Гистологические (соединение трех греческих слов: ἱστός histos «ткань», πάθος пафоса «страдание», и -λογία -logia «исследование») относится к микроскопическому изучению ткани с целью изучения проявлений заболевания . В частности, в клинической медицине, гистопатология относится к рассмотрению биопсии или хирургического образца с помощью патологоанатома , после того, как образец был обработан и гистологические срезы были помещены на стеклянные слайды. Напротив, цитопатология исследует свободные клетки или тканевые микрофрагменты (как «клеточные блоки»).
Сбор тканей [ править ]
Гистопатологическое исследование тканей начинается с хирургического вмешательства , биопсии или вскрытия . Ткань удаляется из тела или растения , а затем, часто после экспертного вскрытия в свежем виде, помещается в фиксатор, который стабилизирует ткани, чтобы предотвратить гниение . Наиболее распространенным фиксатором является формалин (10% нейтральный буферный формальдегид в воде).
Подготовка к гистологии [ править ]
Затем ткань подготавливают для просмотра под микроскопом с использованием химической фиксации или замороженного среза.
Если предоставляется большой образец, например, в результате хирургической процедуры, патолог смотрит на образец ткани и выбирает ту часть, которая с наибольшей вероятностью даст полезный и точный диагноз - эта часть удаляется для исследования в процессе, обычно известном как сбор или разделение. Образцы большего размера вырезаются для правильного размещения их анатомических структур в кассете. Некоторые образцы (особенно биопсийные) можно предварительно замаскировать в агар, чтобы обеспечить правильную ориентацию ткани в кассете, затем в блоке и затем на предметном стекле диагностической микроскопии. Затем его помещают в пластиковую кассету для большей части остального процесса. [ необходима цитата ]
Химическая фиксация [ править ]
Помимо формалина использовались и другие химические фиксаторы. Но с появлением иммуногистохимического (ИГХ) окрашивания и диагностического тестирования молекулярной патологии на этих образцах формалин стал стандартным химическим фиксатором в диагностической гистопатологии человека. Время фиксации для очень маленьких образцов короче, и существуют стандарты в диагностической гистопатологии человека.
Обработка [ править ]
Вода удаляется из пробы поэтапно за счет использования спирта с возрастающей концентрацией . [1] Ксилол используется на последней стадии дегидратации вместо спирта - это связано с тем, что воск, используемый на следующем этапе, растворяется в ксилоле, где он не находится в спирте, что позволяет воску проникать (инфильтрировать) образец. [1] Этот процесс обычно автоматизирован и выполняется в одночасье. Образец, пропитанный воском, затем переносят в отдельный контейнер для заделки образца (обычно металлический). Наконец, вокруг образца в контейнере вводится расплавленный воск, который охлаждается до затвердевания, чтобы поместить его в восковой блок. [1] Этот процесс необходим для получения правильно ориентированного образца, достаточно прочного для получения тонких микротомных секций для предметного стекла.
После того, как блок, залитый воском, будет готов, из него будут вырезаны секции и обычно помещаются в плавание на поверхности водяной ванны, которая распределяет секцию. Обычно это делается вручную и представляет собой квалифицированную работу (гистотехнолог), когда персонал лаборатории выбирает, какие части восковой ленты микротома с образцом помещать на предметные стекла. Несколько слайдов обычно готовятся на разных уровнях блока. После этого установленное предметное стекло тонкого среза окрашивают и на него надевают защитное покровное стекло. Для обычных пятен обычно используется автоматический процесс; но редко используемые пятна часто наносятся вручную. [1]
Обработка замороженного раздела [ править ]
Второй метод обработки гистологии называется обработкой замороженных срезов. Это высокотехнологичный научный метод, выполняемый обученным ученым-гистологом. В этом методе ткань замораживается и тонко нарезается с помощью микротома, установленного в холодильной машине с пониженной температурой, называемой криостатом.. Тонкие замороженные срезы помещают на предметное стекло, сразу и на короткое время фиксируют жидким фиксатором и окрашивают с использованием тех же методов окрашивания, что и традиционные срезы, залитые воском. Преимущества этого метода - быстрое время обработки, меньшая потребность в оборудовании и меньшая потребность в вентиляции в лаборатории. Недостаток - плохое качество финального слайда. Он используется при интраоперационной патологии для определений, которые могут помочь в выборе следующего шага операции во время этого хирургического сеанса (например, для предварительного определения четкости края резекции опухоли во время операции).
Окрашивание обработанных гистологических препаратов [ править ]
Это может быть сделано для слайдов, обработанных химической фиксацией, или для слайдов замороженных срезов. Чтобы увидеть ткань под микроскопом, срезы окрашивают одним или несколькими пигментами . Целью окрашивания является выявление клеточных компонентов; Контрастные пятна используются для обеспечения контраста.
Наиболее часто используемое окрашивание в гистологии - это комбинация гематоксилина и эозина (часто сокращенно H&E). Гематоксилин окрашивает ядра в синий цвет , а эозин окрашивает цитоплазму и матрикс внеклеточной соединительной ткани в розовый цвет . Существуют сотни различных других методов, которые использовались для выборочного окрашивания клеток. Другие соединения, используемые для окрашивания срезов тканей, включают сафранин , Oil Red O , красный конго , соли серебра и искусственные красители. Гистохимияотносится к науке об использовании химических реакций между лабораторными химическими веществами и компонентами тканей. Обычно применяемый гистохимический метод - это реакция берлинской синей Перлза , используемая для демонстрации отложений железа при таких заболеваниях, как гемохроматоз . [2]
Недавно антитела стали использовать для окрашивания определенных белков , липидов и углеводов . Этот метод, получивший название иммуногистохимии , значительно расширил возможности специфической идентификации категорий клеток под микроскопом. Другие передовые методы включают гибридизацию in situ для идентификации конкретной ДНК или РНК.молекулы. Эти методы окрашивания антител часто требуют использования гистологии замороженных срезов. Эти процедуры, описанные выше, также выполняются в лаборатории под тщательным наблюдением и точностью обученным медицинским лабораторным ученым (гистологом). Цифровые камеры все чаще используются для получения гистопатологических изображений.
Интерпретация [ править ]
Гистологические препараты исследуются под микроскопом патологом , квалифицированным медицинским специалистом, прошедшим признанную программу обучения. Этот медицинский диагноз формулируется как отчет о патологии, в котором описываются гистологические данные и мнение патолога. В случае рака это диагностика тканей, необходимая для большинства протоколов лечения. При удалении рака патологоанатом укажет, очищен ли хирургический край или он задействован (остаточный рак остался позади). Это делается с использованием метода обработки хлеба или метода CCPDMA .Микроскопические визуальные артефакты потенциально могут вызвать неправильный диагноз образцов.
При инфаркте миокарда [ править ]
После инфаркта миокарда (сердечного приступа) гистопатология не обнаруживается в первые ~ 30 минут. Единственный возможный признак первых 4 часов - это волнистость волокон на границе. Однако позже начинается коагуляционный некроз с отеком и кровоизлиянием. Через 12 часов можно увидеть кариопикноз.и гиперэозинофилия миоцитов с некрозом полосы сокращения по краям, а также началом инфильтрации нейтрофилов. Через 1–3 дня продолжается коагуляционный некроз с потерей ядер и полосок и повышенной инфильтрацией нейтрофилов в интерстиций. До конца первой недели после инфаркта начинается распад мертвых мышечных волокон, некроз нейтрофилов и начало удаления мертвых клеток макрофагами на границе, что увеличивает количество последующих дней. Через неделю также начинается формирование грануляционной ткани по краям, которая созревает в течение следующего месяца, увеличивается отложение коллагена и снижается клеточность до тех пор, пока рубцевание миокарда не станет полностью зрелым примерно через 2 месяца после инфаркта. [3]
См. Также [ править ]
- Анатомическая патология
- Молекулярная патология
- Процедура замороженного сечения
- Медицинский технолог
- Лазерная микродиссекция
- Список патологов
Ссылки [ править ]
- ^ a b c d "Добро пожаловать на mwap.co.uk - Justhost.com" .
- ^ "Perl - Red Blood Cell - Staining" . Scribd .
- ↑ Глава 11 в: Митчелл, Ричард Шеппард; Кумар, Винай; Аббас, Абул К .; Фаусто, Нельсон (2007). Базовая патология Роббинса . Филадельфия: Сондерс. ISBN 978-1-4160-2973-1. 8-е издание.
Внешние ссылки [ править ]
 | Викискладе есть медиафайлы по гистопатологии . |
- Виртуальный курс гистологии - Цюрихский университет (немецкий, английская версия в стадии подготовки)
- Гистопатология шейки матки - цифровой атлас (IARC Screening Group)
- Виртуальный слайд-бокс по гистопатологии - Университет Айовы
