HEK 293 ячейки
Клетки эмбриональной почки человека 293 , также часто называемые клетками НЕК 293 , НЕК-293 , 293 , или менее точно клетками НЕК , представляют собой специфическую иммортализованную клеточную линию , полученную из клеток плода , подвергшихся спонтанному выкидышу или абортированному плоду , или клеток эмбриональной почки человека , выращенных в ткани культура взята у плода женского пола в 1973 г. [1] [2]
Клетки HEK 293 уже много лет широко используются в исследованиях клеточной биологии из-за их надежного роста и склонности к трансфекции . Они также используются биотехнологической промышленностью для производства терапевтических белков и вирусов для генной терапии , а также для тестирования безопасности широкого спектра химических веществ.
293T (или HEK 293T ) представляет собой производную линию клеток человека , которая экспрессирует мутантную версию большого Т-антигена SV40 . Он очень широко используется в биологических исследованиях для создания белков и получения рекомбинантных ретровирусов .
Клетки HEK 293 были получены в 1973 году путем трансфекции культур нормальных эмбриональных клеток почки человека ДНК аденовируса 5 , подвергшейся срезу, в лаборатории Алекса ван дер Эба в Лейдене, Нидерланды . Клетки были получены от одного абортированного или перенесшего выкидыш плода, точное происхождение которого неясно. [3] [2] Клетки культивировали по van der Eb; трансдукция аденовирусом была проведена Фрэнком Грэмом , постдоком в лаборатории ван дер Эба. Они были опубликованы в 1977 году после того, как Грэм уехал из Лейдена в Университет Макмастера . [4]Их называют НЕК, поскольку они возникли в культурах почек эмбрионов человека, а число 293 произошло из-за привычки Грэма нумеровать свои эксперименты; исходный клеточный клон HEK 293 был получен из его 293-го эксперимента. Грэм выполнил трансфекцию в общей сложности восемь раз, получив только один клон клеток, которые культивировали в течение нескольких месяцев. После предположительной адаптации к культуре ткани клетки этого клона развились в относительно стабильную линию НЕК 293.
Последующий анализ показал, что трансформация была вызвана вставкой ~4,5 килобазы из левого плеча вирусного генома, которые были включены в хромосому 19 человека . [5]
В течение многих лет предполагалось, что клетки НЕК 293 образуются путем трансформации либо фибробластных , либо эндотелиальных , либо эпителиальных клеток , которые в большом количестве присутствуют в почках. Однако первоначальная трансформация аденовируса была неэффективной, что позволяет предположить, что клетка, которая в конечном итоге произвела линию HEK 293, могла быть в некотором роде необычной. Грэм и его коллеги представили доказательства того, что клетки НЕК 293 и другие клеточные линии человека, полученные в результате трансформации аденовирусом эмбриональных клеток почек человека, обладают многими свойствами незрелых нейронов , предполагая, что аденовирус предпочтительно трансформировал клетки нейронального происхождения в исходной культуре почек. [6]
