно использовать отдельно или в сочетании с пятном Гимзы, которое известно как пятно Райта-Гимзы. [1] Пятно Райта названо в честь Джеймса Гомера Райта, который в 1902 году [18] опубликовал метод с использованием тепла для производства полихромированного метиленового синего, который сочетается с эозином Y. [19] [20] [21] [1] Полихромированный метилен синий соединяется с эозином и осаждается с образованием эозината, который повторно растворяется в метаноле . [4] Добавление Гимзы к окраске Райта увеличивает яркость «красновато-пурпурного» цвета цитоплазматических гранул. [1] [21]Пятна Райта и Райта-Гимзы - это два из пятен типа Романовского, которые широко используются в Соединенных Штатах и ​​в основном используются для окрашивания крови и пленок костного мозга. [21] [1]

Пятно Лейшмана [ править ]

Основная статья: пятно Лейшмана

В 1901 году Уильям Лейшман [22] разработал пятно, похожее на пятно Луи Дженнера, но с заменой чистого метиленового синего на полихромированный метиленовый синий. [19] [15] [4] Краситель Лейшмана получают из эозината полихромированного метиленового синего и эозина Y с использованием метанола в качестве растворителя. [4]

Пятно Гимзы [ править ]

Основная статья: пятно Гимзы

Краситель Гимза состоит из «Azure II» и эозина Y с метанолом и глицерином в качестве растворителя. [15] «Лазурный II» считается смесью лазурного B (который Гимза назвал «лазурным I») и метиленового синего, хотя точный состав «лазурного I» считается коммерческой тайной. [4] [15] Сопоставимые составы с использованием известных красителей опубликованы и коммерчески доступны. Окраска по Гимзе считается стандартной окраской для обнаружения и идентификации малярийного паразита. [5]

Клиническое значение [ править ]

Патология крови и костного мозга [ править ]

Образец бронхоальвеолярного лаважа, окрашенный Diff-Quik , коммерческим вариантом окраски по Романовскому, широко используемым в цитопатологии

Краски по типу Романовского широко используются при исследовании крови в виде мазков крови , а также при микроскопическом исследовании биоптатов костного мозга и мазков аспирата. [1] [23] Исследование крови и костного мозга может иметь важное значение при диагностике различных заболеваний крови. [1] [23] В Соединенных Штатах широко используются варианты окраски по методу Романовского по Райту и Райту-Гимзе [1], в то время как в Европе обычно применяется окраска по Гимзе. [1]

Обнаружение малярии и других паразитов [ править ]

Из красок типа Романовского окраска Гимзы особенно важна для обнаружения и идентификации малярийных паразитов в образцах крови . [5] [15] Тесты на обнаружение антигена малярии являются альтернативой окрашиванию и микроскопическому исследованию мазков крови для выявления малярии. [5]

Использование в цитопатологии [ править ]

Окрашивание по типу Романовского также используется для окрашивания цитопатологических образцов, таких как образцы, полученные из тонкоигольных аспиратов и спинномозговой жидкости из люмбальных проколов . [24]

История [ править ]

Дмитрий Леонидович Романовский (1861-1921).

Несмотря на то, что существуют споры о том, кто заслуживает похвалы за этот общий метод окрашивания, популярное использование приписывает его Дмитрию Леонидовичу Романовскому. [14] [16] [19]

В 1870-х годах Пауль Эрлих использовал смесь кислотных и основных красителей, включая кислый фуксин (кислотный краситель) и метиленовый синий (основной краситель), для исследования мазков крови. [25] [26] [27] [28] [16] В 1888 году Чеслав Иванович Чензинский использовал метиленовый синий, но заменил кислотный фуксин, используемый Эрлихом, на эозин. [14] [27] [28] Комбинация красителей Чензинского была способна окрасить малярийного паразита (представителя рода Plasmodium ). [28] [19]Пятна ни Эрлиха, ни Чензинского не производили эффекта Романовского, так как метиленовый синий, который они использовали, не был полихромированным. [16]

Дмитрий Романовский в 1890 году опубликовал предварительные результаты своего окрашивания крови (комбинация старого метиленового синего и эозина), в том числе результаты, полученные при нанесении на инфицированную малярию кровь. [6] Это использование полихромированного метиленового синего отличало окраску Романовского (и последующие составы) от красок Эрлиха и Чензинского, которым не хватало пурпурного оттенка, связанного с эффектом Романовского. [16] Публикация Романовского 1890 года не включала описание того, как он модифицировал свой раствор метиленового синего, [6] [16], но в своей докторской диссертации 1891 года он описал метиленовый синий, который лучше всего использовался после того, как на поверхности начала образовываться плесень. [6] [16]Помимо использования выдержанного раствора метиленового синего, окраска по Романовскому была основана на технике окрашивания Чензинского. [16] Использование Романовским своего метода для изучения патазита малярии было связано с постоянным интересом к его методу окрашивания. [26]

Эрнст Малаховский

Эрнсту Малаховскому приписывают независимое наблюдение того же сочетания пятен, что и Дмитрию Романовскому в 1891 году, [6] [13], хотя ему также приписывают то, что он первым сделал это. [16] [19] Малаховский был первым, кто использовал намеренно полихромированный раствор метиленового синего, [15] что Малаховский добился путем добавления буры к окрашивающей смеси. [16] Сообщается, что Малаховский продемонстрировал пятно 15 июня 1890 года и в том же году опубликовал статью, «описывающую его публичную демонстрацию». [19] Оба метода Романовского и Малаховского были способны окрашивать ядро ицитоплазма от малярии паразита , когда до этого момента пятно не использовало бы только цветные цитоплазму. [19]

Густав Гимза .

В 1899 году Луи Леопольд Дженнер разработал более стабильную версию красителя метиленового синего и эозина, собрав осадок , образующийся в смесях на водной основе, и повторно растворив его в метаноле . [28] [15] [4] Пятна по типу Романовского, приготовленные из собранных осадков, иногда называют эозинатами . [4] Помимо увеличения стабильности окраски, использование метанола в окраске Дженнера имело эффект фиксации образцов крови [4], хотя версия окраски Дженнера не дает эффекта Романовского. [28] [19] [15]

Ричард Мэй и Людвиг Грюнвальд в 1892 году опубликовали версию пятна (теперь известную как пятно Мая-Грюнвальда ), которая аналогична версии, предложенной Дженнером в 1899 году, и также не вызывает эффекта Романовского. [28] [19] [15]

В 1901 году и Карл Рейтер, и Уильям Лейшман [22] разработали пятна, которые сочетали в себе использование Луи Дженнера спирта в качестве растворителя и использование Малаховским полихромированного метиленового синего. [19] [15] [4] пятно Рейтера отличается от Дженнер при помощи этилового спирта вместо метанола, и Leishman отличалась от Дженнер, используя эозином B вместо эозина Y . [19] [4]

Джеймс Гомер Райт в 1902 г. опубликовал [18] метод с использованием тепла для полихромирования метиленового синего, который он объединил с эозином Y. Этот метод известен как окрашивание Райта . [19] [20]

Имя Густава Гимзы также стало ассоциироваться с пятном, так как ему приписывают публикацию полезной рецептуры и протокола в 1902 году. [13] [6] [26] Гимза попытался использовать комбинации чистых красителей, а не полихромированные растворы метиленового синего, которые очень высокоэффективны. переменная по составу. [20] [19] [15] Гимза продал права на производство своего красителя, но так и не опубликовал полностью подробностей о том, как он его создал, [19] хотя считается, что он использовал комбинацию лазурного B и метиленового синего. [15] Гимза опубликовал ряд модификаций своих пятен между 1902 и 1934 годами. В 1904 году [29]он предложил добавить в пятно глицерин вместе с метанолом, чтобы повысить его стабильность. [23] [19]

Порошки красителя Giemsa, произведенные в Германии, широко использовались в Соединенных Штатах до прекращения поставок во время Первой мировой войны , что привело к более широкому использованию метода Джеймса Гомера Райта для полихромирования метиленового синего. [19] [1]

См. Также [ править ]

  • Пятно Лю
  • Тесты на обнаружение антигена малярии
  • Пятно Папаниколау
  • Окрашивание (биология)

Ссылки [ править ]

  1. ^ Б с д е е г ч я J Theil, Karl S. (2012). «Обработка костного мозга и нормальная морфология». Практика лабораторной гематологии . С. 279–299. DOI : 10.1002 / 9781444398595.ch22 . ISBN 9781444398595.
  2. ^ Бэйн, Барбара Дж .; Бейтс, Имельда; Лаффан, Майк А. (11 августа 2016 г.). «Глава 4: Методы приготовления и окрашивания мазков крови и костного мозга». Дейси и Льюис Практическая гематология (12-е изд.). Elsevier Health Sciences. ISBN 978-0-7020-6925-3.
  3. ^ a b c d Горобин, RW (2011). «Как работают пятна Романовского и почему они остаются ценными, включая предлагаемый универсальный механизм окрашивания Романовского и рациональную схему устранения неполадок». Биотехника и гистохимия . 86 (1): 36–51. DOI : 10.3109 / 10520295.2010.515491 . ISSN 1052-0295 . 
  4. ^ a b c d e f g h i j k l m n o p Маршалл, П. Н. (1978). «Пятна по Романовскому в гематологии». Гистохимический журнал . 10 (1): 1-29. DOI : 10.1007 / BF01003411 . PMID 74370 . 
  5. ^ а б в г Ли, Цигуй; Weina, Питер Дж .; Миллер, Р. Скотт (2012). «Анализ малярии». Практика лабораторной гематологии . С. 626–637. DOI : 10.1002 / 9781444398595.ch48 . ISBN 9781444398595.
  6. ^ Б с д е е г Безруков, А. В. (2017). «Окраска по Романовскому, эффект Романовского и размышления о научном приоритете». Биотехника и гистохимия . 92 (1): 29–35. DOI : 10.1080 / 10520295.2016.1250285 . ISSN 1052-0295 . 
  7. ^ Рибатти, Доменико (2018). «Окрашивание тучных клеток: исторический обзор» . Международный архив аллергии и иммунологии . 176 (1): 55–60. DOI : 10.1159 / 000487538 . ISSN 1018-2438 . 
  8. ^ Романовский Д.Л. (1890). "Къ вопросу о строении чужеядныхъ малярiи". Врачъ . 52 : 1171–1173.
  9. ^ Романовский Д.Л. К вопросу о паразитологи и терапии болотной лихорадки. Диссертация на степень доктора медицины. Спб. 1891 г., 118 с.
  10. ^ Романовский D (1891). "Zur Frage der Parasitologie und Therapie der Malaria". Санкт-Петербург Med Wochenschr . 16 : 297–302, 307–315.
  11. ^ Horobin RW, Вальтер KJ (1987). «Понимание окраски по Романовскому. I: Эффект Романовского-Гимзы в мазках крови» . Гистохимия . 86 (3): 331–336. DOI : 10.1007 / bf00490267 . PMID 2437082 . 
  12. ^ Woronzoff-Дашков KK. (2002). «Пятно Райта-Гимзы. Секреты раскрыты» . Clin Lab Med . 22 (1): 15–23. DOI : 10.1016 / S0272-2712 (03) 00065-9 . PMID 11933573 . 
  13. ^ Б с д е е г Wittekind, DH (1983). «О природе окрашивания по Романовскому-Гимасу и его значению для цитохимии и гистохимии: общий взгляд». Гистохимический журнал . 15 (10): 1029–1047. DOI : 10.1007 / BF01002498 . ISSN 0018-2214 . 
  14. ^ а б в г Кукси, CJ (2017). «Причуды номенклатуры красителей. 8. Метиленовый синий, лазурный и фиолетовый». Биотехника и гистохимия . 92 (5): 347–356. DOI : 10.1080 / 10520295.2017.1315775 . ISSN 1052-0295 . 
  15. ^ a b c d e f g h i j k l m n o Лилли, Ральф Дугалл (1977). Биологические пятна HJ Конна (9-е изд.). Балтимор: Уильямс и Уилкинс. с. 692 с.
  16. ^ Б с д е е г ч я J Лилли, RD (1978). «Романовский-Малаховский окрашивает так называемое Романовское пятно: использование Малаховского 1891 года щелочного полихромированного метиленового синего для лечения малярийных плазмодий». Пятновая технология . 53 (1): 23–28. DOI : 10.3109 / 10520297809111439 .
  17. ^ Piaton, E .; Fabre, M .; Губен-Версини, I .; Bretz-Grenier, MF .; Courtade-Saïdi, M .; Винсент, S .; Belleannée, G .; Thivolet, F .; Boutonnat, J .; Debaque, H .; Fleury-Feith, J .; Vielh, P .; Egelé, C .; Bellocq, JP; Michiels, JF .; Кочанд-Приоллет Б. (октябрь 2016 г.). «Рекомендации по окрашиванию Мая-Грюнвальда-Гимзы в гематологической и негинекологической цитопатологии: рекомендации Французского общества клинической цитологии (SFCC) и Французской ассоциации обеспечения качества в анатомической и цитологической патологии (AFA». Цитопатология . 27 (5) ). 359-368 DOI : 10.1111 / cyt.12323 .
  18. ^ а б Райт JH (1902). «Быстрый метод дифференциального окрашивания пленок крови и малярийных паразитов» . J Med Res . 7 (1): 138–144. PMC 2105822 . PMID 19971449 .  
  19. ^ Б с д е е г ч я J к л м п о р Krafts, КП; Hempelmann, E; Олексин, Б.Дж. (2011). «Фиолетовый цвет: от королевской семьи к лаборатории, с извинениями перед Малаховски». Биотехника и гистохимия . 86 (1): 7–35. DOI : 10.3109 / 10520295.2010.515490 . ISSN 1052-0295 . 
  20. ^ a b c Гейтенби, JB; Балки, HW (1950). Vade-Mecum микротомиста (11-е изд.). Филадельфия: Компания Blackstone.
  21. ^ a b c Воронцов-Дашкофф К.К. (2002). «Пятно Райта-Гимзы. Секреты раскрыты» . Clin Lab Med . 22 (1): 15–23. DOI : 10.1016 / S0272-2712 (03) 00065-9 . PMID 11933573 . 
  22. ^ a b Leishman W (1901). «Заметка о простом и быстром способе получения окраски по Романовскому на малярийных и других пленках крови» . Br , J Med . 2 (2125): 757–758. DOI : 10.1136 / bmj.2.2125.757 . PMC 2507168 . PMID 20759810 .  
  23. ^ a b c Петерсон, Пауэрс; Макнил, Шейла; Гулати, Джин (2012). «Клеточно-морфологический анализ периферической крови». Практика лабораторной гематологии . С. 10–25. DOI : 10.1002 / 9781444398595.ch2 . ISBN 9781444398595.
  24. ^ Крафтс, КП; Pambuccian, SE (2011). «Окрашивание по Романовскому в цитопатологии: история, преимущества и ограничения». Биотехника и гистохимия . 86 (2): 82–93. DOI : 10.3109 / 10520295.2010.515492 . ISSN 1052-0295 . 
  25. ^ Эрлих P (1880). "Methodologische Beiträge zur Physiologie und Pathologie der Verschiedenen Formen der Leukocyten" (PDF) . Z Klin Med . 1 : 553–560. Архивировано из оригинального (PDF) 19 июля 2011 года.
  26. ^ a b c Bracegirdle, Brain (1986). История микротома: эволюция микротома и разработка тканевых препаратов (2-е изд.). Линкольнвуд, Иллинойс: ISBN Science Heritage Ltd. 978-0940095007.
  27. ^ a b Крафтс, Кристина; Хемпельманн, Эрнст; Олексин, Барбара Дж. (2011). «В поисках малярийного паразита». Паразитологические исследования . 109 (3): 521–529. DOI : 10.1007 / s00436-011-2475-4 . ISSN 0932-0113 . 
  28. ^ a b c d e f Воронцов-Дашкофф, Кристин Полин Крафтс (1993). "Пятно Эрлиха-Чензинского-Плен-Малаховского-Романовского-Нохт-Дженнер-Мэй-Грюнвальд-Лейшман-Рейтер-Райт-Гимза-Лилли-Роу-Уилкокс: тайна раскрывается". Клиники лабораторной медицины . 13 (4): 759–771. DOI : 10.1016 / S0272-2712 (18) 30406-2 . ISSN 0272-2712 . 
  29. ^ Гимза G (1904). "Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung". Centralbl F Bakt Etc . 37 : 308–311.