Инокуляции игла представляет собой лабораторное оборудование используется в области микробиологии для передачи и инокуляций живых микроорганизмов . [1] Это один из наиболее часто используемых биологических лабораторных инструментов, который может быть одноразовым или многоразовым. [1] Стандартная многоразовая посевная игла изготовлена из нихромовой или платиновой проволоки, прикрепленной к металлической ручке. [2] [3] Одноразовые иглы для посева часто изготавливаются из пластмассы. Основание иглы притупляется, в результате чего затупляется конец. [2] [3]
Использует [ редактировать ]
Инокуляционные иглы в первую очередь применяются в микробиологии для изучения бактерий и грибов на полутвердых средах. Биотехнология , клеточная биология и иммунология также могут использовать методы культивирования с использованием иглы. [2] [4] [5]
Применение инокуляционных игл направлено на посев и изоляцию определенных участков культур и соблюдение требований минимального нарушения отношений между двумя тесно переполненными микробными колониями. [5] Его также можно использовать для гарпуна под микроскопом с малым увеличением . [6]
Штрихи на пластинах для штрихов, посев косых культур рыбьим хвостом и посев колотых культур можно выполнить с помощью иглы для посева. [1] [7] Для уколов культур требуется игла для посева, и они используются для изучения подвижности клеток, потребности микробов в кислороде с использованием культур тиогликолата и разжижения желатина бактерий. [2] [3] [4]
Операция [ править ]
Стерилизация [ править ]
Посевная игла стерилизуется асептическим методом . [1] [2] [3] [7] Открытое пламя из мусоросжигательной печи, горелки Бунзена или спиртовой горелки используется для пламени вдоль кончика и длины иглы, которая должна контактировать с посевным материалом . [2] [3] Для облегчения манипуляций обычно держат иглу доминирующей рукой, как если бы вы держали в руках карандаш. Игла будет гореть под углом вниз через внутренний конус пламени, пока не станет докрасна. [1] Нисходящий угол минимизирует количество создаваемых микробных аэрозолей. [1] [2] [3]
Инокуляционные иглы необходимо стерилизовать до и после контакта с микробными формами жизни, чтобы гарантировать отсутствие загрязнения культуры, стерильных сред и окружающей среды. [1]
Перенос [ править ]
При посеве игла для посева сначала используется для переноса микробных форм жизни из культуры на иглу, которая будет использоваться в дальнейших процедурах посева. Источники инокулята включают бульонные культуры, наклонные культуры и культуры на чашках. [1] [2] [3] [5]
- Бульонная культура
Инокуляционная игла используется для переноса микроорганизмов из бульонной культуры путем использования вихревой мешалки для обеспечения однородной суспензии микроорганизмов в бульоне. [1] Затем к игле применяется асептический метод. После того, как игла обожжена и стерилизована, крышка культурального бульона будет снята рукой с иглы. Открытый конец бульонной культуры будет обжигаться, чтобы снизить риск заражения и образования аэрозолей. [2] [3]
Удерживая фиксированное положение иглы, культуральный бульон будет перемещаться вверх по игле до тех пор, пока кончик иглы не погрузится в воду. [3] Во время забора бульонной культуры игла и рука иглы не должны двигаться, чтобы предотвратить пружинящее действие. [3] [5] Перенос от бульона к игле завершается обжигом открытого конца бульонной культуры и закрытием крышки при сохранении неподвижности руки с иглой.
- Наклонная культура
При косом переносе культур игла для посева сначала обрабатывается асептическим методом путем обжига. Наклонный колпачок для культивирования затем удаляется и фиксируется рукой с иглой. Обжигание открытого конца скошенной культуры предотвратит загрязнение и образование аэрозолей. [2] [3]
Перенос происходит, когда кончик посевной иглы соприкасается с поверхностью агара скошенной культуры. Посевная игла при этом не должна двигаться. Наклонная культура агара будет перемещена вверх к игле, чтобы предотвратить толчки иглы. [1] [3] После завершения переноса от косой культуры на иглу открытый конец культуры обрабатывают пламенем, а колпачок заменяют.
- Пластинчатая культура
Инокуляционная игла используется для переноса микробных организмов из чашки с культурой в иглу путем предварительной стерилизации иглы для предотвращения загрязнения. Затем снимают крышку с чашки с агаром, чтобы игла могла проникнуть в микроорганизмы, культивируемые на чашке с агаром. Крышка удерживается парящей над чашкой для культивирования, чтобы предотвратить загрязнение из окружающей среды. [1]
Игла для посева после сжигания охлаждается на незасеянной области культуры на чашке с агаром. [1] Слишком большое количество тепла убьет посевной материал при прямом контакте с горящей иглой для посева. [1] Инокуляционная игла извлекается из агаровой культуры после получения небольшой колонии, а затем закрывается крышка чашки с агаром.
Прививка [ править ]
Посев микроорганизмов будет производиться сразу после переноса из культуры в иглу для посева. Посевной материал обычно вносят в бульонные культуры, наклонные культуры, культуры на чашках и колотые культуры. [1] [2] [3] [4] [5] [7]
- Бульонная культура
Инокуляционная игла используется для инокуляции стерильной бульонной культуры. Обжигание открытого конца бульона сохранит его стерильность. Бульон будет перемещаться к игле так, чтобы кончик иглы был погружен, сохраняя при этом исходное положение иглы. [1] Осторожное вращение иглы может способствовать засеиванию микроорганизмов из иглы в стерильный бульон. [1]
Затем инокулированная бульонная культура удаляется из иглы. К открытому концу бульонной культуры применяют асептические методы, чтобы предотвратить загрязнение, и иглу обжигают для стерилизации.
- Наклонная культура
Инокуляционная игла используется для инокуляции косой культуры в технике инокуляции рыбьего хвоста. [1] После переноса микроорганизмов из исходной микробной культуры на иглу для посева стерильная косая культура снимается. Открытый конец скошенной культуры без крышки затем обжигают. Наклон будет располагаться так, чтобы игла двигалась вверх до тех пор, пока кончик иглы для посева слегка не соприкоснется с базовой поверхностью стерильной среды. [1] [2] [4] Инокуляционная игла инокулирует стерильный агар путем манипулирования средой, так что кончик иглы задевает поверхность агара зигзагообразно. [1] Затем к извлеченной игле для посева применяют асептическую технику.
- Пластинчатая культура
Посев на пластинчатую культуру производится методом штриховки , чтобы получить штриховую пластину. [1] [2] [4] После подъема крышки так, чтобы она зависла над пластиной со стерильным агаром, игла для посева будет проходить по пластине в контролируемых направлениях. [1] Микробные аэрозоли могут образовываться при попадании наконечника посевного материала по сторонам чашки с агаром. [1] [2] [4] Затем иглу для посева извлекают из засеянной культуры чашки с агаром и обжигают.
- Культура колющих ударов
Инокуляционная игла - важный инструмент при инокуляции колотой культуры. [4] [7] Стерильный колпачок для культивирования удаляется, а открытый конец обжигается. Затем кончик иглы и ее длина проталкиваются в колющий материал и останавливаются, когда кончик иглы достигает 0,5 дюйма от дна колющего материала. [7] Игла для посева вынимается из среды в том же направлении и по тому же пути, что и в среду для укола, чтобы предотвратить эффект качания, который может нарушить культуру. [4] [7] Игла стерилизована пламенем.
См. Также [ править ]
- Посевная петля
- Штрих (микробиология)
- Микробиологическая культура
Галерея [ править ]
1
2
3
4
Ссылки [ править ]
- ^ a b c d e f g h i j k l m n o p q r s t u v ОБЩИЕ АСЕПТИЧЕСКИЕ ПЕРЕНОСЫ И МЕТОДЫ ПРИВИВКИ . С. 4–8.
- ^ Б с д е е г ч я J к л м н Дубей, RC (2014). Практично для класса XI (2-е изд.). С. Чанд Паблишинг. ISBN 978-81-219-2417-7.
- ^ Б с д е е г ч я J к л м Махешвари, DK (2002). Лаборатория микробиологии: основные правила и требования (2-е изд.). С. Чанд Паблишинг. п. 6.
- ^ Б с д е е г ч Parija, Subhash Chandra (2012). Учебник микробиологии и иммунологии (2-е изд.). Эльзевир. п. 38. ISBN 978-81-312-2810-4.
- ^ a b c d e «Отбор проб и посев» . Руководство лаборатории клеточной биологии . Руководство лаборатории клеточной биологии Hendrix College и руководство по безопасности . Проверено 28 октября +2016 .
- ^ Ørskov, J. (17 января 1992). «Метод выделения бактерий в чистой культуре из отдельных клеток и процедура прямого отслеживания роста бактерий на твердой среде». Журнал бактериологии . 7 (6): 547–548.
- ^ a b c d e f Введение в микробиологию . Коллекция американских типовых культур. 2015. С. 10–11, 26, 28, 30–31.
