Французские ячейки давления пресс или французская пресса , является устройством , используемым в биологических экспериментах , чтобы сорвать на плазматическую мембрану из клеток , пропуская их через узкий клапан под высоким давлением. [1] French Press также можно использовать для дезинтеграции хлоропластов, гомогенатов тканей животных и других биологических частиц. Он способен разрушать клеточные стенки, оставляя ядро клетки нетронутым. Французская пресса была изобретена Чарльзом Стейси французским из Института Карнеги в Вашингтоне . [2] В прессе используется внешний гидравлический насос для приводапоршень внутри большего цилиндра, содержащего жидкую пробу. Затем образец под высоким давлением сжимается через игольчатый клапан . Когда образец проходит через клапан, жидкость испытывает напряжение сдвига и декомпрессию , вызывая разрушение клеток. Основные компоненты французского пресса изготовлены из нержавеющей стали, чтобы предотвратить загрязнение пробы.
Французская пресса обычно используется , чтобы сломать упругие плазматическую мембрану и клеточные стенки от бактерий и других микроорганизмов для выделения белков и других клеточных компонентов. [3] Разрушение клеток во френч-прессе приводит к образованию мембранных пузырьков «наизнанку», которые необходимы для многих биохимических анализов in vitro. Перед использованием клетку обычно охлаждают в течение ночи для сохранения ферментативной активности.
К недостаткам пресса можно отнести то, что он не очень хорошо подходит для обработки больших объемов образцов и его несколько сложно эксплуатировать из-за большого веса узла (около 14 кг). Другой недостаток состоит в том, что входной объем ячейки не должен содержать больших скоплений ячеек, что требует предварительной обработки (обычно ультразвуковой). Если скопления клеток не удалить перед обработкой, произойдет засорение клапана, и перед продолжением обработки устройство необходимо тщательно очистить. В результате многие лаборатории по очистке белков считают, что использования лизоцима и обработки ультразвуком достаточно для повседневной экспрессии бактериального белка.
Другие технологии, такие как обработка ультразвуком и шаровые мельницы , доступны для многих из тех же целей и имеют свои преимущества и недостатки. Например, обработка ультразвуком может генерировать высокие силы сдвига, которые разбивают клеточную ДНК на мелкие фрагменты. С помощью французского пресса усилие сдвига можно точно регулировать, регулируя давление поршня. Пресс обеспечивает однократный проход через точку максимальной силы сдвига, ограничивая повреждение хрупких биологических структур из-за повторяющегося сдвига, как при других методах разрушения. [4]
См. Также [ править ]
Ссылки [ править ]
- ^ Vanderheiden GJ, Fairchild AC, Яго GR (май 1970). «Конструирование лабораторного пресса для использования с французской ячейкой давления» . Appl Microbiol . 19 (5): 875–7. DOI : 10,1128 / AEM.19.5.875-877.1970 . PMC 376809 . PMID 5422315 .
- ^ Форк, Говинджи; С, Дэвид (2006). Чарльз Стейси Френч . 88 . Биографические воспоминания Национальной академии наук. С. 62–89.
- ^ Fanelli, Алекс (2016). «Разработка проб» . Проверено 8 декабря 2017 года .
- ^ «Важные примечания по использованию французской ячейки давления» . Лаборатория птиц. Архивировано из оригинала на 2010-07-30 . Проверено 13 ноября 2009 .
