Гомогенизация в клеточной биологии или молекулярной биологии - это процесс, при котором различные фракции биологического образца становятся равными по составу. Это может быть признак заболевания в гистопатологии или преднамеренный процесс исследования: гомогенизированный образец имеет одинаковый состав во всем, так что удаление фракции не изменяет общий молекулярный состав оставшегося образца и идентично фракции. удаленный. За индуцированной гомогенизацией в биологии часто следует молекулярная экстракция и различные аналитические методы, включая ELISA и вестерн-блоттинг. [1]
Методы [ править ]
Гомогенизацию ткани в растворе часто проводят одновременно с лизисом клеток . Однако для предотвращения лизиса ткань (или набор клеток, например, из клеточной культуры ) можно хранить при температуре немного выше нуля, чтобы предотвратить автолиз , и в изотоническом растворе для предотвращения осмотического повреждения. [2]
Если возможно замораживание ткани, криогомогенизация может быть проведена в «сухих» условиях и часто является методом выбора, когда желательно собрать несколько различных молекулярных классов (например, как белок, так и РНК ) из одного образца или комбинированного набора образцов. образцы, или когда желательно длительное хранение части образца. Криогомогенизация может быть проведена с использованием переохлажденной ступки и пестика (классический подход) или ткань может быть гомогенизирована путем измельчения ее в мелкий порошок в чистом пластиковом пакете, опирающемся на переохлажденный твердый металлический блок [3] (более поздняя разработка и более эффективная техника).
Гомогенизация под высоким давлением используется для выделения содержимого грамположительных бактерий , поскольку эти клетки исключительно устойчивы к лизису и могут сочетаться с высокотемпературной стерилизацией. [4]
Гомогенизация Даунса - это метод, подходящий для мягких тканей млекопитающих, в то время как лизис клеток млекопитающих также был продемонстрирован с помощью центрифугирования. [5]
Ссылки [ править ]
- Перейти ↑ Schmidt SD, Nixon RA, Mathews PM (2012). «Обработка тканей перед анализом белков и метаболитов, связанных с болезнью Альцгеймера, включая Aβ». Методы Мол. Биол . Методы молекулярной биологии. 849 : 493–506. DOI : 10.1007 / 978-1-61779-551-0_33 . ISBN 978-1-61779-550-3. PMID 22528111 .
- ^ Чанг, Та-Юань; Лиманек, Джеймс С .; Чанг, Кэтрин CY (1 сентября 1981 г.). «Простая и эффективная процедура для быстрой гомогенизации культивируемых клеток животных, выращенных в монослое». Аналитическая биохимия . 116 (2): 298–302. DOI : 10.1016 / 0003-2697 (81) 90360-2 .
- ^ фон Циглер, Лукас М .; Saab, Bechara J .; Мансуй, Изабель М. (27 марта 2013 г.). «Простой и быстрый метод криогомогенизации тканей, позволяющий извлекать самые разные молекулы». Журнал методов неврологии . 216 (2): 137–41. DOI : 10.1016 / j.jneumeth.2013.03.005 . PMID 23541735 .
- ^ Wuytack, Элька Y; Дилс, Энн MJ; Михилс, Крис В. (1 августа 2002 г.). «Бактериальная инактивация путем гомогенизации под высоким давлением и высоким гидростатическим давлением». Международный журнал пищевой микробиологии . 77 (3): 205–212. DOI : 10.1016 / S0168-1605 (02) 00054-5 .
- ^ Сингх, Каустуб; Гупта, Анкур; Бюхнер, Абель Джон; Ибис, Фатьма; Пронк, Иоахим В .; Тэм, Дэниел; Эрал, Хусейн Бурак (1 июля 2019 г.). «Анализ центробежной гомогенизации и ее применения для эмульгирования и механического лизиса клеток». Журнал коллоидной и интерфейсной науки . 547 : 127–135. DOI : 10.1016 / j.jcis.2019.03.036 .
