4-Нитрофенол (также называемый п -нитрофенолом или 4-гидроксинитробензолом ) представляет собой фенольное соединение, имеющее нитрогруппу в положении, противоположном гидроксильной группе бензольного кольца.
4-Нитрофенол имеет две полиморфные модификации в кристаллическом состоянии. Альфа-форма представляет собой бесцветные столбики, нестабильные при комнатной температуре и устойчивые к солнечному свету. Бета-форма представляет собой желтые столбики, стабильна при комнатной температуре и постепенно краснеет при облучении солнечным светом. Обычно 4-нитрофенол существует в виде смеси этих двух форм.
4-Нитрофенол можно получить нитрованием фенола разбавленной азотной кислотой при комнатной температуре. В результате реакции образуется смесь 2-нитрофенола и 4-нитрофенола.
4-Нитрофенол можно использовать в качестве индикатора pH . Раствор 4-нитрофенола кажется бесцветным при pH ниже 5,4 и желтым при pH выше 7,5. [3] Это свойство изменения цвета делает это соединение полезным в качестве индикатора pH . Желтый цвет формы 4-нитрофенолята (или 4-нитрофеноксида ) обусловлен максимумом поглощения при 405 нм (ε = от 18,3 до 18,4 мМ -1 см -1 в сильной щелочи). [4] Напротив, 4-нитрофенол имеет слабое поглощение при 405 нм (ε = 0,2 мМ -1 см -1 ). [4]Изобестическая точка для 4-нитрофенола/4-нитрофеноксида находится при 348 нм с ε = 5,4 мМ -1 см -1 . [5]
В лаборатории его используют для выявления наличия активности щелочной фосфатазы путем гидролиза PNPP . В основных условиях присутствие гидролитических ферментов окрашивает реакционный сосуд в желтый цвет. [7]
4-Нитрофенол является продуктом ферментативного расщепления нескольких синтетических субстратов, таких как 4-нитрофенилфосфат (используется в качестве субстрата для щелочной фосфатазы ), 4-нитрофенилацетат (для карбоангидразы ), 4-нитрофенил-β- D -глюкопиранозид и другие производные сахара, которые используются для анализа различных ферментов гликозидаз . Количества 4-нитрофенола, продуцируемого конкретным ферментом в присутствии соответствующего субстрата, можно измерить с помощью спектрофотометра при длине волны 405 нм или около нее и использовать в качестве косвенного измерения уровня активности фермента в образце.