Тест цитрата определяет способность организма использовать цитрат в качестве единственного источника углерода и энергии.
Принцип [ править ]
Бактерии инокулируют в среде, содержащей цитрат натрия и индикатор pH, такой как бромтимоловый синий . Среда также содержит неорганические соли аммония, которые используются как единственный источник азота. Использование цитрата включает фермент цитразу , который расщепляет цитрат до оксалоацетата и ацетата . Оксалоацетат далее расщепляется на пируват и диоксид углерода (CO 2 ). Производство бикарбоната натрия (NaHCO 3 ), а также аммиака (NH 3) от использования цитрата натрия и солей аммония приводит к щелочному pH. Это приводит к изменению цвета среды с зеленого на синий.
Бактериальные колонии собирают с прямой проволоки и инокулируют на склоне цитратного агара Симмонса и инкубируют в течение ночи при 37 ° C. Если организм способен использовать цитрат, среда меняет свой цвет с зеленого на синий.
Примеры:
- Escherichia coli : отрицательно
- Klebsiella pneumoniae : положительный результат
- Frateuria aurantia : положительный
Метод [ править ]
Засейте цитратный агар Simmons (не засевайте сильно) с помощью прямой проволоки от колонии возрастом от 18 до 24 часов. Засев из бульонной культуры не рекомендуется, так как посевной материал будет слишком тяжелым. Инкубируйте при 35 ° C до семи дней.
Результаты [ править ]
Положительный: рост на среде даже без изменения цвета считается положительным. [1] Изменение цвета среды будет наблюдаться, если тестируемый организм вырабатывает кислоту или щелочь во время своего роста. Обычно наблюдается изменение цвета с зеленого (нейтральный) на синий (щелочной).
Минус: роста не наблюдается.
Ссылки [ править ]
- ^ А. Форбс, Бетти; Дэниел Ф. Сам; Алиса С. Вайсфельд (1998). Диагностическая микробиология BAILEY & SCOTT'S (десятое изд.). Дон Ладиг. п. 430 . ISBN 0-8151-2535-6.
