В физической и аналитической химии , колориметрии или колориметрии является метод , используемый для определения концентрации окрашенных соединений в растворе . [1] колориметр этого устройство , используемое для проверки концентрации раствора путем измерения его поглощения определенной длиной волны света (не следует путать с трехцветным колориметром , используемым для измерения цвета в целом).
Чтобы использовать колориметр, необходимо приготовить различные растворы, включая контрольные или эталонные с известной концентрацией. С помощью визуального колориметра, например показанного колориметра Duboscq , длину пути света через растворы можно варьировать, в то время как прошедший через них фильтрованный свет сравнивается для визуального совпадения. Когда цвета совпадают, время концентрации на длину пути считается равным, поэтому концентрацию неизвестного можно определить простыми пропорциями. [2] Трубки Несслера работают по тому же принципу.
Есть также электронные автоматизированные колориметры; Перед использованием этих машин их необходимо откалибровать с помощью кюветы, содержащей контрольный раствор. Концентрация образца может быть рассчитана по интенсивности света до и после того, как он проходит через образец, с помощью закона Бера – Ламберта . Фотоэлектрические анализаторы стали доминировать в 1960-х годах.
Цвет или длина волны фильтра, выбранного для колориметра, чрезвычайно важны, поскольку длина волны света, передаваемого колориметром, должна быть такой же, как и длина волны, поглощаемая измеряемым веществом. Например, фильтр колориметра может быть установлен на красный, если жидкость синего цвета.
Колориметр поглощения [ править ]
Колориметра это устройство , используемое для проверки концентрации раствора путем измерения его поглощения определенной длины волны света. Для использования этого устройства необходимо приготовить разные растворы , и сначала в кювету наливают контрольный образец (обычно смесь дистиллированной воды и другого раствора).и помещен внутрь колориметра для калибровки машины. Только после калибровки устройства вы можете использовать его для определения плотности и / или концентрации других растворов. Вы делаете это, повторяя калибровку, за исключением кювет, заполненных другими растворами. Фильтр колориметра должен быть установлен на красный, если жидкость синего цвета. Размер фильтра, изначально выбранный для колориметра, чрезвычайно важен, поскольку длина волны света, передаваемого колориметром, должна быть такой же, как и длина волны, поглощаемая веществом.
Колориметрические анализы [ править ]
В колориметрических анализах используются реагенты, которые претерпевают заметное изменение цвета в присутствии анализируемого вещества . Они широко используются в биохимии для проверки наличия ферментов, определенных соединений, антител, гормонов и многих других аналитов. Например,
- пара-нитрофенилфосфат превращается в продукт желтого цвета под действием фермента щелочной фосфатазы .
- Кумасси синий, однажды связываясь с белками, вызывает сдвиг спектра, что позволяет количественно дозировать. Аналогичный колориметрический анализ, анализ бицинхониновой кислоты , использует химическую реакцию для определения концентрации белка.
- В иммуноферментных иммуноанализах для обнаружения антигенов используются антитела в комплексе с ферментами. Связывание антитела часто определяют по изменению цвета таких реагентов, как TMB .
См. Также [ править ]
Ссылки [ править ]
- ^ Хаускрофт, Кэтрин; Констебль, Эдвин (2006). Химия: введение в органическую, неорганическую и физическую химию . Pearson Education. С. 349–353. ISBN 978-0-13-127567-6.
- ^ Луи Розенфельд (1999). Четыре века клинической химии . CRC Press. С. 255–258. ISBN 978-90-5699-645-1.
