Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

Сукцинимидиловый эфир диацетата карбоксифлуоресцеина ( CFDA-SE ) представляет собой проницаемый для клеток краситель, обычно используемый в исследованиях пролиферации клеток животных. Высокие концентрации красителя токсичны для клеток животных, однако концентрации в районе 10 микромолей обычно достаточны для получения сильного окрашивания с минимальной гибелью клеток.

CFDA-SE проникает в клетку путем диффузии и расщепляется внутриклеточной эстеразы ферментов с образованием амина -reactive продукт, CFSE . Этот продукт дает детектируемую флуоресценцию и ковалентно связывается с внутриклеточными остатками лизина и другими источниками аминов. Большинство типов клеток выделяют часть красителя в течение первых 24–48 часов после окрашивания. После этого уровни красителя должны оставаться относительно стабильными в неделящихся клетках. Если окрашенная клетка делится, краситель делится поровну между двумя дочерними клетками, в результате чего обе новые клетки имеют концентрацию CFDA-SE.примерно 50% от материнской клетки. Клетка, окрашенная CFDA-SE, может храниться в культуре в течение нескольких дней, и флуоресценция обнаруживается в клетках после 8 последовательных делений клеток. Флуоресценцию обычно обнаруживают с помощью проточного цитометра на детекторе FL1, при этом каждый результирующий флуоресцентный пик представляет собой очередной раунд деления клеток. Площадь каждого пика представляет количество клеток в данном цикле деления. Окрашивание лучше всего работает с относительно однородными популяциями клеток.

CFDA-SE часто ошибочно называют CFSE даже в научной литературе. [1]

См. Также [ править ]

Ссылки [ править ]