Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
S. aureus использует коагулазу для формирования фибриновой оболочки из фибриногена, присутствующего в кровотоке. Это помогает бактериям избежать обнаружения и фагоцитоза иммунной системой.

Коагулаза - это белковый фермент, вырабатываемый несколькими микроорганизмами, который позволяет превращать фибриноген в фибрин . В лаборатории он используется для различения разных типов изолятов стафилококка . Важно отметить, что S. aureus обычно коагулазо-положительный, а это означает, что положительный тест на коагулазу указывает на присутствие S. aureus или любого из 11 других коагулаз-положительных стафилококков . [1] Отрицательный тест на коагулазу вместо этого покажет присутствие коагулазонегативных организмов, таких как S. epidermidis илиS. saprophyticus . Однако сейчас известно, что не все S. aureus являются коагулазо-положительными. [2] [3]

Его также производят Yersinia pestis . [4]

Коагулаза вступает в реакцию с протромбином в крови. Полученный комплекс называется стафилотромбином , который позволяет ферменту действовать как протеаза для преобразования фибриногена, белка плазмы, вырабатываемого печенью, в фибрин. Это приводит к свертыванию крови. Коагулаза плотно связана с поверхностью бактерии S. aureus и может покрывать ее поверхность фибрином при контакте с кровью. Сгусток фибрина может защитить бактерию от фагоцитоза и изолировать ее от других защитных механизмов хозяина. [5] Таким образом, фибриновая оболочка может сделать бактерии более вирулентными. Связанная коагулаза является частью более крупного семейства белков адгезина MSCRAMM.

Коагулазный тест [ править ]

Тест коагулазо традиционно используется для дифференциации золотистого стафилококка от коагулазонегативных стафилококков . S.aureus продуцирует две формы коагулазы (т.е. связанную коагулазу и свободную коагулазу). Связанная коагулаза, также известная как «фактор слипания» , может быть обнаружена путем проведения теста на коагулазу на предметном стекле, а свободная коагулаза может быть обнаружена с помощью теста на коагулазу в пробирке.

Слайд-тест [ править ]

Тест на коагулазу на слайдах проводится с отрицательным контролем, чтобы исключить аутоагглютинацию. Две капли физиологического раствора наносят на предметное стекло с номером образца, Test (T) и контролем (C). Две капли физиологического раствора эмульгируют с тестируемым организмом с помощью проволочной петли, прямой проволоки или деревянной палочки. Каплю плазмы ( рекомендуется кроличья плазма, антикоагулированная ЭДТА ) [6] помещают на каплю с инокулированным физиологическим раствором, соответствующую тесту, и хорошо перемешивают, затем осторожно покачивают предметное стекло в течение примерно 10 секунд.

  • Если результат «положительный», в плазме будет наблюдаться макроскопическое слипание в течение 10 секунд без слипания в капле физиологического раствора.
  • Если «отрицательный», комкования не будет.

Если тест на коагулазу на слайдах отрицательный, в качестве подтверждения следует провести тест в трубке. Слипание обеих капель является признаком аутоагглютинации, поэтому следует провести тест через трубку. Пробирки не проводятся в каждом учреждении, но большая часть результатов зависит от лабораторных посевов крови.

Тест трубки [ править ]

Фибриновый сгусток, образовавшийся в пробирке в результате коагулазной реакции.

В пробирке используется плазма кролика , засеянная колонией стафилококков (т. Е. Грамположительными кокками, которые являются каталазоположительными ). Затем пробирку инкубируют при 37 ° C в течение 1,5 часов. В случае отрицательного результата инкубацию продолжают до 18 часов.

  • Если «положительный» (например, подозреваемая колония - S. aureus ), плазма будет свертываться, [7] приводя к образованию сгустка (иногда сгусток настолько выражен, что жидкость полностью затвердевает).
  • Если «отрицательный», плазма остается жидкой. Отрицательный результат может быть S. epidermidis, но только более подробный идентификационный тест может подтвердить это с использованием биохимических тестов, как и в методах аналитических тестов профиля . Ложноотрицательный результат можно получить, если образец не охладить в течение примерно 30 минут при комнатной температуре или 10 минут в морозильной камере, учитывая, что сыворотка может расплавиться. Если результат действительно отрицательный, после охлаждения сыворотка останется жидкой.
  • Список коагулазоположительных стафилококков: Staphylococcus aureus subsp. anaerobius , S. aureus subsp. aureus , S. delphini , S. hyicus , S. intermediateus , S. lutrae и Staphylococcus schleiferi subsp. коагулянты .
  • Список коагулазонегативных стафилококков, имеющих клиническое значение: S. saprophyticus , S.cohnii subsp. cohnii , S. cohnii subsp. urealyticum , S. captitus subsp. captitus , S. warneri , S.hominis , S.epidermidis , S. caprae и S.lugdunensis

Ссылки [ править ]

  1. ^ . Beckerдр 2014. PMID: 25278577
  2. ^ Райан KJ, Рэй CG (редакторы) (2004). Шеррис Медицинская микробиология (4-е изд.). Макгроу Хилл. ISBN  0-8385-8529-9 .
  3. ^ PreTest, Surgery, 12-е изд., Стр.88
  4. ^ " коагулаза " в Медицинском словаре Дорланда
  5. ^ Tortora, Джерард Дж .; Funke, Berdell R .; Случай, Кристин Л. (2013). Микробиология: Введение (11-е изд.). Гленвью, Иллинойс: Pearson Education Inc., стр. 434. ISBN 978-0-321-73360-3.
  6. ^ А. Форбс, Бетти; Дэниел Ф. Сахм; Алиса С. Вайсфельд (1998). Диагностическая микробиология BAILEY & SCOTT'S ( десятое изд.). Дон Ладиг. С.  430–431 . ISBN 0-8151-2535-6.
  7. ^ " тест на коагулазу " в Медицинском словаре Дорланда

Внешние ссылки [ править ]

  • Пробирка на коагулазу - видео кроличьей плазмы
  • Коагулаза в Национальной медицинской библиотеке США по предметным медицинским рубрикам (MeSH)
  • Процедура теста на коагулазу