Цитоцентрифуга , иногда упоминается как цитоспин , [1] является специализированной центрифугой используется для концентрации клеток в жидких образцах на предметном стекло микроскопа , так что они могут быть окрашены и изучены. [2] Цитоцентрифуги используются в различных областях клинической лаборатории , таких как цитопатология , гематология и микробиология , а также в биологических исследованиях. Этот метод можно использовать на многих различных типах образцов, включая аспираты тонкой иглы , спинномозговую жидкость , серозные исиновиальная жидкость и моча . [3]
Процедура [ править ]
Для приготовления мазков из цитоцентрифуги к передней части предметного стекла микроскопа прикрепляют воронку. Поверхность узла воронки, которая контактирует с предметным стеклом, выстлана фильтровальной бумагой для поглощения лишней жидкости. В воронку помещается несколько капель жидкости. Сборка помещается в цитоцентрифугу, которая работает с низкой силой (600-800 мкг) для сохранения клеточной структуры. [4] Центробежная сила выталкивает жидкость через отверстие воронки и концентрирует клетки на небольшом участке предметного стекла. В процессе центрифугирования клетки концентрируются примерно в двадцать раз [5] и создается монослой толщиной в одну клетку, что позволяет оценить морфологию клеток. Затем предметное стекло можно зафиксировать и окрасить. [6][7]
Приложения [ править ]
Некоторые применения цитоцентрифуг включают:
- Выполнение дифференциального подсчета клеток в жидкостях организма, таких как серозная , синовиальная и спинномозговая жидкость [4]
- Цитопатологическое исследование жидких образцов, таких как биологические жидкости и аспираты тонкой иглой [3] [8]
- Окрашивание по Граму образцов жидкости для идентификации микроорганизмов [9]
Ограничения [ править ]
Процесс цитоцентрифугирования может привести к искажению клеток. Клетки, расположенные в центре мазка, могут выглядеть сжатыми по сравнению с клетками на периферии. Ядра клеток могут образовывать артефактные щели, доли или отверстия [4], а цитоплазма может казаться вакуолизированной или иметь нерегулярные выступы. Цитоплазматические гранулы могут выталкиваться к периферии клетки. Если количество ячеек велико, ячейки могут быть искажены из-за скопления людей; поэтому образцы с большим количеством клеток разбавляются перед приготовлением мазка. [10]
История [ править ]
Изучение клеток в биологических жидкостях исторически проводилось с использованием гемоцитометра , камеры, предназначенной для микроскопического подсчета клеток. Этот метод был ограничен плохим различением типов клеток (клетки можно было классифицировать только как мононуклеарные или полиморфноядерные) и небольшим количеством клеток, присутствующих в неконцентрированных жидкостях организма. Более того, этот метод не позволил получить постоянную запись об образце. [10] В статье 1966 года Уотсон П. описал первую цитоцентрифугу, назвав ее «устройством для концентрирования клеток в суспензии на предметном стекле микроскопа». [11] Устройство было коммерчески продано в 1970-х годах, а в 1983 году оно было запатентовано Shandon (теперь Thermo Scientific). По состоянию на 2012 год на рынке существует множество торговых марок цитоцентрифуг. [8]
Ссылки [ править ]
- ^ Линда Макманус; Ричард Митчелл (1 августа 2014 г.). Патобиология болезней человека: динамическая энциклопедия механизмов болезней . Elsevier Science. п. 3365. ISBN 978-0-12-386457-4.
- ↑ Мэри Луиза Тержен (23 марта 2015 г.). Клиническая лабораторная наука Линне и Рингсруд: концепции, процедуры и клиническое применение (7-е изд.). Elsevier Mosby. п. 146. ISBN. 978-0-323-22545-8.
- ^ a b Стоукс, Барри О. (2004). «Принципы цитоцентрифугирования» . Лабораторная медицина . 35 (7): 434–437. DOI : 10,1309 / FTT59GWKDWH69FB0 . ISSN 0007-5027 .
- ^ a b c Нэнси А. Брюнзель (5 ноября 2016 г.). «Глава 17: Анализ жидкости тела» . Основы анализа мочи и биологических жидкостей . Elsevier Health Sciences. С. 356–58. ISBN 978-0-323-39636-3.
- ↑ Кэтрин А. Галаган (2006). Цветовой атлас биологических жидкостей: иллюстрированное практическое руководство, основанное на проверке квалификации . Колледж американских патологов . С. 13–14. ISBN 978-0-930304-91-1.
- ^ Бехдад Shambayati (17 февраля 2011). Цитопатология . ОУП Оксфорд. п. 24. ISBN 978-0-19-953392-3.
- ^ Элейн М. Кеохан; Ларри Смит; Жанин М. Валенга (19 февраля 2015 г.). Гематология Родака: клинические принципы и применение . Elsevier Health Sciences. С. 270–1. ISBN 978-0-323-32716-9.
- ^ a b Гэри Гилл (19 октября 2012 г.). «Глава 6: Цитоцентрифугирование» . Цитопрепарат: принципы и практика . Springer Science & Business Media. С. 73–84. ISBN 978-1-4614-4932-4.
- ↑ Конни Р. Махон; Дональд С. Леман; Джордж Мануселис (25 марта 2014 г.). Учебник диагностической микробиологии - электронная книга . Elsevier Health Sciences. п. 129. ISBN 978-0-323-29262-7.
- ^ a b Дениз Харменнинг (2009). «Глава 30: Исследование биологических жидкостей: качественный, количественный и морфологический анализ». Клиническая гематология и основы гемостаза (5-е изд.). Компания FA Davis. С. 720–757. ISBN 978-0-8036-1732-2.
- Перейти ↑ Watson P (1966). «Центрифуга на предметном стекле: устройство для концентрирования клеток в суспензии на предметном стекле микроскопа» . J Lab Clin Med . 68 (3): 494–501. PMID 5922759 .
