Из Википедии, бесплатной энциклопедии
  (Перенаправлено с вирусных векторов )
Перейти к навигации Перейти к поиску

Вирусные векторы - это инструменты, обычно используемые молекулярными биологами для доставки генетического материала в клетки . Этот процесс может происходить внутри живого организма ( in vivo ) или в культуре клеток ( in vitro ). Вирусы развили специализированные молекулярные механизмы для эффективного переноса своих геномов внутри клеток, которые они заражают. Доставка генов или других генетических материалов вектором называется трансдукцией, а инфицированные клетки описываются как трансдуцированные. Молекулярные биологи впервые использовали этот механизм в 1970-х годах. Пол Бергиспользовали модифицированный вирус SV40, содержащий ДНК бактериофага λ, для заражения клеток почек обезьяны, поддерживаемых в культуре. [1]

Помимо использования в исследованиях молекулярной биологии, вирусные векторы используются для генной терапии и разработки вакцин .

Ключевые свойства вирусного вектора [ править ]

Вирусные векторы адаптированы к их конкретным приложениям, но, как правило, обладают несколькими ключевыми свойствами.

  • Безопасность : хотя вирусные векторы иногда создаются из патогенных вирусов, они модифицируются таким образом, чтобы минимизировать риск обращения с ними. Обычно это связано с удалением части вирусного генома, критической для репликации вируса . Такой вирус может эффективно инфицировать клетки, но после того, как инфекция произошла, требуется, чтобы вирус-помощник предоставил недостающие белки для производства новых вирионов .
  • Низкая токсичность : вирусный вектор должен оказывать минимальное влияние на физиологию инфицированной клетки.
  • Стабильность : некоторые вирусы генетически нестабильны и могут быстро перестраивать свои геномы. Это пагубно сказывается на предсказуемости и воспроизводимости работы, проводимой с использованием вирусного вектора, и избегается при их разработке.
  • Специфичность по типу клеток : большинство вирусных векторов сконструированы так, чтобы инфицировать как можно более широкий диапазон типов клеток . Однако иногда предпочтительнее обратное. Вирусный рецептор можно модифицировать для нацеливания вируса на конкретный вид клетки. Модифицированные таким образом вирусы называются псевдотипами .
  • Идентификация : вирусным векторам часто присваиваются определенные гены, которые помогают определить, какие клетки приняли вирусные гены. Эти гены называются маркерами . Обычный маркер - устойчивость к определенному антибиотику. Затем клетки могут быть легко изолированы, поскольку те, которые не захватили гены вирусных векторов, не обладают устойчивостью к антибиотикам и поэтому не могут расти в культуре с присутствием соответствующего антибиотика.

Приложения [ править ]

Фундаментальные исследования [ править ]

Первоначально вирусные векторы были разработаны как альтернатива трансфекции « голой» ДНК для экспериментов по молекулярной генетике . По сравнению с традиционными методами трансфекции (такими как осаждение фосфатом кальция ), трансдукция может гарантировать, что почти 100% клеток инфицированы, без серьезного воздействия на жизнеспособность клеток. [ необходима цитата ] Кроме того, некоторые вирусы интегрируются в геном клетки, способствуя стабильной экспрессии.

Белковые гены , кодирующие могут быть выражены с помощью вирусных векторов, как правило , чтобы изучить функцию конкретного белка. Вирусные векторы, особенно ретровирусы, стабильно экспрессирующие маркерные гены, такие как GFP , широко используются для постоянной маркировки клеток для отслеживания их и их потомства, например, в экспериментах по ксенотрансплантации , когда клетки, инфицированные in vitro , имплантируются животному-хозяину.

Встраивание гена , которое может быть выполнено с помощью вирусных векторов, дешевле в выполнении, чем нокаут гена . Но поскольку подавление гена , эффект, который может быть предназначен для вставки гена, иногда является неспецифическим и оказывает нецелевое воздействие на другие гены, он, следовательно, дает менее надежные результаты. Векторы животных-хозяев также играют важную роль [ требуется пояснение ] .

Генная терапия [ править ]

Основная статья: Генная терапия

Генная терапия - это метод исправления дефектных генов, ответственных за развитие болезни. В будущем, генная терапия может обеспечить способ лечения генетических заболеваний , такие как тяжелый комбинированный иммунодефицит , муковисцидоз или даже гемофилии А . Поскольку эти заболевания являются результатом мутаций в последовательности ДНК определенных генов, в исследованиях генной терапии использовались вирусы для доставки немутантных копий этих генов в клетки тела пациента. Генная терапия добилась огромных успехов в лабораторных условиях. Однако необходимо преодолеть несколько проблем вирусной генной терапии, прежде чем она получит широкое распространение. Иммунная реакцияк вирусам не только препятствует доставке генов к клеткам-мишеням, но может вызвать серьезные осложнения для пациента. В одном из первых испытаний генной терапии в 1999 году это привело к смерти Джесси Гелсингера , которого лечили с помощью аденовирусного вектора. [2]

Некоторые вирусные векторы, например гамма-ретровирусы , вставляют свои геномы в кажущееся случайным место на одной из хромосом хозяина , что может нарушить функцию клеточных генов и привести к раку. В испытании генной терапии ретровирусом тяжелого комбинированного иммунодефицита , проведенном в 2002 году, у четырех пациентов в результате лечения развился лейкоз; [3] трое пациентов выздоровели после химиотерапии. [4] Векторы на основе аденоассоциированного вируса намного безопаснее в этом отношении, поскольку они всегда интегрируются в одном и том же месте в геноме человека, что позволяет применять их при различных заболеваниях, таких как болезнь Альцгеймера . [5]

Вакцины [ править ]

Живой вакцинный вектор представляет собой вакцина , которая использует организм ( как правило , вирус или бактерию) , который не вызывает заболевания для транспортировки патогенных генов в организм для того , чтобы стимулировать иммунный ответ . [6] Вирусы, экспрессирующие патогенные белки, в настоящее время разрабатываются в качестве вакцин против этих патогенов, исходя из тех же соображений, что и ДНК-вакцины . Гены , используемые в таких вакцин, как правило , антиген - кодирующих поверхностные белки из патогенного организма. Затем они вставляются в геном непатогенного организма,где они экспрессируются на поверхности организма и могут вызывать иммунный ответ. [ требуется разъяснение ]

В отличие от аттенуированных вакцин , вирусные векторные вакцины лишены других генов патогенов, необходимых для репликации, поэтому заражение патогеном невозможно. Аденовирусы активно развиваются как вакцинные векторы.

Доставка лекарств [ править ]

Штамм вируса оспы канареек, модифицированный для переноса кошачьего интерлейкина-2 , используется для лечения кошек с фибросаркомой . [7]

Типы [ править ]

Ретровирусы [ править ]

Основная статья: Ретровирусы

Ретровирусы - одна из опор современных подходов к генной терапии. Рекомбинантные ретровирусы, такие как вирус лейкемии мышей Молони, обладают способностью стабильно интегрироваться в геном хозяина. Они содержат обратную транскриптазу для создания ДНК-копии генома РНК и интегразу, которая позволяет интегрироваться в геном хозяина . Они использовались в ряде одобренных FDA клинических испытаний, таких как исследование SCID-X1 . [8]

Ретровирусные векторы могут быть репликационно-компетентными или репликационно-дефектными. Векторы с дефектом репликации являются наиболее распространенным выбором в исследованиях, поскольку у вирусов кодирующие области для генов, необходимых для дополнительных раундов репликации и упаковки вириона, были заменены другими генами или удалены. Эти вирусы способны инфицировать свои клетки-мишени и доставлять свою вирусную нагрузку, но затем не могут продолжать типичный литический путь, который приводит к лизису и гибели клеток.

Напротив, компетентные к репликации вирусные векторы содержат все необходимые гены для синтеза вирионов и продолжают размножаться после заражения. Поскольку вирусный геном для этих векторов намного длиннее, длина фактически вставленного интересующего гена ограничена по сравнению с возможной длиной вставки для векторов, дефектных по репликации. В зависимости от вирусного вектора типичная максимальная длина допустимой вставки ДНК в вирусном векторе с дефектом репликации обычно составляет около 8-10 килобайт. [ необходима проверка ] [9] Хотя это ограничивает введение многих геномных последовательностей, большинство последовательностей кДНК все еще могут быть адаптированы.

Основной недостаток использования ретровирусов, таких как ретровирус Молони, заключается в необходимости активного деления клеток для трансдукции . В результате клетки, такие как нейроны , очень устойчивы к инфекции и трансдукции ретровирусами.

Есть опасения, что инсерционный мутагенез из-за интеграции в геном хозяина может привести к раку или лейкемии . Эта проблема оставалась теоретической до тех пор, пока генная терапия десяти пациентов с SCID-X1 с использованием вируса мышиного лейкоза Молони [10] не привела к двум случаям лейкемии, вызванной активацией онкогена LMO2 из-за соседней интеграции вектора. [11]

Лентивирусы [ править ]

Основная статья: Лентивирус
Упаковка и трансдукция лентивирусным вектором.

Лентивирусы - это подкласс ретровирусов. Иногда их используют в качестве векторов для генной терапии благодаря их способности интегрироваться в геном неделящихся клеток, что является уникальной особенностью лентивирусов, поскольку другие ретровирусы могут инфицировать только делящиеся клетки. Вирусный геном в форме РНК подвергается обратной транскрипции, когда вирус входит в клетку для производства ДНК , которая затем вставляется в геном в случайном месте (недавние открытия фактически предполагают, что внедрение вирусной ДНК не является случайным, а направлено на специфические активные гены и связанные с организацией генома [12] ) ферментом вирусной интегразы . Вектор, который теперь называется провирусом , остается в геноме и передается потомству клетки при делении. Пока не существует методов определения места интеграции, которые могут создать проблему. Провируса может нарушить функцию клеточных генов и привести к активации онкогенов , способствующим развитию от рака , который поднимает проблемы для возможного применения лентивирусов в генной терапии. Однако исследования показали, что лентивирусные векторы имеют меньшую тенденцию к интеграции в местах, потенциально вызывающих рак, чем гамма-ретровирусные векторы. [13]В частности, одно исследование показало, что лентивирусные векторы не вызывали ни увеличения заболеваемости опухолями, ни более раннего возникновения опухолей у линии мышей с гораздо более высокой частотой возникновения опухолей. [14] Более того, клинические испытания, в которых использовались лентивирусные векторы для доставки генной терапии для лечения ВИЧ, не показали увеличения мутагенных или онкологических явлений. [15]

По соображениям безопасности лентивирусные векторы никогда не несут гены, необходимые для их репликации. Для получения лентивирус, несколько плазмид , которые трансфицируют в так называемой упаковочной клеточной линии , обычно НЕК 293 . Одна или несколько плазмид, обычно называемых упаковывающими плазмидами, кодируют белки вириона , такие как капсид и обратная транскриптаза . Другая плазмида содержит генетический материал, который должен быть доставлен вектором. Он транскрибируется с образованием вирусного генома с одноцепочечной РНК и маркируется наличием ψ(psi) последовательность. Эта последовательность используется для упаковки генома в вирион.

Аденовирусы [ править ]

Основная статья: Аденовирус

В отличие от лентивирусов, аденовирусная ДНК не интегрируется в геном и не реплицируется при делении клеток. Это ограничивает их использование в фундаментальных исследованиях, хотя аденовирусные векторы все еще используются в экспериментах in vitro, а также in vivo . [16] Их основное применение - генная терапия и вакцинация . Поскольку люди обычно контактируют с аденовирусами , которые вызывают респираторные, желудочно-кишечные и глазные инфекции, у большинства пациентов уже выработаны нейтрализующие антитела, которые могут инактивировать вирус до того, как он достигнет клетки-мишени. Чтобы решить эту проблему, ученые в настоящее время исследуют аденовирусы. которые заражают разные виды, к которым у людей нет иммунитета.

Аденоассоциированные вирусы [ править ]

Основная статья: Аденоассоциированный вирус

Аденоассоциированный вирус (AAV) - это небольшой вирус, поражающий людей и некоторые другие виды приматов. В настоящее время не известно, что AAV вызывает заболевание и вызывает очень слабый иммунный ответ. AAV может инфицировать как делящиеся, так и неделящиеся клетки и может включать свой геном в геном клетки-хозяина. Более того, AAV в основном остается эписомальным (реплицируется без включения в хромосому); выполняя долгое и стабильное выражение. [17] Эти особенности делают AAV очень привлекательным кандидатом для создания вирусных векторов для генной терапии. [1] Однако AAV может передавать только до 5 КБ, что значительно меньше по сравнению с исходной емкостью AAV. [17]

Кроме того, из-за его потенциального использования в качестве вектора для генной терапии исследователи создали измененный AAV, названный самокомплементарным аденоассоциированным вирусом (scAAV). В то время как AAV упаковывает одну цепь ДНК и требует процесса синтеза второй цепи, scAAV упаковывает обе цепи, которые отжигаются вместе с образованием двухцепочечной ДНК. Пропуск синтеза второй цепи scAAV обеспечивает быструю экспрессию в клетке. [18] В остальном scAAV обладает многими характеристиками своего аналога AAV.

Вирусы растений [ править ]

Основная статья: Вирус растений

Вирусы растений можно использовать для создания вирусных векторов , инструментов, обычно используемых для доставки генетического материала в клетки растений ; они также являются источниками биоматериалов и нанотехнологических устройств. [19] [20] Вирус табачной мозаики (TMV) - первый обнаруженный вирус. Вирусные векторы на основе вируса табачной мозаики включают векторы технологий экспрессии растений magnICON® и TRBO. [19]

Гибриды [ править ]

Гибридные векторы - это векторные вирусы , которые с помощью генной инженерии обладают качествами более чем одного вектора. Вирусы изменяют, чтобы избежать недостатков типичных вирусных векторов, которые могут иметь ограниченную нагрузочную способность, иммуногенность, генотоксичность и не поддерживать долгосрочную адекватную трансгенную экспрессию . За счет замены нежелательных элементов желаемыми способностями гибридные векторы могут в будущем превзойти стандартные векторы трансфекции с точки зрения безопасности и терапевтической эффективности. [21]

Проблемы в приложении [ править ]

Выбор вирусного вектора для доставки генетического материала в клетки сопряжен с некоторыми логистическими проблемами. Существует ограниченное количество вирусных векторов, доступных для терапевтического использования. Любой из этих нескольких вирусных векторов может вызвать в организме развитие иммунного ответа, если вектор рассматривается как чужеродный захватчик. [22] [23] После использования вирусный вектор не может быть эффективно использован снова у пациента, потому что он будет распознаваться организмом. Если вакцина или генная терапия не пройдут клинические испытания , вирус не может быть снова использован у пациента для другой вакцины или генной терапии в будущем.

У пациента также может присутствовать ранее существовавший иммунитет против вирусного вектора, что делает терапию неэффективной для этого пациента. [22] [24] Поскольку праймирование вакциной « голая ДНК» и усиление вирусным вектором приводит к устойчивому иммунному ответу с помощью еще неопределенного механизма (ов), несмотря на ранее существовавший иммунитет к вирусному вектору, эта стратегия вакцинации может противодействовать этой проблеме. [25] Однако этот метод может стать причиной дополнительных расходов и препятствий в процессе распространения вакцины. Существующий ранее иммунитет также можно поставить под сомнение, увеличив дозу вакцины или изменив способ вакцинации . [26]

Некоторые недостатки вирусных векторов (такие как генотоксичность и низкая трансгенная экспрессия) можно преодолеть с помощью гибридных векторов .

См. Также [ править ]

  • Вирусная трансформация

Ссылки [ править ]

  1. ^ а б Гофф С.П., Берг П. (декабрь 1976 г.). «Создание гибридных вирусов, содержащих сегменты ДНК фага SV40 и лямбда, и их размножение в культивируемых клетках обезьян». Cell . 9 (4 PT 2): 695–705. DOI : 10.1016 / 0092-8674 (76) 90133-1 . PMID  189942 . S2CID  41788896 .
  2. Перейти ↑ Beardsley T (февраль 2000 г.). «Трагическая смерть омрачает будущее инновационного метода лечения» . Scientific American .
  3. ↑ McDowell N (15 января 2003 г.). «Новый случай рака останавливает испытания генной терапии в США» . Новый ученый .
  4. ^ Hacein-Bey-Abina S, Hauer J, Lim A, Picard C, Wang GP, Berry CC и др. (Июль 2010 г.). «Эффективность генной терапии Х-сцепленного тяжелого комбинированного иммунодефицита» . Медицинский журнал Новой Англии . 363 (4): 355–64. DOI : 10.1056 / NEJMoa1000164 . PMC 2957288 . PMID 20660403 .  
  5. ^ Sasmita АО (апрель 2019). «Текущие исследования вирусно-опосредованного переноса генов для лечения болезни Альцгеймера». Обзоры биотехнологии и генной инженерии . 35 (1): 26–45. DOI : 10.1080 / 02648725.2018.1523521 . PMID 30317930 . S2CID 52978228 .  
  6. ^ «Вакцина с живым вектором» . Американский институт инженеров-химиков. Архивировано 3 февраля 2021 года . Источник 2021-02-03 .
  7. ^ «Резюме EPAR для общественности: Oncept IL-2 (рекомбинантный вирус оспы канареек с интерлейкином-2 кошек) [EMA / 151380/2013 EMEA / V / C / 002562]» (PDF) . Европейское медицинское агентство . 2013.
  8. ^ Cavazzana-Calvo M , Hacein-Bey S, de Saint Basile G, Gross F, Yvon E, Nusbaum P и др. (Апрель 2000 г.). «Генная терапия тяжелого комбинированного иммунодефицита человека (SCID) -X1». Наука . 288 (5466): 669–72. Bibcode : 2000Sci ... 288..669C . DOI : 10.1126 / science.288.5466.669 . PMID 10784449 . 
  9. ^ Вармус, Гарольд; Гроб, Джон М .; Хьюз, Стивен Х., ред. (1997). «Принципы дизайна ретровирусных векторов» . Ретровирусы . Плейнвью, Нью-Йорк: Лаборатория издательства Колд-Спринг-Харбор. ISBN 978-0-87969-571-2.
  10. ^ Hacein-Bey-Abina S, Le Deist F, Carlier F, Bouneaud C, Hue C, De Villartay JP и др. (Апрель 2002 г.). «Устойчивая коррекция Х-сцепленного тяжелого комбинированного иммунодефицита с помощью генной терапии ex vivo». Медицинский журнал Новой Англии . 346 (16): 1185–93. DOI : 10.1056 / NEJMoa012616 . PMID 11961146 . 
  11. ^ Hacein-Bey-Abina S, Von Kalle C, Schmidt M, McCormack MP, Wulffraat N, Leboulch P, et al. (Октябрь 2003 г.). «LMO2-ассоциированная пролиферация клональных Т-клеток у двух пациентов после генной терапии SCID-X1». Наука . 302 (5644): 415–9. Bibcode : 2003Sci ... 302..415H . DOI : 10.1126 / science.1088547 . PMID 14564000 . S2CID 9100335 .  
  12. ^ Марини Б., Кертес-Фаркас А., Али Х., Лючич Б., Лисек К., Манганаро Л. и др. (Май 2015 г.). «Ядерная архитектура диктует выбор места для интеграции ВИЧ-1». Природа . 521 (7551): 227–31. Bibcode : 2015Natur.521..227M . DOI : 10,1038 / природа14226 . PMID 25731161 . S2CID 974969 .  
  13. ^ Каттольо C, Факкини G, Сартори Д., Антонелли А, Миччио А, Кассани Б. и др. (Сентябрь 2007 г.). «Горячие точки интеграции ретровирусов в человеческие CD34 + гемопоэтические клетки». Кровь . 110 (6): 1770–8. DOI : 10.1182 / кровь-2007-01-068759 . PMID 17507662 . 
  14. ^ Montini E, Cesana D, Schmidt M, Sanvito F, Ponzoni M, Bartholomae C и др. (Июнь 2006 г.). «Перенос гена гемопоэтических стволовых клеток на мышиной предрасположенной к опухоли модели раскрывает низкую генотоксичность интеграции лентивирусного вектора». Природа Биотехнологии . 24 (6): 687–96. DOI : 10.1038 / nbt1216 . PMID 16732270 . S2CID 8966580 .  
  15. ^ Lidonnici MR, Paleari Y, Tiboni F, Mandelli G, Rossi C, Vezzoli M и др. (Декабрь 2018 г.). «Множественные интегрированные доклинические исследования предсказывают безопасность опосредованной лентивирусами генной терапии β-талассемии» . Молекулярная терапия. Методы и клинические разработки . 11 : 9–28. DOI : 10.1016 / j.omtm.2018.09.001 . PMC 6178212 . PMID 30320151 .  
  16. ^ Рамос-Кури М., Рапти К., Мехел Х, Чжан С., Дхандапани П.С., Лян Л. и др. (Ноябрь 2015 г.). «Доминирующий отрицательный Ras ослабляет патологическое ремоделирование желудочков при гипертрофии сердца при перегрузке давлением» . Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Исследование молекулярных клеток . 1853 (11 Pt A): 2870–84. DOI : 10.1016 / j.bbamcr.2015.08.006 . PMC 4715892 . PMID 26260012 .  
  17. ^ а б Нуссбаум, Роберт Л; Макиннес, Родерик Р.; Уиллард, Хантингтон Ф (2015). Томпсон и Томпсон Генетика в медицине . Канада: ЭЛЬСЕВЬЕР. п. 278. ISBN 978-1-4377-0696-3.
  18. ^ МакКарти DM, Монахан PE, Самульский RJ (август 2001). «Самокомплементарные рекомбинантные векторы аденоассоциированного вируса (scAAV) способствуют эффективной трансдукции независимо от синтеза ДНК» . Генная терапия . 8 (16): 1248–54. DOI : 10.1038 / sj.gt.3301514 . PMID 11509958 . 
  19. ^ a b Авраам, Петр; Хаммонд, Розмари В .; Хаммонд, Джон (2020-06-10). "Переносчики вирусов растений: применение в сельскохозяйственной и медицинской биотехнологии". Ежегодный обзор вирусологии . 7 . DOI : 10.1146 / annurev-virology-010720-054958 . ISSN 2327-0578 . PMID 32520661 .  
  20. ^ Пасин, Фабио; Menzel, Wulf; Дарос, Хосе-Антонио (июнь 2019 г.). «Запрещенные вирусы в эпоху метагеномики и синтетической биологии: обновленная информация о сборке инфекционных клонов и биотехнологиях вирусов растений» . Журнал биотехнологии растений . 17 (6): 1010–1026. DOI : 10.1111 / pbi.13084 . ISSN 1467-7652 . PMC 6523588 . PMID 30677208 .   
  21. ^ Huang S, M Kamihira (2013). «Разработка гибридных вирусных векторов для генной терапии». Достижения биотехнологии . 31 (2): 208–23. DOI : 10.1016 / j.biotechadv.2012.10.001 . PMID 23070017 . 
  22. ↑ a b Nayak S, Herzog RW (март 2010 г.). «Успехи и перспективы: иммунные ответы на вирусные векторы» . Генная терапия . 17 (3): 295–304. DOI : 10.1038 / gt.2009.148 . PMC 3044498 . PMID 19907498 .  
  23. ^ Чжоу HS, Лю DP, Лян CC (ноябрь 2004). «Проблемы и стратегии: иммунные ответы в генной терапии» . Обзоры медицинских исследований . 24 (6): 748–61. DOI : 10.1002 / med.20009 . PMID 15250039 . S2CID 17622444 .  
  24. ^ Кроммелин DJ, Синделар RD, Meibohm B (2008). Фармацевтическая биотехнология: основы и применение . Лондон: Тейлор и Фрэнсис . ISBN 978-1420044379.
  25. ^ Ян Зи, Wyatt LS, Гонконг WP, Муди Z, Мосс B, Набель GJ (январь 2003). «Преодоление иммунитета к вирусной вакцине путем праймирования ДНК перед векторным бустингом» . Журнал вирусологии . 77 (1): 799–803. DOI : 10,1128 / JVI.77.1.799-803.2003 . PMC 140625 . PMID 12477888 .  
  26. ^ Pandey A, Singh N, Vemula SV, Couëtil L, Katz JM, Donis R и др. (2012). Суббия Э (ред.). «Влияние существовавшего ранее иммунитета аденовирусного вектора на иммуногенность и защиту, обеспечиваемую вакциной против гриппа H5N1 на основе аденовируса» . PLOS ONE . 7 (3): e33428. Bibcode : 2012PLoSO ... 733428P . DOI : 10.1371 / journal.pone.0033428 . PMC 3303828 . PMID 22432020 .  

Внешние ссылки [ править ]

  • Торашима, Т .; Koyama, C .; Higashida, H .; Хираи, Х. (2007). «Производство нейрон-предпочтительных лентивирусных векторов». Обмен протоколами . DOI : 10.1038 / nprot.2007.89 .
  • Okada, Y .; Икава, М. (2007). «Манипуляция специфическим геном плаценты путем трансдукции бластоцисты, свободной от зоны, с использованием лентивирусного вектора». Обмен протоколами . DOI : 10.1038 / nprot.2007.62 .
  • Фрай Дж. У., Вуд К. Дж. (8 июня 1999 г.). «Сравнение векторов, используемых для клинического переноса генов» . Обзоры экспертов в области молекулярной медицины .