Галактозидазы
Из Википедии, свободной энциклопедии
  (Перенаправлено с Галактозидазы )
Перейти к навигации Перейти к поиску

Галактозидаз являются ферменты ( гликозид гидролазы ) , которые катализируют на гидролиз из галактозидов в моносахариды .

Галактозиды можно разделить на альфа или бета. Если галактозид классифицируется как альфа-галактозид, фермент называется альфа-галактозидазой и отвечает за катализатор гидролиза субстратов, содержащих α-галактозидные остатки, таких как гликосфинголипиды или гликопротеины . [1] С другой стороны, если это бета-галактозид, он называется бета-галактозидазой и отвечает за расщепление дисахаридной лактозы на ее моносахаридные компоненты, глюкозу и галактозу. [2] Обе разновидности галактозидазы относятся к категории Номер ЭК 3.2.1.

Две рекомбинантные формы альфа-галактозидазы называются агалсидазой альфа ( МНН ) и агалсидазой бета ( МНН ). Отсутствие активности альфа-галактозидазы в лейкоцитах было связано с болезнью Фабри . [3]

Галактозидазы имеют множество применений, включая производство пребиотиков , биосинтез трансгалактозилированных продуктов и удаление лактозы.

B-галактозидаза составляет основу lacz-оперона бактерий, который может использоваться для контроля экспрессии генов.

Использует

B-галактозидазу можно использовать для отслеживания эффективности бактериальной трансформации с помощью рекомбинантной плазмиды в процессе, называемом скринингом синего / белого цвета. B-галактозидаза состоит из 4 идентичных полипептидных цепей, т.е. имеет 4 идентичные субъединицы. Когда B-галактозидаза разделена на 2 фрагмента, она обладает уникальным свойством восстановления ферментативной активности при повторном соединении неактивных фрагментов. [4]В процессе, называемом альфа-комплементацией, один из фрагментов (омега) кодируется частью гена оперона lac, который находится в хромосоме бактерий, в то время как другой фрагмент (альфа) кодируется другой частью. гена, обнаруженного в плазмиде. только когда экспрессируются обе части гена, образуются как омега-, так и альфа-фрагменты. Когда присутствуют оба фрагмента, они собираются вместе, чтобы восстановить активность B-галактозидазы. Однако, помещая целевой ген в локус, ответственный за кодирование альфа-фрагмента, можно отслеживать присутствие желаемого гена в плазмиде. Когда целевой ген присутствует, ген альфа-фрагмента будет неактивным, и альфа-фрагмент не будет производиться. В этом случае B-галактозидаза не будет активна.Когда целевой ген не обнаружен в векторе, ген альфа-фрагмента будет активен, продуцируя альфа-фрагмент и позволяя B-галактозидазе получить свою активность. Для отслеживания активности B-галактозидазы используется бесцветный аналог лактозы X-gal. Гидролиз X-gal с помощью B-галактозидазы дает галактозу, соединение синего цвета. Следовательно, когда бактерии трансформируются рекомбинантной плазмидой, B-галактозидаза неактивна и колонии выглядят белыми, но когда бактерии трансформируются исходной плазмидой, в которой отсутствует целевой ген, B-галактозидаза активна, и колонии выглядят синими.Гидролиз X-gal с помощью B-галактозидазы дает галактозу, соединение синего цвета. Следовательно, когда бактерии трансформируются рекомбинантной плазмидой, B-галактозидаза неактивна и колонии выглядят белыми, но когда бактерии трансформируются исходной плазмидой, в которой отсутствует целевой ген, B-галактозидаза активна, и колонии выглядят синими.Гидролиз X-gal с помощью B-галактозидазы дает галактозу, соединение синего цвета. Следовательно, когда бактерии трансформируются рекомбинантной плазмидой, B-галактозидаза неактивна и колонии выглядят белыми, но когда бактерии трансформируются исходной плазмидой, в которой отсутствует целевой ген, B-галактозидаза активна, и колонии выглядят синими.[5]

  1. ^ Король, Роберт C .; Маллиган, Памела К .; Стэнсфилд, Уильям Д. Словарь генетики (8-е изд.) .
  2. ^ Король, Роберт C .; Маллиган, Памела К .; Стэнсфилд, Уильям Д. Словарь генетики (8-е изд.). Издательство Оксфордского университета. ISBN 9780199376865.
  3. Перейти ↑ Kint , JA (1970-02-27). «Болезнь Фабри: дефицит альфа-галактозидазы». Наука . 167 (3922): 1268–1269. Bibcode : 1970Sci ... 167.1268K . DOI : 10.1126 / science.167.3922.1268 . ISSN 0036-8075 . PMID 5411915 .  
  4. ↑ Брум, Энн-Мари; Бхавсар, Нихир; Рамамурти, Гопал; Ньютон, Гейл; Базилион, Джеймс (весна 2017 г.). «Расширение полезности комплементации β-галактозидазы: по частям» . Молекулярная фармацевтика . 7 (1): 60–74. DOI : 10.1021 / mp900188e . PMC 2835542 . PMID 19899815 .  
  5. ^ Кларк, Дэвид; Паздерник, Нанетт (2013). Молекулярная биология . Оксфорд, Великобритания: Эльзевир. п. 201. ISBN 9780123785947.

внешняя ссылка

  • Галактозидазы в Национальных медицинских предметных рубриках США (MeSH)
Получено с https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Galactosidases&oldid=1001231374 .
Contribute a better translation