Из Википедии, бесплатной энциклопедии
  (Перенаправлен из группы крови )
Перейти к навигации Перейти к поиску

Тестирование совместимости крови
Определение группы крови методом ручной пробирки - положительный тип O.jpg
О положительная группа крови определяется пробирным методом. Слева направо: эритроциты пациента не агглютинируют с реагентами анти-A и анти-B, но агглютинируют с реагентом анти-D. Плазма пациента агглютинирует эритроциты типа A1 и B.
ЦельВыявление несовместимости между группами крови
ИспытаниеЭритроциты ; плазма крови
MedlinePlus003345
eMedicine1731198
LOINC34532-2 , 883–9 , 10331-7

Тестирование на совместимость крови проводится в медицинской лаборатории для выявления возможной несовместимости между отдельными лицами и донора крови «s типы крови , что может произойти в переливании крови . Он также используется для диагностики и предотвращения некоторых осложнений беременности, которые могут возникнуть, если у ребенка группа крови, отличная от группы крови матери. Тестирование на совместимость крови включает определение группы крови , которое определяет антигены в красных кровяных тельцах, которые определяют группу крови человека; тестирование на неожиданные антитела к антигенам группы крови ( скрининг и идентификация антител); и, в случае переливания крови, смешивание плазмы реципиента с эритроцитами донора для обнаружения несовместимости ( перекрестное сопоставление ). Регулярное типирование крови включает определение типа ABO и RhD (резус-фактор) [примечание 1] и включает как идентификацию антигенов ABO в эритроцитах (прямое группирование), так и идентификацию антител ABO в плазме (обратное группирование). Другие антигены группы крови могут быть проверены в конкретных клинических ситуациях.

В тестах на совместимость с кровью обычно используются реакции между антигенами группы крови и антителами - в частности, способность антител вызывать слипание красных кровяных телец, когда они связываются с антигенами на поверхности клетки, явление, называемое агглютинацией . Методы, основанные на реакциях антиген-антитело, называются серологическими методами, и доступно несколько таких методов, от ручного тестирования с использованием пробирок или предметных стекол до полностью автоматизированных систем. Типы крови также можно определить с помощью генетического тестирования , которое используется, когда присутствуют условия, мешающие серологическому тестированию, или когда требуется высокая степень точности идентификации антигена.

Некоторые условия могут привести к ложным или неубедительным результатам при тестировании на совместимость крови. Когда эти проблемы влияют на набор текста ABO, они называются несоответствиями ABO . Несоответствия по системе ABO должны быть исследованы и устранены до того, как будет сообщена группа крови человека. Другие источники ошибок включают феномен « слабого D », при котором люди, положительные по антигену RhD, демонстрируют слабые или отрицательные реакции при тестировании на RhD, а также наличие антител к иммуноглобулину G в эритроцитах, что может мешать скринингу антител. , перекрестное сопоставление и типирование некоторых антигенов группы крови.

Медицинское использование [ править ]

Проверка совместимости крови обычно проводится перед переливанием крови . Полный процесс тестирования совместимости включает типирование ABO и RhD (Rh-фактор); скрининг на антитела к другим системам крови ; и перекрестное сопоставление , которое включает тестирование плазмы крови реципиента по сравнению с эритроцитами донора в качестве окончательной проверки на несовместимость. Если обнаруживается неожиданное антитело группы крови, требуется дальнейшее тестирование для идентификации антитела [3] : 740 и подтверждения того, что донорская кровь отрицательна на соответствующий антиген. [1] : 261Серологическое сопоставление может быть опущено, если результаты анализа на антитела у реципиента отрицательны, в анамнезе нет клинически значимых антител и их тип ABO / Rh подтвержден по историческим записям или по второму образцу крови; а в экстренных случаях кровь может быть перелита до получения каких-либо результатов тестирования на совместимость. [1] : 262–3

Тестирование совместимости крови также обычно проводится беременным женщинам и пуповинной крови новорожденных, потому что несовместимость подвергает ребенка риску развития гемолитической болезни новорожденного. [4] [5] Он также используется перед трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток , поскольку несовместимость групп крови может быть причиной некоторых случаев острой реакции трансплантат против хозяина . [6]

Принципы [ править ]

Дополнительная информация: Группа крови
АВО антигены и антитела

Группы крови определяются в зависимости от наличия или отсутствия определенных антигенов на поверхности эритроцитов. Наиболее важными из них в медицине являются антигены ABO и RhD [7] : 585, но существуют многие другие системы групп крови, которые имеют клиническое значение в определенных ситуациях. По состоянию на 2019 год официально признано 38 групп крови. [8]

Люди, у которых в эритроцитах отсутствуют определенные антигены группы крови, могут образовывать антитела против этих антигенов. Например, у человека с кровью типа А вырабатываются антитела против антигена B. Антитела группы крови ABO являются естественными, а это означает, что они обнаруживаются у людей, которые не контактировали с несовместимой кровью. [7] : 585–92 Антитела к большинству антигенов других групп крови, включая RhD, развиваются после контакта людей с этими антигенами в результате переливания крови или беременности. [1] : 62 Некоторые из этих антител могут связываться с несовместимыми эритроцитами и вызывать их разрушение , что приводит к реакциям переливания крови и другим осложнениям.[9] : 210–11

Серологические методы тестирования совместимости с кровью используют эти реакции антитело-антиген . В типирование крови, реагенты , содержащие группы крови антитела, называемые антисыворотки , [7] : 586 добавляют к суспензии клеток крови. Если соответствующий антиген присутствует, антитела в реагенте будут вызывать агглютинирование эритроцитов (слипание), что можно идентифицировать визуально. [1] : 65При скрининге на антитела плазму индивидуума тестируют против набора эритроцитов с известными антигенными профилями; если плазма агглютинирует один из красных кровяных телец на панели, это указывает на то, что у человека есть антитело против одного из антигенов, присутствующих на клетках. При перекрестном сопоставлении плазму предполагаемого реципиента переливания добавляют к эритроцитам донора и наблюдают на предмет агглютинации (или гемолиза) для обнаружения антител, которые могут вызывать реакции переливания. [3] : 722–5

Антитела группы крови встречаются в двух основных формах: иммуноглобулин M (IgM) и иммуноглобулин G (IgG). Антитела, которые преимущественно представляют собой IgM, такие как антитела ABO, обычно вызывают немедленную агглютинацию эритроцитов при комнатной температуре. Таким образом, группа крови человека по шкале АВО может быть определена простым добавлением эритроцитов к реагенту и центрифугированием или смешиванием образца [1] : 122, а при перекрестном сопоставлении несовместимость между типами крови АВО может быть обнаружена сразу после центрифугирования. [3] : 725 RhD-типирование также обычно использует реагенты IgM [10] : 477, хотя анти-RhD обычно встречается в организме в виде IgG. [1]: 161 Антитела, которые преимущественно представляют собой IgG, например, направленные против антигенов систем Даффи и Кидда , [1] : 198–200 обычно не вызывают немедленной агглютинации, поскольку небольшой размер антитела IgG предотвращает образование решетчатой ​​структуры. Следовательно, типирование крови с использованием антисыворотки IgG и обнаружение антител IgG требует использования непрямого теста на антиглобулин, чтобы продемонстрировать связывание IgG с эритроцитами. [1] : 104

В непрямом тесте на антиглобулин смесь антисыворотки или плазмы и красных кровяных телец инкубируется при 37 ° C (99 ° F), идеальной температуре для определения реактивности антител IgG. После инкубации эритроциты промывают физиологическим раствором для удаления несвязавшихся антител и добавляют реагент против человеческого глобулина. Если антитела IgG связались с антигенами на поверхности клетки, глобулин против человека будет связываться с этими антителами, вызывая агглютинирование красных кровяных телец после центрифугирования. Если реакция отрицательная, добавляются «контрольные клетки» - клетки-реагенты, покрытые IgG, чтобы убедиться, что тест работает правильно. Если результат теста действительно отрицательный, проверочные клетки должны реагировать с несвязанным античеловеческим глобулином и демонстрировать агглютинацию. [3] : 716–9

Группа крови [ править ]

Печатание ABO и Rh [ править ]

При ABO- и Rh-типировании реагенты, содержащие антитела против антигенов A, B и RhD, добавляют к суспензиям клеток крови. Если соответствующий антиген присутствует, антитела в реагенте будут вызывать агглютинирование эритроцитов (слипание), что можно идентифицировать визуально. [1] : 65 В дополнение к идентификации антигенов ABO, что называется прямым группированием, рутинное определение группы крови по системе ABO также включает идентификацию антител ABO в плазме человека. Это называется обратным группированием, [1] : 120, и выполняется для подтверждения группы крови ABO. При обратной группировке плазма человека добавляется к типу А 1и красные кровяные тельца типа B. Плазма должна агглютинировать клетки, которые экспрессируют антигены, которых нет у человека, но не агглютинировать клетки, которые экспрессируют те же антигены, что и пациент. Если этого не происходит, требуется дальнейшее тестирование. [7] : 595 Агглютинация оценивается от 1+ до 4+ в зависимости от силы реакции. При наборе ABO оценка 3+ или 4+ указывает на положительную реакцию, а оценка 1+ или 2+ неубедительна и требует дальнейшего изучения. [1] : 236

Другие системы групп крови [ править ]

Кровь типирование для RHC / с, RHE / е и K антигенов

Перед переливанием крови людей проверяют на наличие антител против антигенов группы крови, не принадлежащих к группе АВО. [5] Помимо ABO и RhD, антигены группы крови, которые имеют важное значение в трансфузионной медицине, включают антигены RhC / c и E / e, а также антигены систем Даффи , Келла , Кидда и MNS . [1] : 158–173 Если выявляется клинически значимое антитело, реципиенту необходимо перелить кровь, отрицательную по соответствующему антигену, чтобы предотвратить реакцию переливания. Это требует, чтобы донорные единицы были типизированы для соответствующего антигена. [1] :261 Реципиент также может быть типизирован по антигену, чтобы подтвердить идентичность антитела, поскольку только люди, которые не имеют антигена группы крови, должны вырабатывать антитела против него. [7] : 603

В Европе у женщин, которым требуется переливание крови, часто выбирают антигены Kell и расширенный резус-фактор, чтобы предотвратить сенсибилизацию к этим антигенам, что может подвергнуть их риску развития гемолитической болезни новорожденных во время беременности. [11] Американское общество гематологов рекомендует людям с серповидно - клеточной анемии у их кровь набирается для СВП / с, летящего / е, Kell, Duffy, Kidd и MNS антигены перед переливанием, [12] : 130-1 , потому что они часто требуют переливания и могут стать сенсибилизированными к этим антигенам при переливании несовместимой крови. [13] Расширенное фенотипирование эритроцитов также рекомендуется людям сбета-талассемия . [14] Системы групп крови, отличные от ABO и Rh, имеют относительно небольшой риск осложнений при смешивании крови, поэтому в чрезвычайных ситуациях, таких как обширное кровотечение , срочность переливания может превышать потребность в тестировании совместимости с другими системами групп крови (и потенциально Rh тоже). [15]

Скрининг и идентификация антител [ править ]

Антитела к большинству антигенов группы крови, помимо антигенов системы АВО, развиваются после контакта с несовместимой кровью. [1] : 62 Такие «неожиданные» антитела группы крови обнаруживаются только у 0,8–2% людей; однако реципиенты переливания крови должны быть проверены на наличие этих антител, чтобы предотвратить реакции переливания. Скрининг на антитела также проводится в рамках дородового наблюдения , поскольку антитела против RhD и других антигенов группы крови могут вызывать гемолитическую болезнь новорожденных, и потому что резус-отрицательные матери, у которых развились антитела против RhD, не имеют права на получение Rho (D ) иммунный глобулин (Rhogam). [1] : 233

В процедуре скрининга антител плазму индивидуума добавляют к панели из двух или трех наборов эритроцитов, выбранных для экспрессии наиболее клинически значимых антигенов группы крови. В скрининге антител используются только клетки группы O, так как в противном случае клетки будут реагировать с встречающимися в природе антителами группы крови ABO. Смесь плазмы и эритроцитов инкубируют при 37 ° C и тестируют с помощью непрямого антиглобулинового теста. Некоторые протоколы скрининга и идентификации антител включают фазу тестирования после инкубации при комнатной температуре, но ее часто пропускают, потому что самые неожиданные антитела, которые реагируют при комнатной температуре, клинически несущественны. [3] : 722–4

Агглютинация скрининговых клеток плазмой, с добавлением или без добавления античеловеческого глобулина, указывает на присутствие неожиданного антитела группы крови. Если это происходит, необходимо дальнейшее тестирование с использованием большего количества клеток (обычно 10–11) для идентификации антитела. Изучая антигенные профили эритроцитов, с которыми реагирует плазма человека, можно определить идентичность антитела. «Автоконтроль», в котором плазму индивидуума тестируют против его собственных эритроцитов, включен, чтобы определить, вызвана ли агглютинация аллоантителом (антителом против чужеродного антигена), аутоантителом (антителом против собственных антигенов), или другое мешающее вещество. [3] : 722–4

На изображении выше показана интерпретация панели антител, используемой в серологии для обнаружения антител к наиболее значимым антигенам группы крови. Каждая строка представляет «контрольные» или «контрольные» эритроциты доноров, которые имеют известные антигенные композиции и относятся к группе О по системе ABO . A + означает, что антиген присутствует на контрольных эритроцитах, а 0 означает, что он отсутствует; nt означает «не проверено». Столбец «результат» справа отображает реактивность при смешивании эталонных эритроцитов с плазмой пациента в 3 различных фазах: комнатная температура, 37 ° C и AHG (с античеловеческим глобулином, посредством непрямого антиглобулинового теста ). [16]

  • Шаг 1 ; Помечено синим цветом: начало исключения антигенов без реакции во всех 3 фазах; глядя на первую контрольную строку клеток без реакции (0 в столбце справа, в данном случае донор клеток 2), и исключая (здесь отмечен X) каждый присутствующий антиген, где другая пара либо практически не существует (например, для D) или 0 (присутствие гомозиготно, в данном случае гомозиготно c).
    Когда обе пары имеют + (гетерозиготные случаи), они обе исключаются (здесь отмечены X), за исключением антигенов C / c, E / e, Duffy, Kidd и MNS (где антитела пациента все еще могут реагировать на клетки крови с гомозиготная экспрессия антигена, поскольку гомозиготная экспрессия приводит к более высокой дозировке антигена). [17] Таким образом, в данном случае E / e не исключается в этой строке, а K / k исключается, а также Jsb (независимо от того,что показал быJs a ). [заметка 2]
  • Шаг 2 : Помечено коричневым цветом: переход к следующему ряду контрольных ячеек с отрицательной реакцией (в данном случае донор клеток 4) и повторение для каждого типа антигена, который еще не исключен.
  • Шаг 3 : помечено фиолетовым цветом. То же самое повторяется для каждого ряда контрольных ячеек с отрицательной реакцией.
  • Шаг 4 : Дисконтирование антигенов, которые отсутствовали во всех или почти во всех реактивных случаях (здесь отмечены знаком \). Часто это антигены с низкой распространенностью, и хотя существует вероятность образования таких антител, они, как правило, не относятся к тому типу, который отвечает за имеющуюся реактивность.
  • Шаг 5 : Сравнение оставшихся возможных антигенов на предмет наиболее вероятного виновника (в данном случае Fy a ) и выборочное исключение значимых дифференциальных антигенов, например, с показанным дополнительным типом донорских клеток, который, как известно, не содержит Fy a, но содержит C и Jk a .

В этом случае панель антител показывает, что антитела против Fy a присутствуют. Это указывает на то, что необходимо использовать донорскую кровь с отрицательной группой по Fy a- антигену. Тем не менее, если последующее перекрестное сопоставление показывает реактивность, необходимо провести дополнительное тестирование против ранее обесцененных антигенов (в этом случае потенциально E, K, Kp a и / или Lu a ). [16] Люди, у которых в прошлом были выявлены неожиданные антитела к группе крови, могут не проявить положительной реакции при последующем тестировании; однако, если антитела клинически значимы, им необходимо в любом случае перелить антиген-отрицательную кровь. [18]

Подавление гемагглютинации [17]
Нейтрализующее веществоАнтиген отменен
  • Гидатидозного киста жидкости
  • Голубиные яйца
P1
СлюнаH, Le a
Грудное молокоя
Моча морской свинкиSda

Когда присутствует несколько антител или когда антитело направлено против высокочастотного антигена, обычная процедура панели антител может не обеспечить окончательной идентификации. В этих случаях может использоваться ингибирование гемагглютинации , когда нейтрализующее вещество нейтрализует специфический антиген. [17] В качестве альтернативы плазму можно инкубировать с клетками с известным антигенным профилем, чтобы удалить специфическое антитело (процесс, называемый адсорбцией ); или клетки можно обрабатывать ферментами, такими как фикаин или папаин, которые ингибируют реактивность некоторых антител группы крови и усиливают другие. [3] : 723–9Эффект фикаина и папаина на основные системы групп крови следующий: [19] [20]

  • Улучшено: ABO , Rh , Kidd , Lewis , P1 , Ii
  • Уничтожены: Даффи (Fy a и Fy b ), лютеранец , MNS
  • Незатронутый: Келл

Перекрестное сопоставление [ править ]

Основная статья: Перекрестное сопоставление

Перекрестное сопоставление, которое обычно выполняется перед переливанием крови, включает добавление плазмы крови реципиента к образцу эритроцитов донора. Если кровь несовместима, антитела в плазме реципиента будут связываться с антигенами на эритроцитах донора. Эта реакция антитело-антиген может быть обнаружена по видимому слипанию или разрушению красных кровяных телец или по реакции с антиглобулином человека после центрифугирования. [7] : 600–3

Если реципиент переливания имеет отрицательный результат анализа на антитела и не имеет антител в анамнезе, часто выполняется перекрестное сопоставление «немедленным вращением»: эритроциты и плазму центрифугируются сразу после смешивания в качестве окончательной проверки несовместимости между группами крови ABO. Если обнаружено клинически значимое антитело (или было в прошлом), или если немедленное перекрестное сопоставление спинового мозга демонстрирует несовместимость, выполняется «полное» или «перекрестное сопоставление IgG», при котором используется непрямой тест на антиглобулин для выявления несовместимости групп крови, вызванной IgG. антитела. Процедура перекрестного сопоставления IgG более продолжительна, чем непосредственное перекрестное сопоставление, и в некоторых случаях может занимать более двух часов. [18]

Лица, у которых был отрицательный результат скрининга на антитела и не было антител в анамнезе, также могут пройти «электронное перекрестное сопоставление» при условии, что их тип ABO и Rh был определен из текущего образца крови и что результаты другого типа ABO / Rh зарегистрированы. В этом случае группа крови реципиента просто сравнивается с группой крови донора без необходимости проведения серологического тестирования. [7] : 600–3 В экстренных случаях кровь может быть сдана до завершения перекрестного сопоставления. [1] : 262–3

Методы [ править ]

Методы трубки и слайда [ править ]

Типирование крови методом слайдов: тип А положительный

Типирование крови можно выполнить с помощью пробирок, микропланшетов или слайдов для определения группы крови. Пробирный метод включает смешивание суспензии эритроцитов с антисывороткой (или плазмой, для обратного группирования) в пробирке. Смесь центрифугируют для отделения клеток от реагента, а затем ресуспендируют, осторожно встряхивая пробирку. Если интересующий антиген присутствует, красные кровяные тельца агглютинируют, образуя твердый комок в пробирке. Если он отсутствует, красные кровяные тельца снова переходят в суспензию при смешивании. [7] : 611–12 [9] : 214 Метод микропланшета аналогичен методу с пробиркой, за исключением того, что определение группы крови выполняется не в отдельных пробирках, а в планшете, содержащем десятки лунок, что позволяет проводить несколько тестов одновременно. Реакции агглютинации считываются после центрифугирования планшета. [21] : 201

Скрининг и идентификация антител также можно проводить с помощью пробирки. В этой процедуре плазма и эритроциты смешиваются вместе в пробирке, содержащей среду, которая усиливает реакции агглютинации, например физиологический раствор с низкой ионной силой (LISS). Пробирки инкубируют при температуре тела в течение определенного периода времени, затем центрифугируют и исследуют на агглютинацию или гемолиз; сначала сразу после инкубационного периода, а затем после промывки и добавления реагента против человеческого глобулина. [3] : 722 Перекрестное сопоставление также может быть выполнено методом пробирки; реакции считываются сразу после центрифугирования при немедленном перекрестном сопоставлении центрифугированием или после инкубации и добавления AHG в процедуре полного перекрестного сопоставления. [3]: 725

Метод слайдов для определения группы крови включает смешивание капли крови с каплей антисыворотки на слайде. Предметное стекло наклоняют, чтобы смешать клетки и реагенты вместе, а затем наблюдают за агглютинацией, что указывает на положительный результат. Этот метод обычно используется в районах с ограниченными ресурсами или в чрезвычайных ситуациях; в противном случае предпочтительны альтернативные методы. [9] : 214 [10] : 476

Колоночная агглютинация [ править ]

Типирование крови методом колоночной агглютинации: тип О положительный

Методы колонки агглютинации для тестирования совместимости крови (иногда называемый «тест - гель») используют карточки , содержащие столбцы декстран - полиакриламидном геле . Карты, предназначенные для определения группы крови, содержат заранее приготовленные реагенты для определения группы крови для прямого группирования, а лунки содержат только буферный раствор., к которому добавляются красные кровяные тельца и плазма реагента для обратной группировки. Скрининг антител и перекрестное сопоставление также можно проводить с помощью агглютинации на колонке, в этом случае используются карточки, содержащие реагент против человеческого глобулина. Гелевые карты центрифугируются (иногда после инкубации, в зависимости от теста), во время которого агглютинаты красных кровяных телец захватываются в верхней части колонки, поскольку они слишком велики для миграции через гель. Неагглютинированные клетки собираются на дне. Таким образом, линия красных кровяных телец в верхней части столбца указывает на положительный результат. Сила положительных реакций оценивается от 1+ до 4+ в зависимости от того, как далеко клетки прошли через гель.Гелевый тест имеет преимущества по сравнению с ручными методами в том, что он устраняет вариабельность, связанную с повторным суспендированием клеток вручную, и в том, что карточки можно хранить в качестве записи теста.[1] : 269–71 Метод агглютинации на колонке используется некоторыми автоматическими анализаторами для автоматического определения группы крови. [7] : 590 Эти анализаторы переносят эритроциты и плазму на гелевые карты, центрифугируют их, сканируют и считывают реакции агглютинации для определения группы крови. [1] : 270–1

Твердофазный анализ [ править ]

В твердофазных анализах (иногда называемых методом «захвата антигена») используются реагирующие антигены или антитела, прикрепленные к поверхности (обычно на микропланшете). [9] : 214 лунок микропланшета, покрытых анти-A, -B и -D реагентами, используются для прямого группирования. Добавляют тестовый образец и центрифугируют микропланшет; при положительной реакции эритроциты прилипают к поверхности лунки. [7] : 590 [10] : 477 Некоторые автоматические анализаторы используют твердофазные анализы для определения группы крови. [1] : 275–6

Генотипирование [ править ]

Генетическое тестирование может использоваться для определения группы крови человека в определенных ситуациях, когда серологических тестов недостаточно. Например, если человеку перелили большие объемы донорской крови, результаты серологического тестирования будут отражать антигены на донорских клетках, а не фактическую группу крови человека. [11] Лица, вырабатывающие антитела против собственных эритроцитов [21] : 202 или получающие определенные лекарства, могут проявлять ложные реакции агглютинации при серологических исследованиях, поэтому для точного определения их группы крови может потребоваться генотипирование. [1] : 261 Для определения типа антигенов эритроцитов, для которых не существует коммерческих антисывороток, требуется генетическое тестирование.[11]

ААББ рекомендует RhD антиген генотипирование для женщин с серологическими слабыми D фенотипами , которые имеют потенциал к деторождению. Это связано с тем, что некоторые люди со слабым фенотипом D могут вырабатывать антитела против антигена RhD, которые могут вызывать гемолитическую болезнь новорожденных, а другие - нет. Генотипирование может идентифицировать конкретный тип слабого антигена D, который определяет способность человека вырабатывать антитела, что позволяет избежать ненужного лечения иммуноглобулином Rho (D) . [22] [23] Генотипирование предпочтительнее серологического тестирования для людей с серповидно-клеточной анемией, потому что оно более точное для определенных антигенов и может идентифицировать антигены, которые невозможно обнаружить серологическими методами. [13]

Генотипирование также используется при пренатальном тестировании на гемолитическую болезнь новорожденных. Когда у беременной женщины есть антитела группы крови, которые могут вызывать ГБН, плод может быть типизирован на соответствующий антиген, чтобы определить, находится ли он в группе риска развития заболевания. Потому что это непрактично использовать кровь от плода, тип крови определяется с помощью амниоцентеза образца или бесклеточной плодной ДНК , выделенной из крови матери. [21] : 202 [22] Отец также может быть генотипирован, чтобы предсказать риск гемолитической болезни новорожденного, потому что, если отец гомозиготендля соответствующего антигена (имеется в виду наличие двух копий гена) ребенок будет положительным на антиген и, следовательно, будет подвержен риску развития заболевания. Если отец гетерозиготен (имеет только одну копию), ребенок имеет только 50% шанс быть положительным по антигену. [11]

Ограничения [ править ]

Расхождения в ABO [ править ]

При наборе ABO результаты прямого и обратного группирования всегда должны соответствовать друг другу. Неожиданное различие между двумя результатами называется расхождением по системе ABO и должно быть устранено до того, как будет сообщена группа крови человека. [1] : 136

Прямая группировка [ править ]

Слабые реакции в прямой группировке могут возникать у людей, которые принадлежат к определенным подгруппам ABO - вариантным группам крови, характеризующимся пониженной экспрессией антигенов A или B или изменениями их структуры. Ослабленная экспрессия антигенов ABO может также возникать при лейкемии и лимфоме Ходжкина . Слабые реакции при прямом группировании можно усилить, инкубируя смесь крови и реагентов при комнатной температуре или 4 ° C (39 ° F), или используя определенные ферменты для усиления реакций антиген-антитело. [1] : 139

Иногда после реакции с антисывороткой для определения группы крови выявляются две популяции эритроцитов. Некоторые эритроциты агглютинируются, а другие нет, что затрудняет интерпретацию результата. Это называется реакцией смешанного поля , и это может произойти, если кто-то недавно получил переливание крови с другой группой крови (как у пациента типа A, получающего кровь типа O), если он получил трансплантацию костного мозга или стволовых клеток от кто-то с другой группой крови или у пациентов с определенными подгруппами ABO, такими как A 3 . Изучение истории болезни человека может выяснить причину реакции смешанного поля. [1] : 138 [24] :314

Люди с болезнью холодовых агглютининов вырабатывают антитела против собственных эритроцитов, которые заставляют их спонтанно агглютинировать при комнатной температуре, что приводит к ложноположительным реакциям при прямом группировании. Холодные агглютинины обычно можно деактивировать, нагревая образец до 37 ° C (99 ° F) и промывая эритроциты физиологическим раствором. Если это не эффективно, для уничтожения антител можно использовать дитиотреитол . [1] : 141

Образцы пуповинной крови могут быть загрязнены желе Уортона , вязким веществом, которое может вызывать слипание красных кровяных телец, имитируя агглютинацию. Желе Уортона можно удалить, тщательно промыв эритроциты. [1] : 141

В редком явлении, известном как «приобретенный антиген B», пациент с истинной группой крови A может показать слабый положительный результат для B в прямой группе. Это состояние, которое связано с желудочно-кишечными заболеваниями, такими как рак толстой кишки [1] : 139 и кишечная непроходимость , [24] : 126, возникает в результате преобразования антигена A в структуру, имитирующую антиген B, бактериальными ферментами. [10] : 477 В отличие от настоящего антигена B, приобретенный антиген B не вступает в реакцию с реагентами в определенном диапазоне pH. [1] : 139

Обратная группировка [ править ]

Младенцы в возрасте от 3 до 6 месяцев демонстрируют отсутствующие или слабые реакции в обратной группировке, потому что они вырабатывают очень низкие уровни антител ABO. [1] : 136 Следовательно, обратное группирование для этой возрастной группы обычно не выполняется. [10] : 486 У пожилых людей может также наблюдаться снижение продукции антител, как и у людей с гипогаммаглобулинемией . Слабые реакции можно усилить, если дать плазме и эритроцитам инкубироваться при комнатной температуре в течение 15–30 минут, а если это не эффективно, их можно инкубировать при 4 ° C (39 ° F). [1] : 137–8

Примерно 20% людей с группой крови A или AB принадлежат к подгруппе A, называемой A 2 , в то время как более распространенная подгруппа, охватывающая примерно 80% людей, называется A 1 . Из-за небольших различий в структуре антигенов A 1 и A 2 некоторые люди в подгруппе A 2 могут продуцировать антитело против A 1 . Следовательно, эти люди будут вводить как A или AB в прямой группировке, но будут демонстрировать неожиданную положительную реакцию с эритроцитами типа A 1 в обратной группе. Несоответствие можно устранить, проверив эритроциты человека с помощью анти-A 1.реагент, который даст отрицательный результат, если пациент относится к подгруппе А 2 . Антитела против A 1 считаются клинически незначительными, если они не вступают в реакцию при 37 ° C (99 ° F). Существуют и другие подгруппы A, а также подгруппы B, но они встречаются редко. [1] : 127–32

Если в плазме человека присутствует высокий уровень белка , может возникнуть явление, известное как руло, когда его плазма добавляется к клеткам-реагентам. Rouleaux заставляет красные кровяные тельца складываться вместе, что может имитировать агглютинацию, вызывая ложноположительный результат в обратной группировке. Этого можно избежать, удалив плазму, заменив ее физиологическим раствором и повторно центрифугировав пробирку. Руло исчезнет после замены плазмы физиологическим раствором, но истинная агглютинация сохранится. [1] : 140–1

Антитела к антигенам группы крови, отличной от A и B, могут реагировать с клетками-реагентами, используемыми в обратной группировке. Если присутствует аутоантитело, реагирующее на холод , ложноположительный результат может быть устранен путем нагревания образца до 37 ° C (99 ° F). Если результат вызван аллогенным антителом, антитело экран может быть выполнен , чтобы идентифицировать антитела, [7] : 141-2 и обратная группировка может быть выполнена с использованием образцов , которые не имеют соответствующий антиген. [10] : 477

Слабый фенотип D [ править ]

Дополнительная информация: Weak D

Примерно от 0,2 до 1% людей имеют фенотип «слабый D» [25], что означает, что они положительны по антигену RhD, но проявляют слабые или отрицательные реакции с некоторыми реагентами против RhD из-за снижения экспрессии антигена или атипичных вариантов антигена. структура. Если обычное серологическое тестирование на RhD дает результат 2+ или меньше, антиглобулиновый тест может использоваться для демонстрации наличия RhD. [1] : 159 Тест на слабый D также проводится у доноров крови, у которых изначально был отрицательный резус-фактор. [22]Исторически доноры крови со слабым D считались резус-положительными, а пациенты со слабым D лечились как резус-отрицательные, чтобы избежать потенциального контакта с несовместимой кровью. Генотипирование все чаще используется для определения молекулярной основы фенотипов слабого D, поскольку оно определяет, могут ли люди со слабым D продуцировать антитела против RhD или повышать чувствительность других к антигену RhD. [25]

Сенсибилизация к эритроцитам [ править ]

Тест непрямого антиглобулиновый , который используется для тестирования слабого D и типирование некоторых красных кровяных клеток антигенов, обнаруживает IgG , связанный с эритроцитами. Если IgG связывается с эритроцитами in vivo , как это может происходить при аутоиммунной гемолитической анемии , гемолитической болезни новорожденных и реакциях переливания крови, [10] : 260 непрямой тест на антиглобулин всегда дает положительный результат, независимо от наличия соответствующий антиген. [10] : 477–8 Можно провести прямой тест на антиглобулин, чтобы продемонстрировать, что положительная реакция вызвана сенсибилизацией эритроцитов. [26] : 289

Другое предтрансфузионное тестирование [ править ]

Дополнительная информация: переливание крови

У некоторых групп людей есть особые потребности в переливании крови. Плоды, младенцы с очень низкой массой тела при рождении и люди с ослабленным иммунитетом подвержены риску развития тяжелой инфекции цитомегаловирусом (ЦМВ) opportun условно-патогенным микроорганизмом, на который примерно 50% доноров крови дают положительный результат и которым можно переливать ЦМВ-отрицательную кровь предотвратить заражение. [3] : 749 [27] Те, кто подвержен риску развития реакции «трансплантат против хозяина» , например реципиенты трансплантата костного мозга , получают кровь, облученную для инактивации Т-лимфоцитов.которые ответственны за эту реакцию. Людям, у которых в прошлом были серьезные аллергические реакции на переливание крови, можно переливать кровь, "промытую" для удаления плазмы. [1] : 342–5 Также изучается анамнез пациента, чтобы увидеть, были ли ранее идентифицированы антитела и какие-либо другие серологические аномалии.

Прямой тест на антиглобулин (тест Кумбса ) также проводится в рамках исследования антител. [28]

Также есть тестирование на различные инфекционные заболевания .

История [ править ]

Карл Ландштейнер около 1930 г.

В 1901 году Карл Ландштейнер опубликовал результаты эксперимента, в котором он смешал сыворотку и эритроциты пяти разных доноров-людей. Он заметил, что сыворотка человека никогда не агглютинировала его собственные эритроциты, но могла агглютинировать другие, и на основании реакций агглютинации эритроциты можно было разделить на три группы: группа A, группа B и группа C. Группа C, которая состояла из эритроцитов, которые не вступали в реакцию с плазмой какого-либо человека, позже будет известна как группа O. [29] : 5 Четвертая группа, теперь известная как AB, была описана коллегами Ландштейнера в 1902 году [29] : 7 Этот эксперимент был первым примером группы крови. [1] : 120

В 1945 г. Робин Кумбс , А. Э. Мурант и Р. Р. Рэйс опубликовали описание теста на антиглобулин (также известного как тест Кумбса). Предыдущие исследования антител группы крови документально подтвердили наличие так называемых «блокирующих» или «неполных» антител: антител, которые занимали участки антигена, предотвращая связывание других антител, но не вызывали агглютинации красных кровяных телец. Кумбс и его коллеги разработали метод, позволяющий легко продемонстрировать присутствие этих антител. Они вводили кроликам человеческие иммуноглобулины , что заставляло их производить античеловеческий глобулин.антитело. Глобулин против человека может связываться с антителами, уже прикрепленными к эритроцитам, и вызывать их агглютинацию. Изобретение антиглобулинового теста привело к открытию гораздо большего числа антигенов групп крови. К началу 1950-х годов компании начали производить коммерческие антисыворотки для специальных тестов на антигены. [29] : 62–72

Примечания [ править ]

  1. ^ Антиген RhD широко известен как «резус-фактор», хотя в системе антигенов Rh есть несколько других антигенов. [1] : 150 [2] : 26
  2. ^ Помимо C / c, E / e, Duffy, Kidd и MNS, клинически значимые эффекты дозировки редки, но не невозможны для других антигенов, что, таким образом, все еще можно учитывать, если последующее перекрестное сопоставление является реактивным.

Ссылки [ править ]

  1. ^ Б с д е е г ч я J к л м п о р Q R сек т у V ш х у г аа аЬ ас объявления аи аф ага ах д.в. Denise M Harmening (30 ноября 2018 года). Современные методы банка крови и переливания крови . Ф.А. Дэвис. ISBN 978-0-8036-9462-0.
  2. ↑ Деннис Флаэрти (25 июня 2014 г.). Иммунология для фармации . Elsevier Health Sciences. ISBN 978-0-323-29111-8.
  3. ^ a b c d e f g h i j McPherson, RA; Пинкус, MR (2017). Клиническая диагностика и управление Генри лабораторными методами (23-е изд.). Elsevier Health Sciences. ISBN 978-0-323-41315-2.
  4. ^ Американская ассоциация клинической химии (15 ноября 2019 г.). «Набор крови» . Лабораторные тесты онлайн . Проверено 27 января 2020 года .
  5. ^ Б Gonsorcik, VK (7 августа 2018). «Группировка ABO: обзор, клинические показания / приложения, выполнение тестов» . Medscape . Дата обращения 2 марта 2020 .
  6. ^ Bacigalupo, A .; Ван Линт, MT; М. Марджокко, Д. Оккини; Ferrari, G .; Питталуга, Пенсильвания; Frassoni, F .; Peralvo, J .; Lercari, G .; Carubia, F .; Мармонт, AM (1988). «Або-совместимость и острое заболевание трансплантат против хозяина после аллогенной трансплантации костного мозга». Трансплантация . 45 (6): 1091–1093. DOI : 10.1097 / 00007890-198806000-00018 . ISSN 0041-1337 . PMID 3289150 . S2CID 39707395 .   
  7. ^ Б с д е е г ч я J K Turgeon, М. Л. (2016). Клиническая лабораторная наука Линне и Рингсруда: концепции, процедуры и клиническое применение (7-е изд.). Elsevier Mosby. ISBN 978-0-323-22545-8.
  8. ^ "Иммуногенетика красных клеток и терминология группы крови" . Международное общество переливания крови . 2019. Архивировано 8 июля 2020 года . Дата обращения 4 октября 2020 .
  9. ^ a b c d Джеффри Маккалоу (27 сентября 2016 г.). Трансфузионная медицина . Вайли. ISBN 978-1-119-23652-8.
  10. ^ a b c d e f g h Bain, BJ; Бейтс, я; Лаффан, Массачусетс (11 августа 2016 г.). Электронная книга по практической гематологии Дэйси и Льюиса . Elsevier Health Sciences. ISBN 978-0-7020-6925-3.
  11. ^ a b c d Вестхофф, Конни М. (2019). «Генотипирование группы крови» . Кровь . 133 (17): 1814–1820. DOI : 10,1182 / кровь 2018-11-833954 . ISSN 0006-4971 . PMID 30808639 .  
  12. ^ Каллум, JL; Пинкертон, PH; Лима, А (2016). Bloody Easy 4: Переливания крови, альтернативы крови и трансфузионные реакции (PDF) . Региональная координационная сеть по крови Онтарио. ISBN  978-0-9869176-2-2.
  13. ^ a b Chou, Stella T .; Алсавас, Муаз; Fasano, Ross M .; Филд, Джошуа Дж .; Хендриксон, Жанна Э .; Ховард, Джо; Камека, Мишель; Kwiatkowski, Janet L .; Пирен, Франция; Ши, Патрисия А .; Стоуэлл, Шон Р .; Thein, Swee Lay; Вестхофф, Конни М .; Вонг, Триша Э .; Акл, Эли А. (2020). «Рекомендации Американского общества гематологов по серповидно-клеточной анемии на 2020 год: поддержка переливания крови» . Кровь наступает . 4 (2): 327–355. DOI : 10.1182 / bloodadvances.2019001143 . ISSN 2473-9529 . PMC 6988392 . PMID 31985807 .   
  14. ^ Compernolle, Veerle; Chou, Stella T .; Танаэль, Сусано; Сэвидж, Уильям; Ховард, Джо; Джозефсон, Кассандра Д .; Одаме, Исаак; Хоган, Кристофер; Деномм, Грегори; Шехата, Надин (2018). «Спецификации эритроцитов для пациентов с гемоглобинопатией: систематический обзор и рекомендации». Переливание . 58 (6): 1555–1566. DOI : 10.1111 / trf.14611 . ISSN 0041-1132 . PMID 29697146 . S2CID 21650658 .   
  15. ^ Гуделл, Памела П .; Уль, Линн; Мохаммед, Моник; Пауэрс, Эми А. (2010). «Риск гемолитических трансфузионных реакций после переливания эритроцитов в чрезвычайных ситуациях» . Американский журнал клинической патологии . 134 (2): 202–206. DOI : 10.1309 / AJCP9OFJN7FLTXDB . ISSN 0002-9173 . PMID 20660321 .  
  16. ^ a b Джастин Р. Рис, MS, MLS (ASCP) CM, SBBCM. «Введение в идентификацию антител» (PDF) . Университет Юты, Медицинская лаборатория наук . Проверено 18 декабря 2020 . CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  17. ^ a b c Майс, Дэниел (2014). Краткий справочник клинической патологии . США: Американское общество клинической патологии Press. ISBN 978-0-89189-615-9. OCLC  895712380 .
  18. ^ a b Uhl, L (11 января 2021 г.). «Предтрансфузионное тестирование при переливании эритроцитов» . UpToDate . Проверено 27 января 2021 года .
  19. ^ Хилл, Бен С .; Ханна, Кортни А .; Адамски, Джилл; Pham, Huy P .; Marques, Marisa B .; Уильямс, Лэнс А. (2017). «Обработанные фицином эритроциты помогают идентифицировать клинически значимые аллоантитела, замаскированные как реакции неопределенной специфичности в гелевых микропробирках» . Лабораторная медицина . 48 (1): 24–28. DOI : 10,1093 / labmed / lmw062 . ISSN 0007-5027 . 
  20. ^ Эрик Чинг. «Вопросы и ответы о протеолитических ферментах, используемых в серологии группы крови» . Канадское общество трансфузионной медицины . Проверено 28 января 2021 года .
  21. ^ a b c А. Виктор Хоффбранд; Дуглас Р. Хиггс; Дэвид М. Килинг; Атул Б. Мехта (28 октября 2015 г.). Аспирантура по гематологии . Вайли. ISBN 978-1-118-85447-1.
  22. ^ a b c Сэндлер, С. Джеральд; Flegel, Willy A .; Вестхофф, Конни М .; Denomme, Gregory A .; Делани, Меган; Келлер, Маргарет А .; Джонсон, Сьюзан Т .; Кац, Луи; Куинен, Джон Т .; Vassallo, Ralph R .; Саймон, Клейтон Д. (2015). «Пришло время перейти к генотипированию RHD для пациентов с серологическим слабым фенотипом D» . Переливание . 55 (3): 680–689. DOI : 10.1111 / trf.12941 . ISSN 0041-1132 . PMC 4357540 . PMID 25438646 .   
  23. ^ Американская ассоциация банков крови. «Совместное заявление о постепенном внедрении генотипирования RHD для беременных и других женщин детородного возраста с серологическим слабым фенотипом D» . Американская ассоциация банков крови - Заявления . Дата обращения 26 февраля 2020 .
  24. ^ а б Харви Г. Кляйн; Дэвид Дж. Ансти (3 февраля 2014 г.). Переливание крови Моллисона в клинической медицине . Джон Вили и сыновья. ISBN 978-1-4051-9940-7.
  25. ^ a b Сэндлер, С. Джеральд; Чен, Леонард Н .; Флегель, Вилли А. (2017). «Серологические слабые фенотипы D: обзор и руководство по интерпретации группы крови RhD с использованием генотипа RHD» . Британский журнал гематологии . 179 (1): 10–19. DOI : 10.1111 / bjh.14757 . ISSN 0007-1048 . PMC 5612847 . PMID 28508413 .   
  26. ^ Sally В. Rudmann (18 февраля 2005). Учебник банка крови и медицины переливания крови . Elsevier Health Sciences. ISBN 0-7216-0384-X.
  27. ^ Хеддл, Нэнси М .; Бек, Майкл; Гроссман, Бренда; Якобсон, Джессика; Клейнман, Стивен; Тобиан, Аарон АР; и другие. (2016). «Отчет комитета AABB: снижение цитомегаловирусных инфекций, передаваемых при переливании крови». Переливание . 56 (6pt2): 1581–1587. DOI : 10.1111 / trf.13503 . ISSN 0041-1132 . 
  28. ^ Харменнинг, Д. (1999). Современные методы банка крови и переливания (4-е изд.). Филадельфия: Ф.А. Дэвис. ISBN 978-0-8036-0419-3.
  29. ^ a b c Мэрион Э. Рид; Ян Шайн (2012). Открытие и значение групп крови . SBB Книги. ISBN 978-1-59572-422-9.