Тест-полоска мочи

Тест-полоска мочи
Тест-полоска Multistix для анализа мочи с цветной шкалой производителя.
Цель	определить патологические изменения

Анализ мочи полоса или щуп является основным диагностическим инструментом , используемым для определения патологических изменений в пациенте с мочой в стандартном анализе мочи . ^[1]

Стандартная тест-полоска мочи может содержать до 10 различных химических подушечек или реагентов, которые вступают в реакцию (меняют цвет) при погружении в образец мочи , а затем при удалении из него . Тест часто можно прочитать всего через 60–120 секунд после погружения, хотя для некоторых тестов требуется больше времени. Регулярное исследование мочи с помощью многопараметрических полосок - это первый шаг в диагностике широкого спектра заболеваний. Анализ включает тестирование на наличие белков , глюкозы , кетонов , гемоглобина , билирубина , уробилиногена , ацетона , нитрита илейкоциты, а также тестирование pH и удельного веса или для тестирования на инфекцию различными патогенами. ^[2]

Тест-полоски состоят из ленты из пластика или бумаги шириной около 5 миллиметров , пластиковые полоски имеют подушечки, пропитанные химическими веществами, которые вступают в реакцию с соединениями, присутствующими в моче, с получением характерного цвета. В случае бумажных полос реагенты впитываются непосредственно на бумагу. Бумажные полоски часто предназначены для одной реакции (например, измерения pH), в то время как полоски с подушечками позволяют проводить несколько определений одновременно. ^[2]

Существуют полоски, которые служат для разных целей, например, качественные полоски, которые только определяют, является ли образец положительным или отрицательным, или полуколичественные полоски, которые в дополнение к положительной или отрицательной реакции также обеспечивают оценку количественного результата в в последнем случае цветовые реакции приблизительно пропорциональны концентрации исследуемого вещества в образце. ^[2] Считывание результатов осуществляется путем сравнения цветов прокладки с цветовой шкалой, предоставленной производителем, дополнительное оборудование не требуется. ^[3]

Этот тип анализа очень распространен при контроле и мониторинге пациентов с диабетом. ^[2] Время, необходимое для появления результатов теста на полоске, может варьироваться от нескольких минут после теста до 30 минут после погружения полоски в мочу (в зависимости от марки используемого продукта).

Полуколичественные значения обычно представлены как: след, 1+, 2+, 3+ и 4+; хотя тесты также можно оценить в миллиграммах на децилитр. Автоматические считыватели тест-полосок также предоставляют результаты с использованием единиц Международной системы единиц . ^[2]

Метод испытания [ править ]

Метод тестирования заключается в том, что тест-полоска полностью погружается в хорошо перемешанный образец мочи на короткий период времени, затем извлекается из контейнера и удерживает край полоски над горловиной контейнера для удаления излишков мочи. Затем полоску оставляют на время, необходимое для возникновения реакций (обычно 1-2 минуты), и, наконец, появившиеся цвета сравнивают с хроматической шкалой, предоставленной производителем.

Неправильный метод может привести к ложным результатам, например, лейкоциты и эритроциты осаждаются на дне контейнера и могут быть не обнаружены, если образец не перемешан должным образом, и точно так же, если избыток мочи остается на полоске после он был удален из тестового образца, может вызвать утечку реагентов с подушечек на соседние подушечки, что приведет к смешиванию и искажению цветов. Чтобы этого не произошло, рекомендуется просушить края полоски на впитывающей бумаге. ^[2]

Реакции на обобщенные тесты [ править ]

pH [ править ]

Легкие и почки являются основными регуляторами кислотно-щелочного баланса организма. Баланс поддерживается за счет контролируемой экскреции кислых водородов в виде ионов аммиака , моногидрированного фосфата , слабых органических кислот и за счет реабсорбции бикарбоната через клубочковую фильтрацию в извитых канальцах нефрона. PH мочи обычно колеблется от 4,5 до 8, при этом первая моча, производимая утром, обычно более кислая, а моча, образующаяся после еды, обычно более щелочная. ^[4]Нормальные контрольные значения pH мочи не приводятся, так как разброс слишком велик, и результаты необходимо рассматривать в контексте других количественных параметров. ^[4]

Определение pH мочи преследует две основные цели: диагностическую и лечебную. С одной стороны, он предоставляет информацию о балансе между кислотой и щелочью у пациента и позволяет идентифицировать вещества, которые присутствуют в моче в кристаллической форме. С другой стороны, при некоторых заболеваниях пациенту необходимо поддерживать pH мочи в определенных узких пределах, чтобы способствовать устранению химиотерапевтических агентов, избегать осаждения солей, которые способствуют образованию камней в почках, или для облегчения контроль мочевой инфекции. Регулирование диеты в основном контролирует pH мочи, хотя и с помощью лекарств можно контролировать его. Рационы, богатые животными белками, имеют тенденцию к образованию кислой мочи, тогда как диеты, в основном состоящие из овощей, имеют тенденцию к образованию щелочной мочи.^[4]

Коммерческие бренды измеряют pH с шагом 0,5 или 1 единицы pH в диапазоне от 5 до 9. Чтобы различать pH в этом широком диапазоне, обычно используют двойную индикаторную систему, включающую метиловый красный и бромтимоловый синий . ^[5] Метиловый красный вызывает изменение цвета с красного на желтый в диапазоне pH от 4 до 6, а бромтимоловый синий изменяется с желтого на синий при pH от 6 до 9. В диапазоне от 5 до 9 полосы показывают цвета, которые меняются с оранжевого. при pH 5, переход от желтого и зеленого до темно-синего при pH 9. ^[6]

Удельный вес [ править ]

Одна из важных функций почек - реабсорбировать воду после клубочковой фильтрации. Сложный процесс реабсорбции обычно является одной из первых функций почек, на которую влияет болезнь. Удельный вес мочи является мерой ее плотности по сравнению с H ₂ O и зависит от количества и плотности растворенных веществ (молекулы с большей массой на единицу объема увеличивают показатель удельного веса). Не следует путать измерение удельного веса с измерением осмотической концентрации , которая больше связана с количеством частиц, чем с их массой. ^[7]

Тест-полоска мочи на удельный вес основан на изменении константы диссоциации (pK _a ) анионного полиэлектролита (поли- (метилвиниловый эфир / малеиновый ангидрид)) в щелочной среде, которая ионизируется и выделяет ионы водорода пропорционально количество катионов, присутствующих в растворе. ^[6] Чем выше концентрация катионов в моче, тем больше ионов водорода выделяется, тем самым снижая pH. Прокладка также содержит бромтимоловый синий, который измеряет это изменение pH. ^{[6] [8]}Следует помнить, что тест-полоска измеряет только концентрацию катионов, поэтому возможно, что моча с высокой концентрацией неионных растворенных веществ (таких как глюкоза или мочевина) или с соединениями с высокой молекулярной массой (например, среда, используемая для получения рентгенографических данных). контраст) даст результат, который будет ошибочно ниже, чем измеренный денситометрией. Цвета варьируются от темно-синего при значении 1.000 до желтого при значении 1.030. ^{[8] [9]}

1. В щелочной среде
   Полиэлектролит-H _n + Катионы ^{n +} → Полиэлектролит-Катионы + nH ⁺
2. В щелочной среде
   H ⁺ + Бромтимоловый синий _(Синий) → Бромтимоловый синий-H ⁺ _{(Желтый)}

Повышенные концентрации белка приводят к несколько завышенным результатам удельной плотности из-за ошибки индикатора в отношении белка; Кроме того, образцы с pH выше 6,5 дают более низкие показания из-за смещения индикатора. По этой причине производители рекомендуют добавлять 5 единиц к показанию удельного веса, если pH больше 6,5. ^[8]

Кровь [ править ]

Кровь может присутствовать в моче либо в виде интактных эритроцитов (гематурия), либо в виде продукта разрушения эритроцитов, гемоглобина (гемоглобинурия). Присутствие крови в большом количестве можно определить визуально. Гематурия производит мутную красную мочу, а гемоглобинурия проявляется в виде прозрачного красного образца. Клинически значимым считается любое количество крови, превышающее пять клеток на микролитр мочи; нельзя полагаться на визуальный осмотр для определения наличия крови. Микроскопическое исследование мочевого осадка показывает неповрежденные эритроциты, но свободный гемоглобин, образующийся в результате гемолитических нарушений или лизиса эритроцитов, не обнаруживается. Поэтому химические тесты на гемоглобин являются наиболее точным средством определения наличия крови. Как только кровь будет обнаружена,микроскопическое исследование можно использовать для дифференциации гематурии и гемоглобинурии.

В химических тестах крови используется псевдопероксидазная активность гемоглобина, чтобы катализировать реакцию между гемовым компонентом гемоглобина и миоглобина и хромогеном (вещество, которое приобретает цвет после химической реакции) тетраметилбензидином с образованием окисленного хромогена, имеющего зелено-синий цвет. цвет. Производители полосок с реагентами добавляют пероксид и тетраметилбензидин в зону анализа крови. Предоставляются две цветные диаграммы, соответствующие реакциям, возникающим при гемоглобинурии, миоглобинурии и гематурии (эритроциты). В присутствии свободного гемоглобина / миоглобина на подушечке появляется однородный цвет, варьирующийся от отрицательного желтого через зеленый до сильно положительного зелено-синего. Напротив, неповрежденные эритроциты лизируются при контакте с подушечкой,а высвободившийся гемоглобин вызывает изолированную реакцию, которая приводит к пятнистому рисунку на подушечке. Тесты с полосками с реагентами могут определять такие низкие концентрации, как пять эритроцитов на микролитр; тем не менее, следует соблюдать осторожность при сравнении этих цифр с фактическими микроскопическими значениями, потому что впитывающая природа подушечки притягивает часть мочи. Термины трассировка, малый, средний и большой (или трассировка, 1+, 2+ и 3+) используются для отчетов.

Могут наблюдаться ложноположительные реакции из-за менструального загрязнения. Они также возникают, если в емкости с образцом присутствуют сильные окисляющие детергенты. Растительная пероксидаза и бактериальные ферменты, включая Escherichia coliпероксидаза, также может вызывать ложноположительные реакции. Поэтому отложения, содержащие бактерии, следует тщательно проверять на наличие красных кровяных телец. Традиционно аскорбиновая кислота (витамин С) связана с ложноотрицательными реакциями на полосках с реагентами для крови. И Multistix, и Chemstrip модифицировали свои полоски с реагентами, чтобы уменьшить это вмешательство до очень высоких уровней аскорбиновой кислоты, а Chemstrip покрывает подушку для реагентов сеткой, пропитанной йодатом, которая окисляет аскорбиновую кислоту до того, как она достигнет реакционной площадки. Ложноотрицательные реакции могут возникнуть, если моча с высоким удельным весом содержит зубчатые эритроциты, которые не лизируются при контакте с подушечкой для реагента.Снижение реактивности также может наблюдаться при использовании формалина в качестве консерванта или при наличии лекарства от гипертонии каптоприла или высокой концентрации нитрита. Эритроциты оседают на дно контейнера с образцом, и отсутствие перемешивания образца перед тестированием приводит к ложному заниженному показанию.^[10]

Выявленные заболевания [ править ]

С помощью обычных обследований можно выделить первые четыре группы симптомов:

• Заболевания почек и мочевыводящих путей
• Нарушения углеводного обмена (сахарный диабет)
• Заболевания печени и гемолитические расстройства
• Мочевые инфекции

Мочевыводящие пути [ править ]

Параметры скрининга: многие заболевания почек и мочевыводящих путей могут протекать бессимптомно в течение длительного периода времени. Регулярный анализ мочи рекомендуется в качестве основного, но фундаментального шага в выявлении повреждения почек и / или заболеваний мочевыводящих путей на ранней стадии, особенно в группах высокого риска, таких как диабетики , гипертоники , афроамериканцы , полинезийцы и лица с семейным анамнезом . ^[11]

Специфические заболевания почек и мочевыводящих путей, которые можно идентифицировать, включают: хроническое заболевание почек , гломерулонефрит , протеинурию и гематурию .

Тестирование белка [ править ]

Из обычных химических тестов, проводимых с мочой, наиболее показательным для почечной недостаточности является определение белка. Протеинурия часто связана с ранним заболеванием почек, поэтому анализ белка в моче является важной частью любого медицинского обследования. Нормальная моча содержит очень мало белка, обычно менее 100–300 мг / л или 100 мг за 24 часа. Этот белок состоит в основном из низкомолекулярных белков сыворотки, которые были отфильтрованы клубочками, и белков, продуцируемых в мочеполовых путях. Из-за своей низкой молекулярной массы альбумин является основным сывороточным белком, обнаруживаемым в плазме, нормальное содержание альбумина в моче низкое, поскольку большая часть альбумина, представленного в клубочках, не фильтруется, а большая часть фильтруемого альбумина реабсорбируется канальцами.Другие белки включают небольшие количества сывороточных и канальцевых микроглобулинов. Уромодулин продуцируется эпителиальными клетками почечных канальцев и белками простатического, семенного и вагинального секретов. Уромодулин обычно вырабатывается в дистальной извитой трубке и образует матрицу слепков.

Традиционный тест полоски с реагентами на белок использует принцип ошибки индикатора белка для получения видимой колориметрической реакции. Вопреки общему мнению, что индикаторы дают определенный цвет в ответ на определенные уровни pH, некоторые индикаторы меняют цвет в присутствии белка, даже если pH среды остается постоянным. Это происходит потому, что белок принимает ионы водорода от индикатора. Тест более чувствителен к альбумину, потому что альбумин содержит больше аминогрупп, способных принимать ионы водорода, чем другие белки. В зависимости от производителя белковая часть полоски содержит разные химические вещества. Multistix содержит тетрабромфеноловый синий, а Chemstrip содержит 3 ', 3 ”, 5', 5” -тетрахлорфенол, 3,4,5,6-тетрабромсульфонфталеин. Оба содержат кислотный буфер для поддержания постоянного уровня pH.При уровне pH 3 оба индикатора выглядят желтыми в отсутствие белка. Однако по мере увеличения концентрации белка цвет меняется на различные оттенки зеленого и, наконец, на синий. Показания представлены в виде отрицательных, следовых, 1+, 2+, 3+ и 4+ или полуколичественных значений 30, 100, 300 или 2000 мг / дл, соответствующих каждому изменению цвета. Считается, что следовые значения составляют менее 30 мг / дл. Интерпретация показаний следа может быть затруднена.Считается, что следовые значения составляют менее 30 мг / дл. Интерпретация показаний следа может быть затруднена.Считается, что следовые значения составляют менее 30 мг / дл. Интерпретация показаний следа может быть затруднена.^[12]

Основной источник ошибок с реактивными полосками возникает из-за сильно забуференной щелочной мочи, которая перекрывает кислотную буферную систему, вызывая повышение pH и изменение цвета, не связанное с концентрацией белка. Точно так же техническая ошибка, связанная с тем, что подушечка с реагентом остается в контакте с мочой в течение длительного периода, может удалить буфер. Ложноположительные показания получаются, когда реакция не происходит в кислых условиях. Сильно пигментированная моча и загрязнение контейнера соединениями четвертичного аммония, детергентами и антисептиками также вызывают ложноположительные результаты. Ложноположительное считывание следа может происходить в образцах с высоким удельным весом.

Тестирование гемоглобина и миоглобина [ править ]

Из всех обычно проверяемых параметров наличие крови в моче наиболее тесно связано с травматическим повреждением почек или мочеполовых путей. Наиболее частыми причинами гематурии являются: нефролитиаз , гломерулярная болезнь, опухоли , пиелонефрит , воздействие нефротоксинов и лечение антикоагулянтами . Непатологическая гематурия может наблюдаться после физических нагрузок и во время менструации . Нормальное количество красных кровяных телец в моче обычно не должно превышать 3 на поле высокого увеличения. ^[13]

Тест-полоска мочи, показывающая положительный результат на кровь, также может указывать на гемоглобинурию , которую невозможно обнаружить с помощью микроскопа из-за лизиса эритроцитов в мочевыводящих путях (особенно в щелочной или разбавленной моче) или внутрисосудистого гемолиза . В нормальных условиях образование комплексов гаптоглобин- гемоглобин предотвращает клубочковую фильтрацию, но при обширном гемолизе способность поглощения гаптоглобина превышается, и гемоглобин может появиться в моче. Гемоглобинурия может быть вызвана гемолитической анемией, переливанием крови, обширными ожогами , укусом паука-отшельника (Loxosceles), инфекциями и физическими упражнениями.

Тест-полоска мочи для крови основана на активности псевдопероксидазы гемоглобина в катализе реакции между пероксидом водорода и тетраметилбензидином хромогена с образованием темно-синего продукта окисления. ^{[6] [13]} результирующий цвет может варьироваться от зеленого до темно-синего в зависимости от количества гемоглобина. ^[13]

• Катализируется гемоглобином, действующим как пероксидаза
  H ₂ O ₂ + Хромоген → Окисленный хромоген (окрашенный) + H ₂ O
  Реакция не только катализируется гемоглобином крови, другие глобины с гем-группой, такие как миоглобин, также могут катализировать ту же реакцию. ^[13]

Присутствие миоглобина в моче дает положительную реакцию в анализе крови тест-полоски, но моча кажется прозрачной, от красного до коричневого цвета. Присутствие миоглобина вместо гемоглобина может быть вызвано патологиями, связанными с мышечным повреждением ( рабдомиолизом ), такими как травма , синдром раздавливания , длительная кома, судороги , прогрессирующая мышечная атрофия , алкоголизм , злоупотребление героином и тяжелые физические нагрузки.

Гемовая фракция этих белков токсична для почечных канальцев, а повышенные концентрации могут вызвать острое повреждение почек .

Можно использовать тест осаждения сульфата аммиака, чтобы отличить гемоглобинурию от миоглобинурии. Он состоит из добавления 2,8 г сульфата аммиака к 5 мл центрифугированной мочи, тщательного перемешивания и через 5 минут фильтрации образца и повторного центрифугирования. Гемоглобин осаждается с сульфатом аммиака, но не с миоглобином. Анализ супернатанта на кровь с помощью тест-полоски даст положительный результат, если присутствует миоглобин, и отрицательный, если присутствует гемоглобин.

Тест может дать ложноположительные результаты, если на лабораторном материале, использованном для анализа, присутствуют остатки сильного окислителя или перекиси. ^[13]

Углеводные расстройства [ править ]

• Глюкоза - определяется как гликозурия
• Кетоны - определяется как кетонурия (см. Также кетоацидоз и кетоз )

Около 30–40% диабетиков I типа и около 20% диабетиков II типа вовремя страдают от нефропатии, поэтому раннее распознавание диабета имеет большое значение для дальнейшего состояния здоровья этих пациентов.

Специфические нарушения углеводного обмена, которые можно идентифицировать, включают сахарный диабет , глюкозурию и кетонурию .

Тест на глюкозу [ править ]

В нормальных условиях почти вся глюкоза, удаленная из клубочков, реабсорбируется в проксимальных извитых канальцах. Если уровень глюкозы в крови повышается, как это происходит при сахарном диабете, способность извитых канальцев реабсорбировать глюкозу превышается (эффект, известный как порог реабсорбции почек ). Для глюкозы этот порог составляет 160–180 мг / дл. Концентрации глюкозы у разных людей различаются, и у здорового человека может быть преходящая глюкозурия после еды с высоким содержанием сахаров; поэтому наиболее репрезентативные результаты получены на образцах, взятых по крайней мере через два часа после еды.

Определение глюкозы с помощью тест-полосок основано на ферментативной реакции глюкозооксидазы . Этот фермент катализирует окисление глюкозы кислородом воздуха с образованием D-глюконо-δ-лактона и перекиси водорода . Вторая связанная реакция, опосредованная пероксидазой , катализирует реакцию между пероксидом и хромогеном (вещество, которое приобретает цвет после химической реакции) с образованием окрашенного соединения, указывающего на концентрацию глюкозы. ^[6]

• 1) Катализируется глюкозооксидазой
  Глюкоза + O ₂ → D-глюконо-δ-лактон + H ₂ O ₂

• 2) Катализируется пероксидазой
  H ₂ O ₂ + Хромоген → Окисленный хромоген (окрашенный) + H ₂ O

Эта реакция специфична для глюкозы, как и все ферментативные реакции, но она может давать ложноположительные результаты из-за присутствия следов сильных окислителей или перекиси из дезинфицирующих средств, используемых в лабораторных приборах. ^[6]

Кетонный тест [ править ]

Термин кетоны или кетоновые тела в действительности относится к трем промежуточным продуктам метаболизма жирных кислот ; ацетон , ацетоуксусная кислота и бета-гидроксимасляная кислота . Повышенные концентрации кетонов обычно не обнаруживаются в моче, так как все эти вещества полностью метаболизируются, производя энергию, углекислый газ и воду. Однако нарушение углеводного обмена может привести к метаболическому дисбалансу и появлению кетонов как побочного продукта метаболизма жировых запасов организма.

Повышение метаболизма жиров может быть результатом голодания или мальабсорбции , неспособности метаболизировать углеводы (как это происходит, например, при диабете) или из-за потерь от частой рвоты.

Контроль уровня кетонов в моче особенно полезен при лечении и мониторинге сахарного диабета 1 типа . Кетонурия свидетельствует о дефиците инсулина, что указывает на необходимость регулирования его дозировки. Повышение концентрации кетона в крови вызывает водно-электролитный дисбаланс , обезвоживание и, если его не исправить, ацидоз и, в конечном итоге, диабетическую кому .

Три кетоновых соединения появляются в моче в разных пропорциях, хотя эти пропорции относительно постоянны в разных образцах, поскольку и ацетон, и бета-гидроксимасляная кислота производятся из ацетоуксусной кислоты. Пропорции: 78% бета-гидроксимасляная кислота, 20% ацетоуксусная кислота и 2% ацетон.

Тест, используемый в тест-полосках мочи, основан на реакции нитропруссида натрия (нитроферрицианида). В этой реакции ацетоуксусная кислота в щелочной среде реагирует с нитропруссидом натрия, образуя комплекс пурпурного цвета: ^{[6] [14]}

• Na ₂ [Fe (CN) ₅ NO] + CH ₃ COCH ₂ COOH + 2Na (OH) → Na ₄ [Fe (CN) ₅ -N = CHCOCH ₂ COOH] _{(пурпурный)} + H ₂ O
• Нитропруссид натрия + уксусная кислота + щелочная среда → розово-пурпурный комплекс + вода

Тест не измеряет бета-гидроксимасляную кислоту, и он слабо чувствителен к ацетону при добавлении глицина в реакцию. Однако, поскольку эти соединения являются производными ацетоуксусной кислоты, их существование можно предположить, и поэтому отдельный тест не требуется. Те лекарства, которые содержат сульфгидрильные группы, такие как меркаптоэтансульфонат Na ( Mesna ), а также каптоприл и L-DOPA, могут давать атипичную окраску. Ложноотрицательный результат может быть получен в образцах, которые не хранились надлежащим образом из-за улетучивания и бактериального разложения.

Заболевания печени и крови [ править ]

При многих заболеваниях печени у пациентов часто появляются признаки патологии только на поздней стадии. Ранняя диагностика позволяет своевременно принять соответствующие терапевтические меры, избегая косвенного ущерба и дальнейших инфекций.

Специфические заболевания печени и гемолитические нарушения, которые можно идентифицировать, включают заболевание печени (сопровождающееся желтухой ), цирроз , уробилиногенурию и билирубинурию .

Тест на билирубин [ править ]

Билирубин - это сильно пигментированное соединение, которое является побочным продуктом деградации гемоглобина. Гемоглобин, который высвобождается после того, как система мононуклеарных фагоцитов (расположенная в печени и селезенке ) выводит старые эритроциты из кровообращения, распадается на его компоненты; железо , протопорфирин и белок . Клетки системы превращают протопорфирин в неконъюгированный билирубин, который проходит через систему кровообращения в связке с белком, особенно с альбумином. Почки не могут отфильтровать этот билирубин, поскольку он связан с белком, однако он конъюгирован с глюкуроновой кислотой.в печени с образованием водорастворимого конъюгированного билирубина. Этот конъюгированный билирубин обычно не появляется в моче, так как он выводится непосредственно из кишечника с желчью . Кишечные бактерии восстанавливают билирубин до уробилиногена , который позже окисляется и выводится либо с фекалиями в виде стеркобилина, либо с мочой в виде уробилина .

Конъюгированный билирубин появляется в моче, когда нормальный цикл деградации изменяется из-за непроходимости желчных протоков или когда функциональная целостность почек нарушена. Это обеспечивает выход конъюгированного билирубина в кровоток, как это происходит при гепатите и циррозе печени ).

Обнаружение билирубина в моче является ранним признаком заболевания печени, и его наличие или отсутствие может использоваться для определения причин клинической желтухи .

Желтуха, вызванная ускоренным разрушением эритроцитов, не вызывает билирубинурии, так как высокий уровень билирубина в сыворотке находится в неконъюгированной форме, и почки не могут его вывести.

В тест-полосках используется реакция диазотирования для обнаружения билирубина. Билирубин соединяется с солью диазония (2,4-дихлоранилин или 2,6-дихлорбензолдиазоний-тетрафторборат) в кислой среде с образованием азокрасителя с окраской от розового до фиолетового: ^[6]

• В кислой среде
  Глюкуронид билирубина + соль диазония → Азокраситель (фиолетовый)

Ложноположительные реакции могут быть из - за необычные пигменты в моче (например, желтоватые оранжевое Phenazopyridine метаболитов, Indican и метаболиты препарата Lodine ( Etodolac )). Ложноотрицательные результаты также могут давать плохо хранящиеся образцы, поскольку билирубин является светочувствительным и подвергается фотоокислению до биливердина при воздействии света, или может происходить гидролиз глюкуронида с образованием свободного билирубина, который менее реактивен. ^[6]

Тест на уробилиноген [ править ]

Кишечные бактерии превращают конъюгированный билирубин, который выводится желчными протоками в кишечник, в уробилиноген и стеркобилиноген . Часть уробилиногена реабсорбируется в кишечнике, а затем циркулирует с кровью в печени, где и выводится. Небольшая часть этого рециркулирующего уробилиногена отфильтровывается почками и выводится с мочой (менее 1 мг / дл). Стеркобилиноген не может реабсорбироваться и остается в кишечнике. ^{[15] [16]}

Любое ухудшение функции печени снижает ее способность перерабатывать рециркулирующий уробилиноген. ^[15] Избыток, который остается в крови, выводится почками и выводится с мочой. Когда возникают гемолитические расстройства, количество неконъюгированного билирубина, присутствующего в крови, увеличивается, вызывая увеличение выведения конъюгированного билирубина печенью, что приводит к увеличению количества уробилиногена, что в свою очередь вызывает увеличение реабсорбции, рециркуляции и почечной экскреции. ^{[15] [16]}

Реакции на тест-полоску различаются в зависимости от производителя, но на самом деле наиболее часто используются две реакции. Некоторые производители используют реакцию Эрлиха (1), в которой уробилиноген реагирует с п-диметиламинобензальдегидом ( реагент Эрлиха ), чтобы получить цвет от светло-до темно-розового. Другие производители используют реакцию диазосочетания (2), в которой используется 4-метоксибензолдиазоний-тетрафторборат для получения цветов от белого до розового. Последняя реакция более специфична. ^[17]

• (1) Реакция на Multistix (в кислой среде)
  Уробилиноген + п-диметиламинобензальдегид → Красный краситель

• (2) Реакция на Chemstrip (в кислой среде)
  Уробилиноген + 4-метоксибензолдиазоний-тетрафторборат → Красный азокраситель

Ряд веществ мешают реакции Эрлиха на полоске Multistix: порфобилиноген, индикан, п-аминосалициловая кислота, сульфонамид, метилдопа, прокаин и хлорпромазин. Тест следует проводить при комнатной температуре, поскольку чувствительность реакции возрастает с увеличением температуры. Плохо хранящиеся образцы могут дать ложноотрицательные результаты, поскольку уробилиноген подвергается фотоокислению до уробилина, который не вступает в реакцию. Формальдегид, используемый в качестве консерванта, дает ложноотрицательные результаты в обеих реакциях. ^[16]

Мочевые инфекции [ править ]

Могут быть выявлены инфекции мочевыводящих путей, включая бактериурию и пиурию .

Тест на нитриты [ править ]

Тест на нитриты - это быстрый метод скрининга на возможные бессимптомные инфекции, вызванные нитратредуцирующими бактериями. Некоторые виды грамотрицательных бактерий, которые чаще всего вызывают инфекции мочевыводящих путей ( Escherichia coli , Enterobacter , Klebsiella , Citrobacter и Proteus ), содержат ферменты, которые восстанавливают содержание нитратов в моче до нитритов. ^[18] Этот тест представляет собой быстрый скрининг на возможные инфекции кишечными бактериями, но он не заменяет ни анализ мочи, ни микроскопическое исследование в качестве диагностических инструментов, ни последующий мониторинг, как многие другие микроорганизмы, не снижающие содержание нитратов (грамположительные бактерии и дрожжи) также могут вызывать инфекции мочевыводящих путей. ^{[19] [20]}

Реактивные полоски обнаруживают нитрит с помощью реакции Грисса, в которой нитрит реагирует в кислой среде с ароматическим амином (пара-арсаниловая кислота или сульфаниламид) с образованием соли диазония, которая, в свою очередь, реагирует с тетрагидробензохинолином с образованием розового азокрасителя. . ^{[6] [20]}

• 1) В кислой среде
  Пара-арсаниловая кислота или сульфаниламид + NO^-
  ₂ → Соль диазония

• 2) В кислой среде
  Соль диазония + тетрагидробензохинолин → Розовый азокраситель

Нитритный тест не особенно надежен, и отрицательные результаты при наличии клинических симптомов не редкость, а это означает, что тест не следует рассматривать как окончательный. Отрицательные результаты могут быть получены в присутствии микроорганизмов, не восстанавливающих нитраты. Нитритредуцирующие бактерии должны оставаться в контакте с нитратами достаточно долго, чтобы производить определяемые количества (первая моча выделяется утром или, по крайней мере, при задержке мочи на 4 часа). Большое количество бактерий может восстанавливать нитрит до азота, что дает ложноотрицательный результат. Использование антибиотиков подавляет метаболизм бактерий, вызывая отрицательные результаты, даже если бактерии присутствуют. Кроме того, некоторые вещества, такие как аскорбиновая кислота, будут конкурировать с реакцией Грейсса, давая нерепрезентативно низкие значения. ^[6][20]

Тест на лейкоциты [ править ]

Нормальным является обнаружение до 3 (иногда 5) лейкоцитов на поле высокого увеличения (40X) в образце мочи, у женщин результаты несколько выше из-за вагинального заражения. Более высокие числа указывают на инфекцию мочевыводящих путей. Тест-полоска мочи на лейкоциты выявляет лейкоцитарную эстеразу, которая присутствует в азурофильных гранулах моноцитов и гранулоцитов ( нейтрофильных , эозинофильных и базофильных ). Бактерии, лимфоциты и эпителиальные клетки мочеполовых путей не содержат эстераз. ^[21]Нейтрофильные гранулоциты - лейкоциты, наиболее часто связанные с инфекциями мочевыводящих путей. Положительный тест на лейкоцитарную эстеразу обычно указывает на присутствие бактерий и положительный тест на нитриты (хотя это не всегда так). Инфекции, вызванные трихомонадами , хламидиозами и дрожжами, вызывают лейкоцитурию без бактериурии. Воспаление почечных тканей ( интерстициальный нефрит ) может вызвать лейкоцитурию, в частности токсический интерстициальный нефрит с преобладанием эозинофилов. ^[21]

Тест на лейкоцитарную эстеразу является чисто ориентировочным и не должен использоваться исключительно для диагностики, поскольку он не заменяет микроскопические исследования или исследования посева мочи. ^[19]

Реакция тест-полоски мочи основана на действии эстеразы лейкоцитов, катализирующей гидролиз сложного эфира индолкарбоновой кислоты. Высвобождающийся индоксил соединяется с солью диазония с образованием азольного красителя фиолетового цвета. ^[21]

• 1) Реакция, катализируемая лейкоцитарной эстеразой
  Сложный эфир индолкарбоновой кислоты → Индоксил + кислота

• 2) В кислой среде
  Индоксил + соль диазония → Фиолетовый азольный краситель

Для прохождения реакции эстеразы требуется около 2 минут. Присутствие сильных окислителей или формальдегида может вызвать ложные срабатывания. Ложноотрицательные результаты связаны с повышенными концентрациями белка (более 500 мг / дл), глюкозы (более 3 г / дл), щавелевой кислоты и аскорбиновой кислоты . Моча с высоким удельным весом также может вызывать образование зубцов лейкоцитов, что может препятствовать высвобождению эстераз. ^[22]

Предел обнаружения [ править ]

Предел обнаружения теста - это концентрация, при которой тест начинает превращаться из отрицательного в положительный. Хотя предел обнаружения может варьироваться в разных образцах мочи, предел обнаружения определяется как концентрация аналита, которая приводит к положительной реакции в 90% исследованных мочи.

^[23]

Медицинское использование [ править ]

Тест-полоски для анализа мочи могут использоваться во многих сферах медицинской помощи, включая скрининг при рутинных обследованиях, мониторинг лечения, самоконтроль пациентов и / или общую профилактическую медицину.

Скрининг [ править ]

Тест-полоски мочи используются для скрининга как в больницах, так и в общей практике. Целью скрининга является раннее выявление вероятных пациентов путем обследования больших групп населения. Важность скрининга на диабет и заболевание почек среди групп высокого риска становится очень высокой.

Мониторинг лечения [ править ]

Мониторинг лечения с помощью тест-полосок мочи позволяет врачу проверить результаты назначенной терапии и, при необходимости, внести какие-либо изменения в курс терапии.

Самоконтроль [ править ]

Самоконтроль с помощью тест-полосок мочи под руководством специалиста в области здравоохранения является эффективным методом мониторинга состояния болезни. Это особенно относится к диабетикам , для которых идея самоконтроля метаболического статуса (определение глюкозы и кетонов) очевидна.

Ветеринария [ править ]

В ветеринарии, особенно у кошек и собак, тест-полоска может использоваться для анализа мочи.

История [ править ]

Во многих культурах моча когда-то считалась мистической жидкостью, а в некоторых культурах она считается таковой и по сей день. Его использование включает заживление ран, стимуляцию защитных сил организма и исследования для диагностики наличия заболеваний.

Лишь в конце 18 века врачи, интересующиеся химией, обратили свое внимание на научные основы анализа мочи и его использование в практической медицине.

• 1797 г. - Карл Фридрих Гертнер (1772–1850) выразил желание найти простой способ проверки мочи на наличие болезней у постели больного. ^[24]
• 1797 г. - Уильям Камберленд Круикшанк (1745–1800) впервые описал свойство коагуляции при нагревании, проявляющееся во многих мочах.
• 1827 г. - английский врач Ричард Брайт описывает клинический симптом нефрита в «Отчетах о медицинских случаях».
• 1840 г. - Появление химической диагностики мочи, направленной на выявление патологических компонентов мочи.
• 1850 г. - парижский химик Жюль Момене (1818–1898) создает первые «тест-полоски», пропитывая полоску мериносовой шерсти «протохлоридом олова» (хлорид олова). При нанесении капли мочи и нагревании над свечой полоска сразу же становилась черной, если моча содержала сахар.
• 1883 г. - английский физиолог Джордж Оливер (1841–1915) продает свои «Анализы мочи».
• ок. 1900 - Реагентная бумага становится коммерчески доступной в химической компании Helfenberg AG.
• 1904 г. - Стал известен тест на наличие крови влажно-химическим методом с использованием бензидина.
• ок. 1920 - Венский химик Фриц Фейгл (1891–1971) публикует свою методику « точечного анализа ».
• 1930-е годы - Диагностика мочи значительно прогрессирует, поскольку повышается надежность, а выполнение тестов становится все проще.
• 1950-е годы - полоски для анализа мочи в том смысле, в котором они используются сегодня, были впервые произведены в промышленных масштабах и предложены на коммерческой основе.
• 1964 - Компания Boehringer Mannheim , ныне Roche , выпустила первые тест-полоски Combur.

Несмотря на то, что тест-полоски мало изменились по внешнему виду с 1960-х годов, теперь они содержат ряд инноваций. Новые методы пропитки, более стабильные цветовые индикаторы и постоянное улучшение градаций цвета - все это способствовало тому, что использование тест-полосок для анализа мочи в настоящее время вошло в клиническую и общую практику в качестве надежного диагностического инструмента. Предлагаемое меню параметров неуклонно расширялось за прошедшие десятилетия.

Вмешательство аскорбиновой кислоты [ править ]

Известно, что аскорбиновая кислота (витамин С) препятствует реакции окисления крови и уровня глюкозы на обычных тест-полосках мочи. Некоторые тест-полоски для анализа мочи защищены от воздействия йодата, который удаляет аскорбиновую кислоту путем окисления. ^[25] Некоторые тест-полоски содержат тест на аскорбат в моче.

Мочевой осадок [ править ]

Во время обычного скрининга, если выявляется положительный тест на лейкоциты, кровь, белок, нитриты и pH больше 7, осадок мочи анализируется под микроскопом для дальнейшего точного диагноза.

Автоматические анализаторы [ править ]

Автоматический анализ тест-полосок мочи с использованием автоматических анализаторов тест-полосок является широко распространенной практикой в ​​современном анализе мочи. Они могут измерять кальций , кровь, глюкозу, билирубин, уробилиноген, кетоны, лейкоциты, креатинин , микроальбумин , pH, аскорбиновую кислоту и белок. ^[26]

Ссылки [ править ]

Дальнейшее чтение [ править ]

• Краткий анализ мочи: Общий анализ мочи с тест-полосками. Д-р EF Hohenberger, д-р H Kimling (2002) http://www.diavant.com/diavant/servlet/MDBOutput?fileId=1392
• Стрэзингер, Сьюзен К .; Ди Лоренцо Шауб, Марджори (2008). «5» . Análisis de orina y de los líquidos corporales (на испанском языке) (5-е изд.). Редакция Panamericana. С. 56–57. ISBN 978-950-06-1938-7. Проверено 14 марта 2012 года .
• Графф, Лорин (1987). «2» . Análisis de orina - Цвет Атласа (на испанском языке) (1-е изд.). Эд. Médica Panamericana. п. 60. ISBN 978-950-06-0841-1. Проверено 14 марта 2012 года .
• Wein, Alan J .; Кавусси, Луи Р .; Новик, Эндрю С .; Партин, Алан У .; Питерс, Крейг А. (2007). «3» . Кэмпбелл-Уолш Урология (на испанском языке) (9-е изд.). От редакции Médica Panamericana. п. 104. ISBN 978-950-06-8268-8. Проверено 14 марта 2012 года .
• Инструкции по использованию полосок для анализа мочи