Колориметрический анализ представляет собой метод определения концентрации в виде химического элемента или химического соединения в растворе с помощью реагента цвета . Он применим как к органическим соединениям, так и к неорганическим соединениям и может использоваться как с ферментативной стадией, так и без нее . Метод широко используется в медицинских лабораториях и в промышленных целях, например, для анализа проб воды в связи с промышленной очисткой воды .
Оборудование [ править ]
Требуемое оборудование - это колориметр , несколько кювет и подходящий цветовой реагент. Процесс может быть автоматизирован, например, с помощью AutoAnalyzer или анализа закачки потока . Недавно колориметрические анализы, разработанные для колориметров, были адаптированы для использования с планшетными ридерами, чтобы ускорить анализ и уменьшить поток отходов. [1]
Неферментативные методы [ править ]
Примеры [ править ]
- Кальций
Кальций + о-крезольфталеиновый комплексон ----> окрашенный комплекс [2]
- Медь
Медь + дисульфонат батокупроина ----> окрашенный комплекс [3]
- Креатинин
Креатинин + пикрат ----> цветной комплекс [4]
- Железо
Железо + дисульфонат батофенантролина ---> окрашенный комплекс [5]
- Фосфат (неорганический)
Фосфат + молибдат аммония + аскорбиновая кислота ----> комплекс синего цвета [6]
Ферментативные методы [ править ]
В ферментативного анализа (который широко используется в медицинских лабораториях ) цветная реакция предшествует реакции , катализируемой с помощью фермента . Поскольку фермент специфичен для конкретного субстрата , можно получить более точные результаты. Ферментативный анализ всегда проводится в буферном растворе при определенной температуре (обычно 37 ° C), чтобы обеспечить оптимальные условия для действия ферментов. Примеры приведены ниже.
Примеры [ править ]
- Холестерин (метод CHOD-PAP)
- Холестерин + кислород - (фермент холестериноксидаза ) -> холестенон + перекись водорода
- Перекись водорода + 4- аминофеназон + фенол - (фермент пероксидаза ) -> окрашенный комплекс + вода [7]
- Глюкоза (метод GOD-Perid)
- Глюкоза + кислород + вода - (фермент глюкозооксидаза ) -> глюконат + перекись водорода
- Перекись водорода + ABTS - (фермент пероксидаза ) -> окрашенный комплекс [8]
В этом случае обе стадии реакции катализируются ферментами.
- Триглицериды (метод GPO-PAP)
- Триглицериды + вода - (фермент эстераза ) -> глицерин + карбоновая кислота
- Глицерин + АТФ - (фермент глицеринкиназа ) -> глицерин-3-фосфат + АДФ
- Глицерин-3-фосфат + кислород - (фермент глицерин-3-фосфатоксидаза ) -> дигидроксиацетонфосфат + перекись водорода
- Перекись водорода + 4- аминофеназон + 4- хлорфенол - (фермент пероксидаза ) -> окрашенный комплекс [9]
- Мочевина
- Мочевина + вода - (фермент уреаза ) -> карбонат аммония
- Карбонат аммония + фенол + гипохлорит ----> окрашенный комплекс [10]
В этом случае фермент катализирует только первую стадию реакции. Вторая стадия - неферментативная.
- Сокращения
- CHOD = холестериноксидаза
- GOD = глюкозооксидаза
- GPO = глицерин-3-фосфатоксидаза
- PAP = фенол + аминофеназон (в некоторых методах фенол заменяется 4-хлорфенолом , который менее токсичен)
- Перид = пероксидаза
Ультрафиолетовые методы [ править ]
В ультрафиолетовых (УФ) методах нет видимого изменения цвета, но принцип тот же самый, то есть измерение изменения оптической плотности раствора. УФ-методы обычно измеряют разницу в оптической плотности при длине волны 340 нм между никотинамидадениндинуклеотидом (НАД) и его восстановленной формой (НАДН).
Примеры [ править ]
- Пируват
Пируват + НАДН - (фермент лактатдегидрогеназа ) -> L-лактат + НАД [11]
См. Также [ править ]
- Содержание сахара в крови
- MBAs анализ , анализ , который указует , анионные поверхностно -активные вещества в воде с подсинивающей реакцией.
- Цилиндр Несслера
Ссылки [ править ]
- ^ Greenan, NS, RL Малвани и GK Sims. 1995. "Микромасштабный метод колориметрического определения мочевины в почвенных экстрактах". Commun. Почвоведение. Завод анальный. 26: 2519-2529.
- ^ Рэй Саркар и Чаухан (1967) Анал. Биохим. 20: 155
- ^ Зак, Б. (1958) Clin. Чим. Acta. 3: 328
- ^ Hawk, Осер и Саммерсон, Практические Физиологические химии , Черчилль, Лондон, 1947, стр 839-844
- ^ Ссылка для подражания
- ^ Хейдари-Bafroui, Hojat; Рибейро, Бренно; Чарбаджи, амер; Анагностопулос, Константин; Фагри, Мохаммад (2020-10-16). «Портативный инфракрасный лайтбокс для улучшения пределов обнаружения бумажных фосфатных устройств» . Измерение : 108607. doi : 10.1016 / j.measurement.2020.108607 . ISSN 0263-2241 .
- ^ Ссылка для подражания
- ^ Rey и Wielinger (1970) З. Аналит. хим. 252: 224
- ^ Ссылка для подражания
- ^ Фосетт и Скотт (1960) J. Clin. Патол. 13: 156
- ^ Ссылка для подражания
